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猪逆转录病毒与生物人工肝的使用
生物型人工肝(bioartificial liver,BAL)或组合型生物人工肝(hybridbioartificial liver,HBL),是目前国内外公认接近自然肝脏,功能也全面的人工肝脏支持系统[1].所谓生物型人工肝,就是在整个治疗系统中包含有活的肝细胞或组织,因此具有相应生物活性的人工肝支持系统.在生物人工肝领域,因为猪解剖、生理特点与人类相似,猪细胞来源广泛,经济适用,因此目前应用多的生物部分是猪肝脏细胞.但目前已知,作为异种细胞猪肝细胞内存在着猪内源性逆转录病毒(porcine endogenousretrovirus,PERV),有引起生物人工肝治疗患者PERV感染的危险.因此,本文就猪内源性逆转录病毒及猪源性生物人工肝的安全性问题作一简要总结.
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组织工程种子细胞的研究进展
组织工程学近年来研究进展很快,目前采用组织工程技术建造的部分组织或器官已经开始进入或即将进入临床应用,如组织工程化皮肤已经实现商品化,软骨组织工程产品也已经进入临床前期实验阶段,在近年内即可进入临床应用[1～3,12]. 组织工程研究成功与否主要取决于以下三个关键性制约因素:种子细胞、支架材料以及有助于细胞生长、分化的外在环境.其中获得足够数量、不引起免疫排斥反应且具有再生活力的种子细胞是开展组织工程研究的前提和基础.尽管目前种子细胞的研究仍面临众多挑战,但令人欣喜的是,随着干细胞体外分离、培养和扩增技术取得成功,干细胞作为组织工程种子细胞的研究已经取得突破性进展[4～6]. 鉴于自体细胞、异体细胞及异种细胞作为种子细胞的研究进展一直较为缓慢,而人类干细胞研究却取得明显进展,展现了未来广阔的应用前景,因此,本文结合近年来国内外对几种重要的种子细胞研究进展,着重对种子细胞来源、胚胎干细胞、组织干细胞的研究现状进行了分析,并对研究面临的挑战和未来发展趋势进行了讨论.
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同种和异种混合淋巴细胞反应及分类混合淋巴细胞反应的比较
目的:对比体外人外周血淋巴细胞对于异种小鼠细胞和同种异体细胞混合淋巴细胞反应.方法:建立异种-同种混合淋巴细胞反应模型,进行分类细胞反应试验.结果:人外周血淋巴细胞对于异种小鼠细胞的反应明显低于对于同种异体细胞的反应(P＜0.05).细胞分类研究显示:在异种混合淋巴细胞反应中,主要是CD4+T细胞通过间接途径受小鼠抗原刺激而增生;在同种混合淋巴细胞反应中,主要是CD4+T细胞通过直接途径受同种异体抗原刺激而增生.在两种混合淋巴细胞反应中,CD8+T细胞也参与.结论:异种混合淋巴细胞反应弱于同种混合淋巴细胞反应,异种细胞只通过间接途径刺激T细胞.同种和异种混合淋巴细胞反应均需要抗原提呈细胞参与,CD4+T淋巴细胞是反应的主要细胞.
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肝细胞与异种细胞混合共微囊化的研究进展
异体肝移植与生物型人工肝是目前治疗急性肝衰竭较为有效和直接的方法,但它们都存在供体来源以及免疫排斥反应强烈等问题而限制了应用.
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体外诱导大鼠骨髓干细胞向肝细胞横向分化
近期研究证明,某些骨髓干细胞可以分化成为肝细胞或胆管细胞[1,2],这些发现具有重要的临床应用价值,如用其来作为生物人工肝或肝细胞移植的供体细胞,以解决供体缺乏,同时自体细胞还可免除异基因或异种细胞所致的许多不便.为此,作者通过肝细胞生长因子(HGF)、上皮细胞生长因子(EGF)体外诱导骨髓干细胞向肝细胞分化的研究,探索骨髓干细胞横向分化为肝细胞的作用机制.
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组织工程技术系列专题(二)——种子细胞与组织工程的研究
组织工程研究成功与否主要取决于以下三个基本要素:种子细胞、支架材料以及有助于细胞生长、分化的外在环境.其中获得足够数量、不引起免疫排斥反应且具有再生活力的种子细胞是开展组织工程研究的前提和基础.组织工程研究需要的种子细胞有多种来源,如自体细胞、同种异体细胞、异种细胞以及自体或同种异体干细胞,每一种细胞来源都有其优缺点.近年来,干细胞的研究取得了显著性进展,展现出广阔的应用前景[1-3].
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新生猪胰岛细胞的聚鸟氨酸微囊体外试验研究
微囊化技术为异种细胞的移植提供免疫屏障,可有效隔离移植体内的免疫排斥反应[1].微囊化胰岛细胞的移植在治疗糖尿病方面取得了很大的进展,但由于制备微囊所用材料不同,对移植后囊中细胞的生理功能影响也不同,目前,经常制备的是海藻酸钠-聚赖氨酸-海藻酸钠(APA)微囊,而海藻酸钠-聚鸟氨酸-海藻酸钠(ALA)微囊很少有报道.
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以成纤维细胞作为饲养层供角朊细胞生长
体外角朊细胞培养已有多年的历史,随着人们对角朊细胞(Keratinocyte,KC)生长状况、结构功能及生物学特性的不断了解,培养技术日趋完善.比较成熟的是以NIH3T3细胞作为饲养层,有血清培养法[1]和无血清培养法[2],前者可以培养出整张细胞膜片用于临床;后者用于对KC特性的实验研究,但3T3细胞作为异种细胞,存在伦理学问题及潜在的危害,因此本研究用成纤维细胞作为饲养层培养KC,旨在观察其促贴壁、生长和分化作用,为临床提供理论依据.
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以兔自体结膜成纤维细胞为饲养细胞构建上皮细胞植片
近年来用以组织工程技术制备的角膜上皮或口腔黏膜上皮细胞植片成为一种目前治疗角膜缘干细胞缺乏性疾病的新技术[1-2],能够改善角膜缘的功能,恢复角膜表面的完整性.目前的构建体系常用小鼠胚胎组织来源的3T3成纤维细胞作为饲养细胞,但这种含异种细胞的植片可成为异种病原向人体传播的潜在渠道,也存在异种排斥反应的可能性[3].因此寻找更安全的饲养细胞成为完善现有技术的一个关键.本研究观察以兔自体结膜成纤维细胞为饲养细胞、兔口腔黏膜上皮细胞为种子细胞构建上皮细胞植片的可行性.
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微囊化异种细胞免疫隔离作用的研究进展
免疫排斥是组织器官移植中大障碍.当前,临床主要通过组织配型、抑制免疫、诱导耐受[1]等减轻排斥反应.为解决组织器官移植的免疫排斥和移植物来源匮乏,免疫隔离技术的日益成熟为其另辟蹊径.免疫隔离技术即通过人工技术制备半透膜隔离移植物与受体的免疫系统,屏障一定分子量的大分子物质等自由通过;半透膜材料必须具备对机体无毒、生物相容性好、不易引起宿主反应等特点.
