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  • 2010—2016年广东省手足口病非EV71非CVA16肠道病毒病原谱分析

    作者:曾汉日;郑焕英;刘冷;陈晓丽;李彩霞;方苓;吴诗微;李晖;柯昌文

    目的 了解广东省手足口病非肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)非柯萨奇病毒A16型(coxsackievirus A16,CVA16)其他肠道病毒(以下简称其他EV)的病原谱构成.方法 通过广东省手足口病实验室监测网络,收集2010—2016年核酸检测结果为其他EV阳性的手足口病病例标本,共3701份,采用荧光定量PCR方法检测CVA6、CVA10,二者均为阴性的标本则通过巢式PCR扩增肠道病毒部分VP1序列,通过对测序获得的部分VP1序列进行比对,完成肠道病毒型别的鉴定.结果 3701例其他EV阳性病例中,肠道病毒A、B、C和D组均有检出,主要为A组,占92.68%.另外,CVA6的构成比高,为74.71%,其次为CVA10,占11.27%.2010—2016年每年比例高的其他EV均为CVA6,构成比依次为44.02%、71.09%、71.27%、76.63%、59.00%、87.01%和63.17%.196例其他EV阳性重症病例中,CVA6占59.18%,CVA10占14.29%.另还检出19种包括其他CVA、CVB、埃可病毒和PV等肠道病毒.5例其他EV阳性死亡病例中,检出了CVA2、CVA4、CVA8、CVA14和E3各1例.结论 2010—2016年广东省手足口病其他EV病原谱较广,但每年的优势血清型均为CVA6,其次为CVA10.

  • 两种病毒所致重症手足口病的临床特征比较分析

    作者:关君艳;詹飞;李俊华

    目的 比较分析柯萨奇病毒A组6型(coxsackie virus A6,Cox A6)与肠道病毒71型(human enterovirus 71,EV71)所致重症手足口病的临床特征.方法 收集2015-2017年,在襄阳市中心医院住院治疗的确诊为Cox A6型(29例)和EV71型病毒(44例)感染的重症手足口病患儿的临床及实验室相关指标,比较两组患儿间各指标的差异,并对病毒进行VP1区序列扩增及分型,构建遗传进化树.结果 Cox A6型病毒组年龄为(1.46±0.59)岁,低于EV71型病毒组[(2.50±1.26)岁](P<0.01);发热时间>3d的比例也低于EV71型病毒组(P<0.01);Cox A6型病毒组皮疹分布广泛,皮疹形态多样,疱疹及后期脱甲发生率高(P值均小于0.05),EV71型病毒组呕吐、肢体抖动、血压升高、呼吸心率增快的发生率高(P值均小于0.05).遗传进化显示,Cox A6型病毒株与日本、西班牙等地的代表株同源性较强,EV71型病毒株与我国山东、内蒙古自治区等地的代表株同源性强.结论 Cox A6感染所致的重症手足口病相较EV71有其相对特异的临床特征,临床医生可据此初步区分并积极对因治疗.

  • 2013-2017年北京市急性弛缓性麻痹病例肠道病毒监测情况

    作者:李娟;赵丽;张朱佳子;潘静彬;张和润;龚成;罗明;李爱华;李茂中;吴疆

    目的 分析2013-2017年北京市报告的15岁以下儿童急性弛缓性麻痹(acute fluaccid paralysis,AFP)病例的肠道病毒监测情况.方法 通过AFP监测信息报告管理系统,选取北京市2013-2017年报告的AFP监测病例的基本信息、疫苗免疫史、标本采集和检测情况、病例随访情况以及病例分类诊断结果等进行分析.采用x2检验或Fisher's精确概率检验不同特征的AFP病例间不同种类肠道病毒检出率的差异.结果 2013-2017年,北京市共报告AFP病例960例,其中74例检出了肠道病毒,本地和异地的检出率分别为4.0%(7/176)和8.9%(67/756),差异有统计学意义(x2=4.66,P=0.031).本地和异地病例的脊髓灰质炎(简称“脊灰”)病毒检出率分别为3.4%(6/176)和3.0%(23/756)(x2=3.48,P=0.062),检出的脊灰病毒均为脊灰疫苗株,病例麻痹前均口服过脊灰减毒活疫苗,分类诊断为脊灰野病毒排除病例,6例病例诊断为疫苗相关麻痹型脊髓灰质炎(vaccine associated paralytic poliomyelitis,VAPP).本地和异地病例的非脊灰肠道病毒检出率分别为0.6% (1/176)和5.8%(44/756)(x2=1.64,P=0.201),分类诊断结果均为脊灰野病毒排除病例.44例异地非脊髓灰质炎病毒检出者中79.6%的麻痹发生在5至9月.结论 北京市报告本地AFP病例肠道病毒分离率低于异地AFP病例,根据脊灰病毒和非脊灰肠道病毒检出结果,AFP分类诊断均为脊灰野病毒排除病例,异地AFP病例中非脊髓灰质炎病毒呈现夏秋季流行.

  • 走班制学校一起手足口病暴发疫情流行病学调查分析

    作者:华伟玉;邢彦;陈春枝;史凤琳

    目的 分析北京市海淀区一起手足口病暴发疫情的流行特征及流行因素.方法 采用描述流行病学方法,分析该次暴发疫情中手足口病例的人群、时间和空间分布情况,同时对病例咽拭子标本进行肠道病毒核酸检测.结果 疫情发生时间为2017年11月2日至12月3日,共发病34例,罹患率为0.72%(34/4 692).其中,男学生罹患率为1.22%(27/2 215),高于女学生[0.31% (6/1 917)](x2=10.65,P=0.001);艺术楼发病率为4.23%(11/260),高于初中楼[1.55%(18/1 160)](x2=7.62,P=0.006);走班制学生发病率为0.74%(31/4 162),高于非走班制学生[0.10% (2/2 008)](x2=10.60,P=0.001);参加游学学生发病率为1.98%(28/1 416),高于未参加者[0.18%(5/2 716)](x2=37.78,P<0.01).对采集的8份病例标本进行肠道病毒核酸检测,结果显示,3份为柯萨奇病毒A6型阳性,1份为肠道病毒通用阳性.结论 此疫情是由柯萨奇病毒A6型引起的手足口病暴发疫情,提示走班制教学和游学均可能增加手足口病暴发疫情的风险.

  • 2013-2017年沈阳市手足口病病原谱特征及流行病学分析

    作者:王冰;张春青;王萍;白丽娜;李天宝;安向东;陈叶;陈会杰

    目的 分析2013-2017年沈阳市手足口病肠道病毒病原谱特征与流行病学特点.方法 收集2013-2017年沈阳市手足口病标本,应用荧光定量PCR方法对EV71型、Cox A16型、Cox A6型和Cox A10型肠道病毒进行检测,然后对肠道病毒阳性的其他标本应用传统RT-PCR方法针对VP1全长基因进行扩增,比对分析确认型别,并对Cox A6的VP1全基因序列进行系统进化分析.结果 沈阳地区2013-2017年间共收集2 881份标本,肠道病毒检测阳性率为71.71% (2 066/2 881),各年间阳性率差异有统计学意义(x2=50.62,P<0.01).共检测出EV71、Cox A6、Cox A16、Cox A10、Cox A4、Cox A2、Cox A12、Cox A5、Cox B2、Cox A8、Cox A9、Cox B3、E9、E16和脊髓灰质炎病毒3型等15种型别的肠道病毒.进化分析表明,沈阳地区CoxA6型毒株主要位于D3a分支上.结论 沈阳地区手足口病主要由EV71型、Cox A6型和Cox A16型3种肠道病毒共同流行引起,Cox A6型肠道病毒已经成为沈阳市仅次于EV71型的第二位病原.

  • 2014年上海地区肠道病毒71型全长基因序列和毒力基因位点分析

    作者:张晓玲;俞慧菊;宋志刚;王蔚

    目的 分析2014年上海地区手足口病患者中肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)的全长基因组序列,了解上海地区EV71流行株的序列特征,推测与致病力相关的毒力基因位点.方法 收集上海交通大学附属新华医院2014年1月至12月临床诊断为手足口病的436例患者的临床资料和咽拭子标本.采用实时荧光PCR方法检测通用肠道病毒和EV71型,选取部分核酸阳性标本进行全基因片段扩增和测序,构建全长和3'非编码区(untranslated region,UTR)基因序列进化树,并与EV71的BrCr原型株、柯萨奇病毒A组4型(coxsackievirus A4,CA4)、CA14、CA16原型株和其他肠道病毒A组原型株进行各编码区核苷酸同源性比较.另外,结合GenBank数据库中代表株,比较轻症、重症和死亡组的氨基端序列,寻找差异位点.结果 436例手足口病患者中,EV71核酸检测阳性123例(28.21%).对13个EV71检测阳性标本病毒的全长基因序列和3'UTR序列进行系统进化树分析,发现2014年上海地区EV71流行株为C4a亚型,3'UTR序列与CA4、CA14和CA16原型株序列相近.结合GenBank数据库中代表株,比较EV71轻症、重症和死亡患者的氨基端序列,发现159个蛋白氨基酸序列差异位点,其中Q230L(VP2)、I1054V(2B)、V1508I(3A)、V1662I(3C)等4个位点差异有统计学意义(x2值分别为8.82、6.09、6.09、6.09,P值分别为0.012、0.048、0.048、0.048). 结论 2014年上海地区的EV71 C4a亚型流行株3'UTR区与CA4、CA14和CA16型存在重组,位于VP2结构区的230位可能是与致病力相关的毒力基因位点.

  • 2017年深圳市龙华区手足口病病原学特征分析

    作者:王金明;许少坚;姚相杰;任燕;陈龙;全德甫;郝夏琼;叶春立;赖晓玲;满云翔;林启辉

    目的 分析2017年深圳市龙华区手足口病(hand,foot,and mouth disease,HFMD)病原学特点.方法 采用实时荧光PCR方法对哨点医院送检的242份HFMD临床诊断病例的肛拭子样品进行肠道病毒(enteroviurs,EV)、肠道病毒A组71型(EV71)和柯萨奇病毒A组16型(coxsackievirus A16,CV A16)核酸检测,并对非EV71非CV A16的其他肠道病毒和EV71的VP1区序列进行测定,亚型鉴定和系统进化分析.结果 实验室确诊病例有190例,阳性率为78.51%(190/242),其中,EV71感染32例(16.84%,32/190)、CV A16感染11例(5.79%,11/190)、CV A6感染126例(66.32%,126/190).实验室确诊病例中,男性占57.9% (110/190),女性占42.1%(80/190);3岁以下儿童占78.95%(50/190).系统进化树分析结果显示,2017年深圳市龙华区流行的EV71属于C4a进化分支,CV A6属于D3进化分支,CV A10属于C进化分支.结论 深圳市龙华区应进一步加强辖区HFMD监测,重点关注3岁以下儿童及病原谱构成和重要病原体进化情况.

  • 微量高通量细胞培养法在脑炎病毒分离中的应用

    作者:沈琮;李志会;李鹏;岳盈盈;孟红

    目的 建立用微量高通量、多细胞谱培养法分离未明原因脑炎患儿中病毒的方法,探讨脑炎患儿中肠道病毒的感染情况.为大量、及时分离病毒、病毒鉴定和分子流行病学研究奠定基础.方法 将8株不同的细胞接种于96孔细胞培养板中,每种细胞接种一行,细胞长成单层后孔内接种脑脊液标本,每孔5-10μl,每份标本纵向接种8孔(8种细胞系),35℃、5%CO2培养.出现细胞病变(cytopathic effect,CPE)者传代培养两次.两次均出现CPE者视为细胞培养阳性,-70℃保存用于病毒鉴定.将培养物首先用肠道病毒通用引物做逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)并测序,进行初步筛查.结果 93份标本中有56份出现明显的CPE,病毒分离率为60.22%(56/93),其中在MA104细胞出现病变者40份,阳性率为43.01%.其中6份培养物的RNA用肠道病毒通用引物得到了扩增,序列测定确定为肠道病毒.结论 微量多细胞培养法具有简便、快速等特点,适合用于病毒的初步筛查.

  • 2008-2011年辽宁省锦州市手足口病病原监测结果分析

    作者:范凯;张旭;宋颖;莫晓艳;张新岩

    目的 了解辽宁省锦州地区手足口病的病原学特征及变化趋势,为手足口病防治工作提供参考依据.方法 日常监测工作中收集2008-2011年锦州地区294例手足口病临床确诊患儿的330份样本检测结果,其中咽拭子274份,粪便标本56份,进行病原学检测.结果 294例被检测患儿中246例为肠道病毒阳性,阳性率为83.67%,其中肠道病毒71型(EV71)阳性率30.61%,柯萨奇A组16型(Cox A16)阳性率32.31%,EV71、Cox A16混合感染阳性率0.34%,其他肠道病毒阳性率20.41%.330份标本中咽拭子阳性率82.12%(225/274),粪便阳性率71.43%(40/56).2008-2011年病例的咽拭及粪便标本采用不同检测方法、不同试剂的阳性检出率差异无统计学意义(P>0.05).结论 锦州市儿童手足口病病原体以EV71和Cox A16为主,每年略有不同,近年其他肠道病毒感染率逐年增高.手足口病患者的咽拭和粪便标本的阳性检出率无差异.

  • 2011年平顶山市手足口病实验室检测结果分析

    作者:王轶;李军伟;孙南叶

    目的:对平顶山市2011年手足口病实验室检查结果进行分析,了解2011年平顶山市手足口病病原学特征,为实验室诊断手足口病提供参考。方法采集2011年平顶山市各地送检的499例手足口病患者的粪便、肛拭子、咽拭子、疱疹液和脑脊液等标本507份,应用RT-PCR技术检测样本中的肠道病毒、肠道病毒71型( EV71)、柯萨奇病毒A组16型( CA16)。结果499例手足口病患者的507份各类样本中,检测到肠道病毒(PE)阳性84份,EV71病毒特异性基因片段阳性167份, CA16特异性基因片段阳性125份。499例手足口病病例中,阳性376例,阳性率75.35%;其中EV71阳性167例,占阳性人数44.41%,CA16阳性共125例,占阳性人数33.24%, EV71的检出率较CA16高。已检验499例中,重症患者133例,阳性109例,阳性率81.95%;其中EV71共91例,占阳性人数83.49%,CA16共9例,占阳性人数8.26%。结论 EV71是2011年平顶山市手足口病的优势病原体;同时EV71是引起手足口病重症病例的主要毒株类型。

  • 2013—2014年上海市污水中人类肠道病毒的基因型分布

    作者:李云逸;陆菁;王秀芝;杨玉颖;费洁;张莉萍;李智;李崇山;左勇

    目的 分析上海市闵行和嘉定区污水处理厂中人类肠道病毒(HEV)的时间分布特点及其基因分型.方法 于2013—2014年,选取闵行和嘉定区两所污水处理厂入水口作为采样点,每月24—28日采集污水标本1份,每份1 L,共48份.经阴离子膜吸附的方法浓缩,再用牛肉汤洗脱,取上清液并接种RD、HEp-2和L20B细胞进行病毒分离,共分离HEV 249株,其中非脊髓灰质炎病毒(NPEV)185株,脊髓灰质炎病毒(PV)64株(均为疫苗相关株).通过RT-PCR鉴定基因型,采用Bioedit 7.0.0对VP1核苷酸序列进行序列同源性分析,使用MEGA 5.0软件,通过邻位法构建系统发生树,分析优势株及病毒传播链.结果 185株NPEV中178株鉴定出基因型,包括:柯萨奇B组病毒(CVB)2、3、5基因型,埃可病毒(ECHO)1、3、6、7、11、13、19、20、24、25、30基因型,柯萨奇A组病毒(CVA)4基因型.CVB5和ECHO6是在NPEV分离株中比例较高的两个基因型,分别占33.5%(56株)和24.9%(43株).闵行区污水水样中HEV分离株主要集中在4—9月份,其中优势株ECHO6主要分布在2013下半年和2014上半年采集水样中,优势株CVB5主要在2013—2014年散在分布.嘉定的ECHO6和CVB5两个优势株的流行趋势与闵行区的基本一致.2013—2014年CVB5形成C6和C8基因亚型2个传播链,而与国外毒株有较大的差异;ECHO6形成C3、C6和D9基因亚型3个传播链,而D9基因亚型在上海属于优势基因亚型,在国内外有一定地域性的传播.结论 2013—2014年上海市污水中的分离到的PV均为疫苗株.HEV优势株为CVB5和ECHO6,其中ECHO6在2013下半年和2014上半年较为流行,CVB5在2014年下半年开始流行.CVB5和ECHO6存在多条传播链的共同流行现象.

  • 2011年厦门市某医院十例无菌性脑炎暴发病例病原学分析

    作者:何水珍;徐雪荣;黄建炜;苏成豪;黄仕杰;温慧欣;颜玉炳;牛建军

    目的 对2011年5月11-17日厦门某医院收治的10例无菌性脑炎患者进行病原学鉴定.方法 采集10例患者的咽拭子、肛拭子及部分患者的脑脊液,进行总肠道病毒核酸检测.总肠道病毒核酸阳性的样本,分别用肠道病毒A、B、C基因型各自的VP1通用引物扩增,VP1区扩增阳性的标本测序后进行序列分析.同时,用Vero细胞进行病毒分离培养,对培养成功的病毒与原始临床标本进行VP1序列同源性分析,从而对引发本次脑炎的病原进行鉴定.结果 10例脑炎患者中,有7例患者的临床标本总肠道病毒核酸检测阳性.这7例患者的咽拭子和(或)肛拭子标本肠道病毒B基因型VP1通用引物扩增阳性,测序后分析表明均为肠道病毒B基因型埃可病毒30(Echo 30),且与浙江2004年流行毒株的同源性达95.3%~97.1%.其中编号为XM2、XM3、XM4、XM8的咽拭子和XM3、XM6的肛拭子相互间序列同源性为99.4%~100.0%,但与XM1的咽拭子序列存在差异,同源性为92.8%~93.4%.此外,XM1、XM2、XM3、XM4、XM8咽拭子标本Vero细胞分离培养病毒成功,其VP1区部分序列与相应的原始标本同源性大于99.9%.结论 导致这次无菌性脑炎的病原体为肠道病毒B基因型Echo 30,并提示可能存在多种不同遗传背景的Echo 30在流行.

  • 2011-2015年广东省基于主动监测的肠道病毒71型感染手足口病流行特征

    作者:谢东生;何剑峰;杨芬;李晖;康敏;张萌;叶新;谭小华;倪锡河;胡乐;孙立梅

    目的 了解广东省2011-2015年肠道病毒71型(EV-A71)感染手足口病流行特征.方法 通过"广东省急性传染病监测信息平台系统"收集2011年1月至2015年12月广东省8个哨点医院上报的感染EV-A71的手足口病普通病例监测数据,包括病例的年龄、发病日期和病原学数据等.通过"中国疾病预防控制信息系统"收集手足口病报告病例数及实验室确诊病例数资料,包括手足口病普通病例疫情数据、重症和死亡病例疫情数据,以及病例的年龄、发病日期和病原学数据等.结合两种来源的数据估算感染EV-A71手足口病发病率,描述其分布特征;采用χ2检验分别比较不同年龄组和不同月份间EV-A71感染手足口病阳性率及估算发病率的差异.结果 2011-2015年8个哨点医院共报告感染EV-A71的普通病例1 855例,其中,2014年高(31.6%,605/1 916),2015年低(6.8%,134/1 971)(χ2=521.85,P<0.001).而通过疾病监测系统报告的2011-2015年广东省手足口病普通病例为1 772 516例,感染EV-A71的重症及死亡病例为1 902例;2011-2015年广东省手足口病重症及死亡病例中,感染EV-A71的构成比分别达72.6%(1 775/2 444)和97.0%(127/131).各年龄组EV-A71感染手足口病年均估算发病率随年龄升高呈下降趋势(趋势χ2=990 273.20,P<0.001),1岁组高,为1 697.67/10万,4岁组低,为705.46/10万.各月份EV-A71感染手足口病年均估算发病率的差异有统计学意义(χ2=401.23,P<0.001),5月份高,为15.51/10万,7月份低,为9.42/10万.结论广东省EV-A71感染手足口病在各年度流行水平不同,手足口病重症及死亡病例以EV-A71感染为主,1岁儿童是EV-A71感染手足口病高危人群,5月为EV-A71感染手足口病的高峰时间.

  • 2011—2012年河南省274例病毒性脑炎患者人类肠道病毒的感染情况及临床特征

    作者:马红霞;潘静静;李懿;康锴;黄学勇;尤爱国;许汴利

    目的 分析河南省部分病毒性脑炎患者人类肠道病毒(HEV)的感染情况及其临床特征.方法 选取2011年4月至2012年8月在河南省平顶山市3所医院内儿科和神经内科被诊断为病毒性脑炎的患者为研究对象,同时排除细菌感染者,共274例.采用自行设计的调查问卷收集患者的基本信息,医疗机构检查结果主要来源于医院患者资料.采集研究对象的脑脊液标本,使用磁珠法自动核酸提取仪进行病毒RNA提取,采用实时荧光RT-PCR试剂进行HEV核酸检测,采用分型试剂进行肠道病毒A71型(EV-A71)、柯萨奇病毒A16型(CV-A16)的核酸检测.采用χ2检验比较不同年龄研究对象感染HEV差异.结果 274例病毒性脑炎患者中,男性为180例(65.7%),女性为94例(34.3%);年龄中位数为2.17岁,主要集中在3岁以下(61.3%,168例).HEV总感染率为39.1%(107例),CV-A16感染率为0.7%(2例),EV-A71感染率为15.3%(42例).≤6月龄患者共11例,其中HEV感染者为1例,属EV-A71型别;<3、3~5、6~15、>15岁患者HEV总感染率分别为32%(53/168)、53%(18/34)、53%(35/66)、1/6(χ2=13.10,P=0.003);EV-A71感染率分别为18%(30/168)、24%(8/34)、6%(4/66)、0(χ2=8.04,P=0.045);其他HEV(OEV)感染率分为13%(21/168)、29%(10/34)、49%(32/66)、1/6(χ2=35.19,P<0.001).OEV和EV-A71感染者呕吐比例分别为73%(44/60)和26%(11/42),其出现皮疹比例分别为32%(19/60)和79%(33/42).HEV感染者发热比例为95%(99/104),其出现呼吸节律改变症状的比例[19%(20/104)]低于未感染者[36.8%(60/163)](χ2=9.35,P=0.002).结论河南省平顶山地区病毒性脑炎患者中HEV感染率较高,尤其是3~15岁患者.HEV感染者发热比例较高,为普遍临床表现;OEV感染者较容易出现呕吐症状,EV-A71感染者较容易出现皮疹.

  • 手足口病患者愈后粪便中肠道病毒核酸检出状况分析

    作者:何义林;张翔;查杰;戴文军;罗锋;申涛

    目的 探索手足口病患者愈后粪便标本中肠道病毒(EV)核酸阳性率的持续时间.方法 对49例手足口病实验室确诊病例进行连续6周的随访,每周采集1次患者的粪便标本5~8 g,用RT-PCR法检测手足口病常见病毒的核酸,用Kaplan-Meier生存分析法分析随访期内EV核酸检出情况.结果 49例患者中包括16例肠道病毒71( EV71)型、15例柯萨奇病毒A16(CoxA16)型和18例EV型.对患者进行病后6周的随访.EV71型患者在第1周和第5周各有1例失访,CoxA16型患者在第4周有1例失访,EV型患者在第1周有2例失访.在随访的第1~6周,EV71型患者病毒核酸阳性率分别为81.3%、60.9%、47.4%、33.9%、27.1%、18.1%,CoxA16型患者分别为93.3%、73.3%、53.3%、33.3%、16.7%、8.3%;随访的第1~2周,EV型患者病毒核酸阳性率分别为44.4%和7.4%,第3~6周均为0.3组患者在随访期内病毒核酸阳性率分布差异有统计学意义(x2=11.78,P=O.001).随时间的延长,各组患者病毒核酸阳性率均呈下降趋势.结论 手足口病患者愈后粪便中病毒核酸阳性率持续较长的时间,EV71型和CoxA16型患者可长达6周.

  • 北京市一例重症肺炎儿童的呼吸道中检出肠道病毒D68

    作者:张铁钢;罗明;李爱华;陈萌;龚成;于霞丽;吴疆;黄芳

    肠道病毒(enterovirus,EV)属于小RNA病毒科肠道病毒属,可分为脊髓灰质炎病毒(poliovirus)、埃柯病毒(echovirus)、柯萨奇病毒(coxsackievirus,CV)和新型肠道病毒(new enterovirus).基于肠道病毒VP1序列,又可分为EV-A、EV-B、EV-C和EV-D共4组[1].目前,世界公认肠道病毒有70多个血清型[2-4]和100多个基因型[5-6].近年来,肠道病毒流行在亚太地区呈上升趋势[7].2014年9月12日,美国CDC报道密苏里州和伊利诺伊州出现一种由罕见的肠道病毒D68(EV-D68)而引起的严重呼吸系统疾病[8],已在美国多地蔓延,造成1 101例感染,并已有8例死亡.

  • 儿童肠道病毒71型和柯萨奇病毒A16型感染血清流行病学研究进展

    作者:罗莉;邢薇佳;廖巧红;余宏杰

    手足口病由肠道病毒感染引起,以肠道病毒71型(EV-A71)和柯萨奇病毒A16型(CV-A16)为常见,患者和隐性感染者均为传染源.通过血清学调查,可以掌握人群中EV-A71和CV-A16抗体水平,以及不同年龄段人群的易感性和免疫水平动态变化.通过对EV-A71和CV-A16血清流行病学科研文献进行检索和回顾性研究,系统分析了不同年龄人群中的EV-A71和CV-A16抗体水平,探讨人群易感性、免疫水平动态变化及人群感染状况.研究发现新生儿EV-A71和CV-A16中和抗体水平与母亲密切相关,接近成年人水平;随着母传抗体的自然衰减,在1年之内会迅速下降至低水平;1~4岁时迅速升高,5岁之后将达到一个稳定水平.接种疫苗是预防手足口病感染的有效措施,现有研究提示6~12月龄为手足口病疫苗接种的佳年龄段.

  • 肠道病毒71型外壳蛋白VP2基因重组表达及活性鉴定

    作者:黄学勇;刘国华;胡小宁;杜燕华;李幸乐;许玉玲;陈豪敏;许汴利

    目的 克隆表达肠道病毒71型(EV71)外壳蛋白VP2,鉴定重组蛋白免疫活性,为EV71血清学检测试剂和疫苗研究提供依据.方法 利用PCR技术从EV71/Henan/106/2009河南分离株基因组扩增VP2基因,经酶切连接到表达载体pMAL-c2X中,转化大肠杆菌(E.coli TB1);用异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导目的基因表达,并对重组蛋白进行纯化,SDS-PAGE和Western blotting方法对重组蛋白分析鉴定其免疫活性;建立ELISA检测EV71 IgM抗体方法,检测手足口病患儿急性期中和抗体阳性血清60份,其中阳性52份,阴性8份;检测临床诊断手足口病患儿急性期血清标本88份.结果 PCR方法扩增的VP2基因长度约为762 bp;经酶切鉴定插入到表达载体的基因片段与预期目的片段相一致;SDS-PAGE结果显示表达产物相对分子质量约为71 500;经大肠杆菌高效表达和纯化获得了重组蛋白EV71-VP2,通过Western blotting分析,该重组蛋白与手足口病患者血清反应产生特异杂交带;建立ELISA检测方法的灵敏度为87%,特异度为83%.在临床诊断的88份手足口病患儿急性期血清标本中,抗EV71-IgM阳性48份,阳性率为55%.结论 本研究成功克隆并构建了EV71 VP2基因高效原核表达系统,初步结果显示重组蛋白具有较好的抗原性,为EV71诊断试剂的研究奠定了基础.

  • 2012-2014年江苏省儿童肠道病毒71型血清流行病学特征分析

    作者:周洋;李靖欣;孟繁岳;胡月梅;金鹏飞;张雪峰;朱凤才

    目的 分析2012-2014年江苏省6~35月龄儿童肠道病毒71型(EV-A71)中和抗体变化规律及在不同人群中的分布特征.方法 2012年3月至2014年3月,以江苏省赣榆县、射阳县、东海县、宝应县、邳州市和泰兴市为研究现场,依托现场建立的肠道病毒监测系统,结合监护人主动报告和被动就医的方式,对该期间入组的1276名6~35月龄安慰剂组研究对象进行基线时、随访第1年和第2年定期血清学随访,对发现疑似肠道病毒感染所致疾病患者,采集标本进行EV-A71病原学确诊.采用x2检验、x2趋势检验或方差分析分别比较不同特征调查对象EV-A71中和抗体阳性率和抗体几何平均滴度(GMT)水平的差异.结果 2年随访中,EV-A71中和抗体阳性率随着年龄增加而升高(x2趋势值分别为39.33、56.41和32.25,P值均<0.001),基线时、随访第1年和第2年分别为22.57%(288/1276)、37.72%(444/1177)和42.84%(422/985);基线时、随访第1年和第2年GMT水平分别为9.95、15.37和24.05(F值分别为22.90、46.36和41.58,P值均<0.001).2年间,EV-A71年新发感染率分别为13.47%(158/1 173)和20.73%(192/926),其中,319例基线时月龄为24~35的儿童2年间新发感染率较高,基线时至随访第1年为17.87%(57例),随访第1年至第2年为27.20%(65例);EV-A71中和抗体年衰减率分别为2.81%(33/1 173)和8.10% (75/926).结论 2012-2014年,江苏省儿童EV-A71中和抗体阳性率和GMT水平随着年龄增长而上升;3~4岁儿童EV-A71新发感染率较高;自然感染后所诱导的EV-A71中和抗体水平可至少维持2年.

  • 肠道病毒A71型灭活疫苗(Vero细胞)上市后多中心安全性研究

    作者:曾吉;唐田;王一军;吕华坤;黄建华;李秀群;贾宁宁;曾刚;陈直平

    目的 评价肠道病毒A71型(EV-A71)灭活疫苗(Vero细胞)(EV-A71疫苗)上市后常规接种的安全性.方法 选取浙江全省11个地市,北京丰台区,广西壮族自治区平乐县、钦南区、平果县,江苏东台市作为研究现场,以2016年7月至2018年6月期间自愿自费接种EV-A71疫苗的儿童作为研究对象,其中,北京丰台区和江苏东台市以全部接种者作为观察对象;其余地区均采用系统抽样的方式.共45239名.在接种每剂EV-A71疫苗后30 min、30 min至3 d和4~30 d,通过现场观察、电话和面访的方式主动监测并收集儿童的不良反应发生情况,描述不同种类、症状和级别的不良反应发生率.结果 45239名儿童共接种EV-A71疫苗71243剂次,总不良反应发生率为1.079%(769剂次);不同年龄组间,5~11月龄组不良反应发生率高,为1.182%(177/14973),≥36月龄组低,为0.849%(18/2119);征集性不良反应发生率较高,为1.047%(746剂次);1和2级不良反应发生率较高,分别为0.404%(288剂次)和0.554%(395剂次),未见4级不良反应发生.第1和2剂分别接种40736和30507剂次,不良反应发生率分别为1.281%(522剂次)和0.810%(247剂次);局部不良反应发生率分别为0.091%(37剂次)和0.043%(13剂次),全身不良反应发生率分别为1.168%(476剂次)和0.760%(232剂次);不良反应症状基本相同,局部反应均主要表现为注射部位发红,分别发生24和11剂次,全身反应均主要表现为发热,分别发生362和190剂次;不良反应均主要发生在接种后30 min至3 d内,发生率分别为1.016%(414剂次)和0.698%(213剂次).结论 儿童接种疫苗后不良反应发生率较低且多为轻中度,EV-A71疫苗安全性良好.

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