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人类8型疱疹病毒(HHV-8)末端重复序列的研究进展
人类疱疹病毒8(human herpes virus,HHV-8)是1994年美国学者Chang等[1]在艾滋病(aquired immunodeficiency syndrome,AIDS)患者的卡波西肉瘤(kaposi's sarcoma,KS)组织中发现的一种新肿瘤病毒,属于γ-2疱疹病毒亚科,与猴疱疹病毒(herpers viruss simiae,HVS)和EB病毒(epsteinBarr virus,EBV) DNA序列有很高同源性,被公认为KS致病因子.之后,HHV-8不仅发现在艾滋病相关KS中,在KS 其他三种类型(经典型、非洲地方型、器官移植后相关型)中均有发现,并出现在B淋巴组织增生性疾病中,如原发性渗出性淋巴瘤(primary effusion lymphomas,PEL)及多中心卡斯特莱曼病(multicentric Castleman'sdisease,MCD)两种肿瘤关系密切.HHV-8基因组为170 kb线性双链DNA.
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腺伴随病毒载体介导帕金森病基因治疗的实验研究
一、材料和方法1.腺伴随病毒(adeno-associatedvirus,AAV)载体的制备:酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)质粒[芳香族氨基酸脱羧酶(aromatic amino-acid decarboxlase,AADC)或三磷酸鸟苷环水解酶I(GTP cyclohydrolase I,GCH)质粒]是AAV基因组反向末端重复序列之间依次含巨细胞病毒早期响应启动因子、人类生长激素第1内含子、人源性TH(AADC或GCH)基因、SV40多聚腺苷信号的载体质粒.以磷酸钙沉积法共转染载体质粒、辅助质粒和腺病毒基因质粒于293细胞.3天后回收并以冻融法裂解细胞,经离心所获得上清再经过2次氯化铯(CsCl)梯度密度超离心等精制处理,终得到AAV-TH、AAV-AADC及AAV-GCH载体.以DNA斑点印迹法测定载体滴度为1 012～1 013颗粒/ml.
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EB病毒相关血液系统疾病免疫治疗的研究进展
EB病毒(EBV)属于疱疹病毒γ亚科,在细胞外成熟的病毒颗粒呈球形.EBV基因是线性双链DNA,平均172 kb,其中含有一系列0.5 kb的末端重复序列,多个内部重复序列将病毒基因分成长短不等的独特序列区.全球90％的人口潜伏感染过EBV.EBV初次感染常发生在口咽部,可以是无症状的,也可表现为单核细胞增多症.EBV具有高度的免疫原性.在初次感染时,正常人体内可激发强大的体液免疫及包括CD+4细胞和CD+8细胞在内的细胞免疫,EBV血清阳性的免疫功能正常的人群可以控制初次感染和周期性感染的再次激活.在清除初次感染后,EBV在感染的B细胞内作为游离体形式存在,表达很有限的一部分EBV抗原而形成潜伏感染,这些抗原包括EBV核心抗原(EBNA)1、2、3A、3B、3C和LP,潜伏模蛋白(LMP)1、2.
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腺伴随病毒载体介导帕金森病猴基因治疗的实验研究
我们在以往的研究基础上,进一步探讨多巴胺合成酶基因的三重共转导对帕金森病灵长类模型基因治疗实验结果.材料和方法:(1)腺伴随病毒(AAV)载体的制备:酪氨酸羟化酶(TH)质粒[芳香族氨基酸脱羧酶(AADC)或三磷酸鸟苷环水解酶I(GCH)质粒]是AAV基因组反向末端重复序列之间依次含巨细胞病毒早期响应启动因子、人类生长激素第一内含子、人源性TH(AADC或GCH)基因、SV40多聚腺苷信号的载体质粒.以磷酸钙沉积法共转染载体质粒、辅助质粒和腺病毒基因质粒于293细胞.3 d后回收并以冻融法裂解细胞,经离心所获得上清再经过2次氯化铯(CsCl)梯度密度超离心等精制处理,终得到AAV-TH、AAV-AADC及AAV-GCH载体.
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PCR扩增IS6110在结核病检测和流行病学中的应用评价
插入序列6110(IS6110)是结核分支杆菌基因组中的一个多拷贝的保守片段.Thierry等在1990年首先报道了结核分支杆菌一个插入序列的核苷酸顺序,并命名为IS6110.IS6110中含有1 361bp的核苷酸和28 bp的反向末端重复序列,它属于插入序列IS3家族,并且只存在于结核分支杆菌复合群(Mycobacteria tuberculosis complex,MTC)中[1].
