首页 > 文献资料
-
唐山工人医院重症监护病房耐碳青霉烯肺炎克雷白菌耐药表型分析
目的:检测耐碳青霉烯肺炎克雷白菌KPC酶及金属酶,为临床合理用药提供实验室依据.方法:选择耐碳青霉烯肺炎克雷白菌35株,采用改良Hodge试验检测KPC酶,采用纸片协同法检测金属酶.结果:35株肺炎克雷白菌改良Hodge试验均呈阳性;其不但对碳青霉烯类抗生素耐药,且对大部分β内酰胺类抗生素耐药(耐药率100%),对喹诺酮类抗生素耐药(耐药率>70%);对少数抗生素,如头孢哌酮/舒巴坦、阿米卡星、米诺环素、复方新诺明耐药率较低.2株同时产KPC及MBL的肺炎克雷白菌对碳青霉烯类抗生素耐药,其对所检测抗生素耐药率均100%.结论:耐碳青霉烯肺炎克雷白菌既能将耐药基因传递给其他细菌,同时又能够接受其他细菌的耐药基因,使该菌更易产生耐药性.
-
一株产IMP-1型金属β-内酰胺酶并缺失外膜蛋白OprD2铜绿假单胞菌的检出
产金属β-内酰胺酶(metal-β-lactamases,金属酶)和缺失外膜蛋白OprD2是铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药的主要原因.我们从一例严重肺部感染患者痰标本中分离出一株产IMP-1型金属酶并缺失外膜蛋白OprD2的铜绿假单胞菌.
-
评价儿童锌营养状况的指标
目前已经应用于评价人体锌营养状态的指标有:①血浆和血清锌的浓度; ②发锌浓度;③锌的代谢平衡计算;④同位素示踪的应用;⑤尿锌的排出;⑥补锌引起的生长发育和性功能变化;⑦锌依赖性金属酶(SOD和ATP等)活性的测定[1,2].然而, 以上这些指标的应用都具有一定的局限性,国内外对此争议很大,普遍认为目前还缺少评价机体锌营养状况的权威性、敏感性、特异性的指标.本研究探讨应用比较普遍的锌营养状态评价指标的敏感性、可靠性和相互关系.
-
昆虫酪氨酸酶的研究进展
酪氨酸酶(tyrosinase)又叫多酚氧化酶(polyphenol oxidase,PPO或phenoloxidase,PO),广泛存在于动物、植物及微生物中[1].酪氨酸酶是二价铜离子(Cu2+)与酶蛋白相结合的一种金属酶,兼有加氧酶和氧化酶的双重功能,能将单酚加氧成二酚,又可以将二酚等多元酚氧化成醌[2],酪氨酸酶的这种双重反应功能,对生物体黑色素的形成和外来物侵入时获得性免疫反应的产生至关重要[3-4].20世纪30年代,Bodine和Allen在异黑蝗(Melanoplus differentialis)的卵中发现了酚氧化酶[5].
-
儿科对碳青霉烯类耐药铜绿假单胞菌产金属酶的研究
目的 了解目前儿科对碳青霉烯类抗生素耐药铜绿假单胞菌产金属酶的情况.方法 本研究收集了2003年12月至2005年11月,北京儿童医院住院患儿中分离出对碳青霉烯类抗生素耐药的铜绿假单胞菌59株.使用E试验法检测金属酶的耐药表型,PCR技术检测编码金属酶的IMP、VIM、SPM和GIM 4种基因型.结果 本研究59株对碳青霉烯类抗生素耐药铜绿假单胞菌中,29株金属酶耐药表型结果阳性,占49.2%.39株金属酶基因型阳性,占66.1%,其中扩增出IMP型阳性35株,占89.7%,VIM型阳性4株,占10.3%.未检测出SPM和GIM型金属酶.对哌拉西林、哌拉西林-他唑巴坦产金属酶不敏感率高于非产金属酶菌株,差异有统计学意义(P＜0.05).对产金属酶菌株β-内酰胺类抗生素头孢噻肟、头孢哌酮、头孢他啶、头孢吡肟、头孢哌酮-舒巴坦的MIC50均达到256μg/ml,MIC90均大于256μg/ml,高于非产金属酶菌株.结论 从本研究分离的菌株显示儿科铜绿假单胞菌产金属酶率高于成人报道,产金属酶是儿科分离对碳青霉烯类抗生素耐药铜绿假单胞菌的重要耐药机制.且以产IMP型金属酶为主,少部分产VIM型金属酶.产金属酶菌株对β-内酰胺类抗生素耐药比非产金属酶菌株更严重,尤其对哌拉西林和哌拉西林-他唑巴坦耐药性高.E试验法易用于铜绿假单胞菌产金属酶的初步筛选,但不能单独作为检测铜绿假单胞菌产生金属酶的确证性试验.
-
儿科患者中对碳青霉烯类不敏感肠杆菌科细菌耐药性和耐药基因的研究
目的 研究儿科临床分离的对碳青霉烯类抗生素不敏感的肠杆菌科细菌耐药性和产生碳青霉烯酶的耐药基因特征.方法 收集2008年1月至2010年12月北京儿童医院住院患儿分离出的46株对碳青霉烯类抗生素不敏感的肠杆菌科细菌.使用琼脂稀释法进行药敏试验,测定抗菌药物的低抑菌浓度(MIC)值,按照临床实验室标准化研究所(CLSI) 2011年推荐标准判断结果.使用改良Hodge试验和双纸片协同试验,进行产碳青霉烯酶的表型确证.使用PCR方法进行碳青霉烯酶相关耐药基因的检测.采用WHONET5.6软件进行数据分析.结果 46株对碳青霉烯类抗生素不敏感的肠杆菌科细菌,26株为肺炎克雷伯菌,占56.5％,13株为阴沟肠杆菌,占28.3％,7株为大肠埃希菌,占15.2％.对亚胺培南和美罗培南不敏感率分别为肺炎克雷伯菌69.2％和80.8％,阴沟肠杆菌76.9％和100％,大肠埃希菌85.7％和100％.46株肠杆菌科细菌,改良Hodge试验阳性40株(87.0％),双纸片协同试验阳性41株(89.1％).IMP基因阳性38株(82.6％),其余8株均未扩增出特异性条带检测均为阴性.结论 目前儿科临床分离对碳青霉烯类抗生素不敏感菌株中,肺炎克雷伯菌多,占56.5％.肺炎克雷伯菌、阴沟肠杆菌和大肠埃希菌对碳青霉烯类抗生素亚胺培南不敏感程度低于美罗培南,对碳青霉烯不敏感肠杆菌科细菌主要产生B类金属酶,均为IMP基因型.
-
铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药机制的研究
铜绿假单胞菌是引起医院内感染的主要病原菌.亚胺培南(IMP)作为革兰阴性菌的有效的抗生素,随着青霉烯类抗生素的广泛应用,铜绿假单胞菌的耐药菌株逐渐增多,给临床治疗带来困难.这与铜绿假单胞菌的主动外排机制以及特异性膜蛋白OprD2的缺失有关,能够水解碳青霉烯类抗生素的新β-内酰胺酶--金属酶的产生, 对碳青霉烯类抗生素的使用造成了更大威胁.本研究分析耐亚胺培南铜绿假单胞菌产生金属酶合并外膜蛋白OprD2的缺失.
-
亚胺培南治疗铜绿假单胞菌所致新生儿下呼吸道严重感染失败分析
目的研究亚胺培南治疗新生儿下呼吸道铜绿假单胞菌感染失败因素.方法分析1例重度窒息新生儿,下呼吸道分泌物检出大量铜绿假单胞菌,药敏试验亚胺培南敏感,用治疗剂量亚胺培南静脉滴注1 h滴完,连续4 d,然后再培养分析.结果新生儿窒息症状无改善,再次检出大量铜绿假单胞菌,经药物敏感试验证实亚胺培南耐药,经检测发现其外膜蛋白(OprD2)含量相对减少且已诱导出金属酶.结论治疗剂量亚胺培南静脉滴注时间过长导致血药浓度低于治疗浓度,诱导铜绿假单胞菌OprD2缺失及产生金属酶.正确使用亚胺培南至关重要.
-
耐亚胺培南铜绿假单胞菌的耐药情况及其产金属酶的相关基因VIM-2的研究
目的 了解临床分离耐亚胺培南铜绿假单胞菌(imipenem-resistant Pseudomonas aeruginosa,IMPRPA)的耐药特征,探讨该菌产金属β-内酰胺酶及其相关基因VIM-2对抗菌药物耐药性的影响.方法 收集3年临床分离的铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)共1426株,采用MIC法测定抗生素耐药性；用复合纸片法筛查IMPRPA产金属β-内酰胺酶的菌株；聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)法对金属酶相关基因VIM-2进行检测并测序确定.采用SPSS 11.5统计软件对数据进行统计学分析.结果 1426株PA中,IMPRPA为910株(63.8％),非IMPRPA为516株(36.2％)；IMPRPA对12善抗生素的耐药率除四环素外,均显著高于非IMPRPA,差异均有统计学意义(P均＜0.05).910株IMPRPA均为多重耐药株,多重耐药率为63.8％,显著高于非IMPRPA的5.0％(71株),差异具有统计学意义(P＜0.05).910株IMPRPA中检出产金属β-内酰胺酶168株,占18.5％(168/910);168株IMPRPA采用PCR扩增,检出135株IMPRPA (80.4％,135/168)携带有blaVIM-2型基因.结论 IMPRPA耐药性强,多重耐药现象严重,VIM-2型金属酶基因型在产金属β-内酰胺酶的1MPRPA菌株中检出率高,但该基因并不是PA产金属β-内酰胺酶对12种抗菌药物耐药的主要原因.
-
锌与免疫功能
锌是机体必需微量元素之一,参与40多种金属酶的合成,与200多种酶的生物活性有关.锌在免疫系统的形成、稳定调节及维持机体正常免疫功能方面有重要作用.近20年多年来,锌对免疫功能的影响已引起许多营养学家及免疫学家极大的关注.现就锌与机体免疫功能的关系作简要综述:
-
北京地区五家医院获得性铜绿假单胞菌对碳青霉烯类抗菌药物耐药机制研究
目的 研究北京地区5家教学医院临床分离的亚胺培南耐药铜绿假单胞菌(IRPA)对碳青霉烯类抗菌药物耐药的分子机制.方法 收集2004年6月-2005年12月北京地区5家教学医院临床分离的非重复性213株IRPA,采用琼脂稀释法测定美罗培南、亚胺培南等抗菌药物对这些菌株的MIC值;采用纸片法初筛产金属酶菌株;对金属酶IMP-、VIM-基因以及孔道蛋白OprD2基因进行PCR及序列分析.结果 5家教学医院分离的213株IRPA中84株存在孔道蛋白OprD2缺失,其中有6株还同时产IMP-1型金属酶.另有13株IRPA单独产IMP-1型金属酶,2株单独产VIM-2型金属酶.结论 孔道蛋白OprD2缺失、产金属酶是北京地区铜绿假单胞菌(PA)对碳青霉烯类抗菌药物耐药的部分机制.
-
纸片协同试验检测产金属β内酰胺酶细菌
我们建立了一种采用2-巯基丙酸的纸片协同法来检测产金属β内酰胺酶(metal-β-lactamases,简称金属酶)细菌的方法.
-
呼吸重症监护病房多重耐药肺炎克雷伯菌产金属酶-4型耐药基因分析
由于抗菌药物的广泛使用甚至不合理滥用,细菌耐药及多药耐药问题越来越严重,尤其在呼吸重症监护病房,针对肠杆菌科产质粒介导的头孢菌素酶(AmpC酶)和超广谱β-内酰胺酶(ESBL)细菌引起的感染,临床医生常将碳青霉烯类抗菌药物作为首选,这使得近年产金属β-内酰胺酶(BLA blaIMP)的革兰阴性杆菌引起的感染屡有发生,给临床抗感染治疗带来极大的困惑.
-
铜绿假单胞菌耐碳青酶烯类抗菌药物机制分类检测的研究
目的研究铜绿假单胞菌(PA)耐碳青酶烯类抗菌药物机制的分布. 方法应用多底物-多抑制剂协同法检测34株耐碳青酶烯类抗菌药物PA临床分离株,推测其耐药机制并分析其分布. 结果D2缺乏、外排泵和产金属酶分别占3种机制的14.7%、35.3%和50.0%. 结论产金属酶是PA耐碳青酶烯类抗菌药物主要机制.
-
产VIM-2型金属酶铜绿假单胞菌的研究
目的分析烧伤科病房产金属酶铜绿假单胞菌的同源性、金属酶基因型及耐药谱特点. 方法用E-test法进行药物敏感性试验;采用2-巯基乙醇纸片协同试验筛选产金属酶菌株,对金属酶基因和整合酶基因进行聚合酶链反应(PCR)和序列分析;碱裂解法提取质粒,质粒结合、电转化试验和质粒消除试验验证酶基因有无可转移性;应用随机扩增DNA多态性分析技术(RAPD)分析产金属酶菌株的同源性. 结果 48株亚胺培南耐药铜绿假单胞菌2-巯基乙醇纸片协同试验阳性6株,6株菌金属酶引物VIM-2扩增阳性,经测序证实为VIM-2型金属酶,定位于质粒上;RAPD分析显示所有产酶株均来自同一克隆,都携带Ⅰ类整合酶基因. 结论烧伤科病房有产VIM-2型金属酶铜绿假单胞菌流行.
-
嗜麦芽寡养单胞菌金属酶基因及整合子检测分析
目的 分析金属酶基因与整合子在嗜麦芽寡养单胞菌中存在情况.方法 以细菌耐药鉴定系统及改良K-B法进行药敏试验.提取不同标本的DNA与质粒,以PCR反应扩增金属酶基因与整合子.结果 L1、L2金属酶均存在于嗜麦芽寡养单胞菌染色体DNA及质粒DNA中,检测出少数菌株携带整合子Ⅰ、Ⅱ.结论 L1、L2型金属酶基因为嗜麦芽寡养单胞菌多药耐药的重要原因之一,嗜麦芽寡养单胞菌能接受整合子,其耐药特性具有可获得性的.
-
铜绿假单胞菌耐碳青霉烯类相关基因研究的荟萃分析
目的 了解我国临床分离的耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌(CRPA)的相关耐药基因分布,为铜绿假单胞菌的耐药研究和临床治疗提供依据.方法 采用荟萃分析方法,分析我国16个省市铜绿假单胞菌耐碳青霉烯类基因型的分布.结果 16个省市中1140株CRPA外膜通道蛋白oprD2基因缺陷在华中和东北地区检出率高,分别为87.0％和100.0％;编码金属酶基因VIM在东北和西南地区检出率高,分别为20.0％和11.5％;IMP在东北地区检出率高,为40.0％,其他基因型在各个地方呈散在分布;oprD2基因缺陷、编码金属酶基因IMP、编码金属酶基因VIM、编码丝氨酸酶基因OXA、主动外排系统基因MEX等5种基因检出率分别为55.0％、15.4％、9.4％、3.2％、11.4％,oprD2基因缺陷检出率高,明显高于其他基因检出率,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 我国CRPA耐碳青霉烯类相关基因变化以oprD2基因缺陷为主,其次是编码金属酶基因IMP、VIM及编码丝氨酸酶基因OXA的异常表达,主动外排系统基因也是一个重要因素.
-
耐亚胺培南鲍氏不动杆菌碳青霉烯酶基因分析
目的 分析医院耐亚胺培南鲍氏不动杆菌(IRAB)的碳青霉烯酶基因型和基因周围环境,为临床用药及医院感染的预防控制提供理论基础.方法 采用VITEK-2药敏分析系统进行药敏试验,用改良Hodge试验和组合纸片法分别检测碳青霉烯酶和金属酶表型,PCR检测KPC、OXA-23组、OXA-24组、OXA-51组、OXA-58组基因及插入序列ISAbal.结果 36株IRAB改良Hodge阳性率33.3％；未检测到金属酶；36株均携带OXA基因,其中32株OXA-23+ OXA-66阳性,2株仅OXA-66阳性,1株仅OXA-23阳性,1株仅OXA-58阳性；所有OXA-23上游均存在ISAbal,未检出KPC、OXA-24组基因.结论 该院IRAB主要携带OXA-23、OXA-66型碳青霉烯酶,OXA-23与ISAbal关系密切,存在OXA-58阳性鲍氏不动杆菌.
-
耐碳青酶烯类抗菌药物铜绿假单胞菌金属酶研究
目的 分析2006年分离的5株耐碳青酶烯类抗菌药物铜绿假单胞菌产金属酶情况.方法 纸片法(K-B法)测定5株耐碳青酶烯类抗菌药物铜绿假单胞菌对10种抗菌药物的耐药性,琼脂稀释法测定9种抗菌药物对菌株的低抑菌浓度(MIC),2-巯基乙酸纸片协同试验检测菌株产金属酶情况,聚合酶链反应(PCR)和序列分析明确金属酶基因型.结果 5株耐碳青酶烯类抗菌药物铜绿假单胞菌对2-巯基丙酸纸片协同试验阳性1株,该菌株金属酶引物VIM-2扩增阳性,经测序证实为VIM-2型金属酶.结论 发现1株产VIM-2型金属酶的铜绿假单胞菌,该菌株对多种抗菌药物耐药,应当引起临床重视.
-
大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌产碳青霉烯酶的表型检测及耐药分析
目的 了解临床分离的大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶和金属酶的携带情况,并进行相关耐药机制分析.方法 采用VITEK-2型全自动微生物检测系统鉴定细菌；用微量稀释法筛选耐碳青霉烯类抗菌药物的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌共36株；通过Hodge试验检测碳青霉烯酶,以EDTA/IMP、EDTA/CAZ复合纸片,亚胺培南和头孢他啶为底物,进行协同试验检测B类碳青霉烯酶(金属酶),统计分析16种抗菌药物的MIC.结果 36株病原菌对头孢菌素类、碳青霉烯类和喹诺酮类抗菌药物耐药,有5株肺炎克雷伯菌对氨基糖苷类敏感；Hodge试验通过36株病原菌筛选,阳性菌株共30株,其中大肠埃希菌3株,阳性率为37.5％,肺炎克雷伯菌26株,阳性率为92.8％；只发现1株肺炎克雷伯菌金属酶阳性,A方法对金属酶的检测优于B方法.结论 在ICU和呼吸科产碳青霉烯酶是细菌耐药的主要原因.
