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乙型肝炎病毒母婴传播的阻断
HBV垂直传播途径产前宫内感染:即经胎盘感染,目前导致活产新生儿发生宫内HBV感染的机制尚不够清楚,多数认为妊娠晚期胎盘成熟期孕妇胎盘受无形或有形损伤,使母血经胎盘渗漏入胎儿造成感染;也有提出HBV感染胎盘可能是通过细胞与细胞间传递或称渗透式的细胞转移过程等[1～ 3],Wong等提出宫内传播的诊断标准:脐血或出生后第3天婴儿静脉血存在抗-HBcIgM,由于IgM不能通过胎盘,抗-HBcIgM(+)提示婴儿近期有HBV感染;出生后第3天静脉血HBsAg水平高于脐血水平,说明新生儿本身有病毒复制,国内学者通过对妊娠中晚期HBsAg(+)孕妇胎盘病理研究结果显示胎盘蜕膜细胞、滋养叶细胞、绒毛间质细胞、绒毛毛管内皮细胞HBV感染率分别为66.46%、58.23%、27.22%、12.66%,胎盘屏障感染率27
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人胎盘蜕膜细胞5-羟色胺及其受体的免疫组织化学及原位杂交研究
目的:观察5-羟色胺(5-HT)及其受体在人胎盘的定位及其含量的周龄变化. 方法:采用免疫组织化学、原位杂交及图像分析技术. 结果:人胎盘蜕膜细胞呈5-HT及其受体免疫反应性,两种阳性反应物质均分布于胞质,胞核为阴性.蜕膜细胞同样含有5-HT1A受体mRNA杂交信号.蜕膜细胞5-HT及其受体免疫反应产物的相对含量随妊娠周龄的增加而增加. 结论:人胎盘蜕膜细胞既能产生5-HT,又能表达5-HT受体.说明5-HT对蜕膜细胞可能具有自调节作用.
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纵隔淋巴结内良性间皮细胞
淋巴结内出现的良性组织成分大都是"迷走"的腺体组织,如异位子宫内膜、甲状腺、腮腺和胰腺等.非腺体成分则很少,如痣细胞、蜕膜细胞,而间皮细胞出现在淋巴结内更是十分少见,文献上仅有11例报道,其中8例发生于纵隔淋巴结,3例发生于腹腔淋巴结.据报道,在这项研究中间皮细胞出现在纵隔淋巴结的病人均有心包炎或胸膜炎患病史.
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腹膜弥漫性蜕膜细胞样型恶性间皮瘤一例
患者男,76岁.因膀胱癌术后14年,腹胀1年,加重半年于2003年4月入院.患者14年前因无痛性血尿于我院确诊为膀胱癌,行电凝切除术,术后病理:膀胱移行细胞癌.术后定期膀胱镜复查,未发现复发及转移.1年前出现反复腹胀,半年前加重伴体重下降,2个多月减少10 kg.既往有30多年吸烟史,无石棉接触史,无家族史.体检:生命体征平稳,胸部肺气肿征;腹丰满,叩鼓,张力稍高,未扪及确切包块.CT示:脾周、双侧结肠旁沟积液;腹膜增厚,并见小结节;大网膜密度增高呈饼状,其内密度不均;小肠系膜稍肿胀.右下腹肠曲分界不清,肠间积液伴肠曲粘连;肝脾胆胰及双肾未见异常,膀胱未见明显占位.胃镜示:慢性浅表性胃窦炎,未见溃疡.结肠镜示:全结肠、直肠未见异常.血清甲胎蛋白(AFP)、癌胚抗原(CEA)正常,癌抗原CA-125,CA19-9正常.剖腹探查术中见:腹腔内中等量黄色腹水,腹膜及盆腔密布粟粒状红白结节;大网膜肥厚硬韧,满布结节,呈饼块状与腹壁、横结肠系膜浸润;上腹呈冰冻状浸润,无法扪及肝胆、脾及胃十二指肠;小肠系膜肥厚、质韧,满布同性状结节,小肠肠管浆膜间充血、粗糙,失去光泽,其上也满布粟粒大小结节;盆腔腹膜满布结节,膀胱无法完全扪及,膀胱底、盆底、后腹膜满布结节.取结节状两块组织行活检.
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高强度聚焦超声抗大鼠早孕的蜕膜细胞凋亡机制
目的 探讨HIFU抗早孕蜕膜细胞凋亡的机制.方法 HIFU以10 W/cm2辐照孕8 d大鼠子宫90 s.TUNEL法与免疫组织化学法检测蜕膜细胞凋亡及bcl-2和bax蛋白表达.结果 辐照后蜕膜细胞凋亡率及bax/bcl-2比值均高于对照组(P＜0.05).结论 HIFU诱导蜕膜细胞凋亡是其抗早孕机理之一,bax/bcl-2比值增高参与了蜕膜细胞凋亡调控.
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宫颈中IGFBP-1高磷酸化异构体用于测定宫颈成熟度的研究
胰岛素样生长因子结合蛋白-1(IGFBP-1)的高磷酸化异构体主要由人蜕膜细胞产生,能用单克隆抗体6303检测.
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妊娠相关血浆蛋白-A在卵泡发育中的作用
妊娠相关血浆蛋白-A(PAPP-A),是一种早在孕妇血清中发现的高分子量的黏多糖蛋白,曾主要用于高危妊娠的产前筛查.随着分子生物学技术的发展和对子宫、卵巢分子水平的深入研究,人们发现,PAPP-A不但存在于孕妇血清中,也存在于子宫内膜基质细胞、蜕膜细胞及卵巢颗粒细胞、卵泡液中.
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米非司酮配伍米索前列醇终止12～26周妊娠120例分析
自1994年米非司酮首次用于终止中期妊娠以来,其效果已得到肯定,但具体剂量及给药途径仍在探索中.有研究表明终止早孕的剂量同样适用于中期妇娠[1].我院对孕12～26 w要求终止妊娠者,采用米非司酮顿服配伍米索前列醇阴道放置药物流产,并与利凡诺羊膜腔注射引产对比,观察两者用于终止中期妊娠的安全性及有效性,现将结果报告如下.
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孕妇PAPP-A测定筛查异常妊娠
妊娠相关血浆蛋白A(Pregnancy associated Plasma Protein A,下称PAPP-A)是一种由胎盘滋养层合体细胞和蜕膜细胞产生的糖蛋白.70年代,Lin等从孕妇血浆分离并命名.PAPP-A分子量820KDA,等电点4.42,含糖量19.4%[1].
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肿瘤坏死因子α诱导蜕膜细胞凋亡模型建立及黄芩苷对蜕膜细胞凋亡的影响
目的:探索建立肿瘤坏死因子诱导蜕膜细胞凋亡模型,观察黄芩苷对早孕蜕膜细胞凋亡的影响,初步分析黄芩清热安胎作用机制.方法:实验于2006-04/09在湖南中医药大学国家重点二级实验室病理生理实验室完成.取湖南中医药大学第一附属医院门诊人流手术室正常妊娠40 d健康孕妇人流组织,患者知情同意.体外常规进行蜕膜细胞培养,选取经鉴定的4、5代细胞蜕膜细胞,用不同浓度(0.5,2.0,10.0,50.0μg/L,共设4组,并设空白对照组)的肿瘤坏死因子α作用于蜕膜细胞,四甲基偶氮唑盐比色实验分析肿瘤坏死因子α对蜕膜细胞活力的影响,荧光细胞染色观察确定蜕膜细胞凋亡模型的建立.选取适宜浓度的黄芩苷作用于正常蜕膜细胞及肿瘤坏死因子α诱导的凋亡蜕膜细胞(设肿瘤坏死因子α模型组,黄芩苷组,肿瘤坏死因子α加黄芩苷组,并设空白对照组),培养24 h后,四甲基偶氮唑盐比色实验分析黄芩苷对蜕膜细胞活力的影响,流式细胞术检测细胞凋亡率.结果:实验成功获取足够量的细胞,经泌乳素免疫组化鉴定为较高纯度的蜕膜细胞.①肿瘤坏死因子α作用后的蜕膜细胞活性均低于空白对照组,并且随着肿瘤坏死因子α浓度越大,活力越小.10.0,50.0μg/L肿瘤坏死因子α作用后蜕膜细胞活性与空白对照组比较,差异有显著性意义[(0.196±0.040),(0.106±0.020),(0.317±0.020),P＜0.05].但50.0μg/L时经形态学观察有部分细胞漂浮、死亡.②肿瘤坏死因子α模型组蜕膜细胞活性低于黄芩苷组和肿瘤坏死因子α加黄芩苷组,差异具有显著性意义[(0.27±0.03),(0.49±0.01),(0.38±0.02),P＜0.05].③流式细胞术示空白对照组蜕膜细胞凋亡率低于其他各组,差异均有显著性意义[(1.48±0.45)%,(16.40±0.82)%,(9.78±0.26)%,(10.96±0.92)%,P＜0.05].在荧光显微镜下,肿瘤坏死因子α作用后凋亡的蜕膜细胞细胞核变小皱缩,可见致密强荧光.结论:肿瘤坏死因子α能明显抑制人蜕膜细胞增殖分裂的过程,诱导该细胞凋亡,可用于人蜕膜细胞凋亡模型的建立.而黄芩苷对肿瘤坏死因子α诱导的蜕膜细胞凋亡具有一定对抗抑制作用.
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整合素αv、α4在小鼠胚泡植入中的作用
目的:探讨整合素αv、α4在小鼠胚泡植入中的作用.方法:在体外培养的人蜕膜细胞中分别加入整合素αv、α4抗体,与小鼠胚泡共培养,观察整合素αv、α4抗体对小鼠胚泡在体外培养的人蜕膜细胞上的粘附和铺展的影响.结果:整合素αv抗体组,胚泡的粘附受到暂时抑制,48 h时大部分胚泡才粘附并开始铺展;整合素α4抗体组,胚泡的粘附率不受影响,但铺展率及滋养层细胞的扩展面积以剂量依赖的方式受到抑制.结论:整合素αv、α4能够调节胚泡在人蜕膜细胞上的植入,其中整合素αv可能与胚泡的粘附有关,而整合素α4可能与胚泡侵入和滋养层细胞的进一步生长相关.
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人类早孕蜕膜对B淋巴细胞IgG分泌作用的影响
目的 研究在外源性细胞因子的作用下,蜕膜细胞对B细胞IgG分泌的影响,以探讨蜕膜局部免疫微环境的免疫学特点.方法 在培养的蜕膜细胞中加入细胞因子-γ干扰素(Interferonγ,IFN-γ)、白细胞介素-2(Interleukine-1,IL-2)、白细胞介素-6(Interleukine-6,IL-6)和表皮生长因子(Epidermal Growth Factor,EGF),用放射免疫法测定每分钟的脉冲指数(count per minute,cpm)来计算B淋巴细胞分泌的免疫球蛋白G(Immunoglobulin G,IgG)的值.结果 正常早孕蜕膜细胞的培养上清液可以刺激B淋巴细胞IgG的分泌;经外源性细胞因子作用后的蜕膜细胞培养上清液,B淋巴细胞分泌的IgG显著上升(P＜0.05),尤其是第12 h实验组的cpm上升有显著效应(P＜0.05),24、48 h的实验组cpm有逐渐下降趋势.结论 在外源性细胞因子的作用下,蜕膜局部体液免疫反应增强,但这种增强可能是蜕膜局部免疫的自身调节作用,以维护妊娠的正常进行.
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IL-1β或TNF-α干预的子宫蜕膜细胞对母胎界面Th1/Th2及Th17/Treg平衡的影响
目的:探讨IL-1β或TNF-α干预的子宫蜕膜细胞对母胎界面Th1/Th2及Th17/Treg平衡的影响.方法:子宫蜕膜细胞经体外分离后,加入10-8 mol/L雌二醇(E2)+10-7 mol/L孕激素(P)培养7d后,分别给予IL-1β或TNF-α干预24 h,收集上清液,制备条件培养液.应用条件培养液刺激子宫蜕膜T细胞72 h后,收集上清液,ELISA法检测上清液IFN-γ,IL-2,IL-17,IL-5,IL-10及TGF-1β的表达.收集子宫蜕膜T细胞,提取RNA,用实时定量PCR检测细胞因子mRNA的表达.通过T细胞分泌的细胞因子水平来评估子宫蜕膜细胞对Th1/Th2及Th17/Treg平衡的影响.结果:IL-1β或TNF-α干预子宫蜕膜细胞24 h后,其条件培养液能够促使子宫蜕膜T细胞Th1细胞因子IFN-γ分泌增加7～8倍,IL-2分泌增加6～7倍,Th17细胞因子IL-17分泌增加15～19倍,Th2细胞因子IL-10和IL-5的分泌无差异,Treg细胞因子TGF-1β的分泌无差异;其条件培养液促使IFN-γ和IL-17 mRN表达增加,而IL-10及TGF-1β mRNA的表达无差异.结论:IL-1β或TNF-α刺激的子宫蜕膜细胞改变母胎界面Th1/h2及Th17/Treg细胞的平衡,向Tn1及Th17偏移.
关键词： 蜕膜细胞 Th1/Th2平衡 Th17/Treg平衡 细胞因子 流产 -
HSP70在早期妊娠大鼠子宫中的表达及己烯雌酚的诱导作用
目的探讨在早期妊娠大鼠子宫中热休克蛋白70(hear shock protelns,HSP70)的表达变化以及己烯雌酚(dithylstilbestrol,DES)对子宫HSP70表达的诱导作用.方法采用免疫组织化学和图像分析技术研究正常大鼠未孕及已孕的子宫.结果①孕鼠子宫HSP70的阳性表达较未孕鼠明显增强,差异有显著性(P＜0.01);②小剂量(1.25μg/50 g)大剂量(5μg/50 g)DES均可诱导大鼠子宫HSP70免疫反应阳性细胞数量显著增加(P＜0.01).结论热休克蛋白70在早期妊娠大鼠子宫内膜固有层的基质细胞及蜕膜内蜕膜细胞的表达明显增高,DES对子宫HSP70.表达具有明显诱导作用.
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Luminex液相芯片技术测定人早孕滋养层细胞及蜕膜细胞中基质金属蛋白酶的表达
目的 研究人正常早孕滋养层细胞与蜕膜细胞中基质金属蛋白酶(MMPs)的表达特点,探讨子宫内膜蜕膜化进程中MMPs的变化及对胚胎着床的影响.方法 收集正常妇女分泌期子宫内膜及人正常早孕绒毛和相应蜕膜标本各5例,分别进行离体培养,鉴定其纯度在98%以上后,收集培养上清液,利用Luminex(LumAvidin Beads)测定培养上清液中MMPs(MMP-1、MMP-2、MMP-3、MMP-7、MMP-8、MMP-9、MMP-12、MMP-13)蛋白表达的变化,分析MMPs在不同培养条件下的表达差异及表达之间的相关性.结果 ①在不同培养条件下,MMP-1、MMP-2、MMP-3、MMP-7、MMP-8、MMP-9均有表达,MMP-12及MMP-13分别在ESC及DSC中无表达,且MMP-8、MMP-12、MMP-13表达均低.②与子宫内膜细胞相比,MMP-1、MMP-3、MMP-7在DSC,EVCT中表达均降低,降低有显著性差异(P＜0.05),而MMP-2、MMP-8、MMP-9在DSC,EVCT中则显著升高,升高有显著性差异(P＜0.05).且在蜕膜细胞中,MMP-1、MMP-3、MMP-2、MMP-7高表达尤为显著.③与蜕膜细胞相比,MMP-1、MMP-3、MMP-7在EVCT中表达显著降低(P＜0.05).MMP-2、MMP-9、MMP-13在EVCT中升高有显著性(P＜0.05).且在滋养层细胞中,MMP-2、-9高表达尤为显著.④MMPs之间的相关性:MMP-2与MMP-9相关关系显著(P＜0.05),且关系较密切(r=0.6645).MMP-1,MMP-3,MMP-7两两间相关关系显著(P＜0.05),且关系密切(r＞0.7340).其他MMP之间相关关系不显著.结论 首次利用Luminex xMAP方法多通量的检测到子宫内膜间质细胞、早孕蜕膜细胞与滋养层细胞的多种MMPs的表达,它们均可分泌多种MMP,但是不同种类组织细胞的表达量不同;MMPs可能通过调控子宫内膜蜕膜化及母胎界面间MMPs的变化而影响胚胎着床,为成功妊娠创造条件.
关键词： 绒毛外细胞滋养层细胞 蜕膜细胞 子宫内膜 基质金属蛋白酶 液相蛋白芯片 -
菟丝子含药血清干预TNF-α诱导人蜕膜细胞异常凋亡后基因表达谱的变化
目的:观察菟丝子含药血清干预肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导建立人蜕膜细胞异常凋亡模型后基因表达谱的变化,以期从基因表达谱的变化探讨菟丝子安胎的分子机理.方法:体外常规进行人蜕膜细胞的培养,选用适宜浓度的TNF-α诱导建立人蜕膜细胞异常凋亡模型,用菟丝子含药血清干预,采用一步法抽提RNA,用人全基因组17KcDNA基因芯片来分析菟丝子作用后的基因表达谱变化情况,分析基因的变化趋势.结果:菟丝子含药血清作用于TNF-α诱导的异常凋亡的蜕膜细胞后共检出基因10 230条,其中共检出表达差异基因128条,上调基因76条,下调基因52条;这些表达差异基因有细胞因子及受体、转录相关基因、凋亡相关基因、生长分化相关基因、信号转导相关基因、细胞周期相关基因、电子传递和氧化相关基因、转移酶相关基因、核酸酶相关基因等.结论:菟丝子可能通过以上基因的表达,调控蜕膜细胞的生长周期及异常凋亡,在免疫调节等方面发挥有一定的安胎作用.
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胎盘组织中3种细胞金属硫蛋白表达的免疫组化研究
目的 探讨胎盘组织中蜕膜细胞、合体滋养层细胞及 Hofbauer细胞金属硫蛋白(metallothionein,MT)表达的意义及其相关性.方法 采用免疫组织化学法检测178例足月胎盘组织中MT的表达情况.结果 胎盘组织蜕膜细胞、合体滋养层细胞及Hofbauer细胞MT表达的阳性率分别为49.69%(80/161)、53.37%(95/178)、33.15%(59/178);胎盘组织3种类型细胞MT的表达强度有等级相关性(P＜0.000 1);胎盘组织3种类型细胞之间MT的表达差异有统计学意义(P＜0.0001).结论 胎盘组织蜕膜细胞、合体滋养层细胞及Hofbauer细胞可有MT的表达,提示MT在胎盘的屏障作用及物质转运中可能起着很重要的作用.
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孕激素对脂多糖诱导的蜕膜基质细胞的影响
目的 探讨孕激素对细菌脂多糖诱导的蜕膜细胞活性的影响.方法 获取正常早期妊娠妇女的蜕膜组织,经细菌脂多糖刺激体外培养孕激素作用后,用四氮唑盐比色法测定蜕膜细胞增殖抑制情况.结果 不同浓度的细菌脂多糖均抑制了蜕膜基质细胞的生长,孕激素明显抑制了细菌脂多糖对蜕膜基质细胞生长的影响,以孕激素浓度为0.05μg/mL时蜕膜基质细胞增殖高(F=5.389,P<0.05).结论 细菌脂多糖抑制早孕蜕膜细胞的生长,孕激素明显抑制了细菌脂多糖对蜕膜基质细胞生长的影响,提示孕激素参与到反对细胞内毒素的保护机制.
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米非司酮对早孕绒毛、蜕膜的影响
胚胎d13-21绒毛逐渐形成,经初级绒毛、二级绒毛发展转变为三级绒毛.在妊娠d 5中绒毛内血管形成,胎儿循环开始.孕卵着床后,子宫内膜致密层蜕膜样细胞继续增大,逐渐变成蜕膜细胞[1].
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早孕6～8周药物流产的临床观察
在早孕米非司酮配伍米索前列醇(米索)药物流产中,孕囊平均直径是影响完全流产率的一个重要因素.我们发现孕囊平均直径与完全流产率呈负相关[1],上海15个单位多中心临床试验也发现孕囊直径＜15mm组的完全流产率显著高于≥15 mm组[2].为了提高早孕药流中孕囊＞15 mm者的完全流产率,我们设想在米非司酮配伍米索前列醇的基础上,再加辅助药物,以加强对滋养叶细胞或蜕膜细胞的杀伤作用.本文选用紫草和达那唑,比较它们的临床疗效,以选出较好的辅助药物及合理的给药剂量.
