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HSVI立即早期基因研究进展
相对于其它病毒而言,单纯疱疹病毒的基因组巨人,基因数日繁多,根据其基因转录的先后顺序,分为立即早期、早期利晚期基因二类.作为病毒首先表达的立即早期基因,它们的表达产物都为非结构蛋白,可对病毒的复制进行调控,决定了病毒进入细胞后的命运.因此对单纯疱疹病毒的立即早期基因的定位、命名、翻译后修饰以及对其产物功能的分析对该病毒的分子生物学的病理学研究具有重要的意义.
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吲哚胺2,3双加氧酶对免疫的调节作用
1963年,Shimizu 等[1]分离出 IDO,发现其在哺乳动物体内分布广泛,在各种肝外组织中都有 IDO 的存在,尤以胎盘和肺中表达多。IDO 与肝内的 L-色氨酸2,3-双加氧酶(TDO)催化的反应相同。IDO 以超氧阴离子(O2-)作为辅助因子,酶解吡咯环,生成 N-甲酰犬尿氨酸和犬尿氨酸。其底物主要包括D-色氨酸、5-羟色氨、5-羟-L-色氨酸和 L-色氨酸,动力学研究表明其适底物是 L-色氨酸。TDO 仅表达在哺乳动物肝脏,底物仅限于色氨酸[2]。人类 IDO 分子量约42kD,pI =69,由403个氨基酸残基组成[3]。IDO 基因启动子长1245bp,含有2个干扰素刺激反应元件(ISRE),这2个 ISRE 阳序列间隔1kb 它们在 IFN-γ诱导 IDO 基因转录中必不可少。
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小檗碱对大肠杆菌基因转录抑制作用的实验研究
目的:对小劈碱(BBR)对大肠杆菌的抑制作用的分子靶点进行探讨.方法:鉴于BBR对DNA结合的偏好性,本文从基因转录表达水平对BBR的大肠杆菌生长抑制作用靶点进行实验研究.结果:BBR对于大肠杆菌基因上游调控元件UP element具有较强的亲和力,而在此元件地转录起始区含有TATA碱基序列.进一步对启动子上游含有UP element调控元件的基因sulA、recA、16S和启动子上游不合UP element调控元件的基因lpxC、secG、mutT的mRNA表达比较表明,BBR抑制sulA、recA、16S的表达,对lpxC、secG、mutT无明显作用,提示TATA序列是BBR的作用靶点.结论:本结果对从基因转录水平探讨BBR抑菌作用提供了新思路.
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小檗碱抑菌作用的研究:调控肠道菌代谢的可能性及其意义
小檗碱(BBR)作为抗肠道感染的经典药已为人们所熟知,其抑制肠道菌的作用是其治疗肠道感染作用的核心.随着对肠道菌在肠道的生存变化及其相关代谢产物对全身生理病理功能所产生影响的不断认知,越来越多的文献显示BBR可能通过影响肠道菌从而对体内糖脂代谢以及脑功能活动产生影响.本文在此背景下对BBR抑菌作用的研究进行分析综述,并依据原核生物基因表达的特点对BBR可能作用的分子靶点进行分析,以期有助于对BBR调控肠道菌机制的深入研究,从而更全面的认识BBR的药理作用.
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电针对高血压性脑出血大鼠海马Gi2α、Gi3α基因转录的影响
目的:从基因转录水平研究电针对高血压性脑出血的治疗作用及其可能作用机制.方法:双肾双夹法复制易卒中型肾血管性高血压模型,以胶原酶加肝素脑内注射诱发脑出血,建立高血压性脑出血大鼠模型.运用Northern blotting分子杂交技术动态检测电针治疗后不同时相点脑出血大鼠海马Gi蛋白α亚基基因转录水平.结果:模型组大鼠海马Gi2αmRNA、Gi3αmRNA表达明显减弱,其中以Gi2αmRNA表达下降更为明显.电针治疗后,大鼠海马Gi2αmRNA、Gi3αmRNA表达均呈现不同程度的增强,并随着时间的推移而逐渐趋于恢复.结论:电针水沟、内关、足三里穴治疗脑出血的作用机制可能与上调脑组织Giα基因转录水平,使Giα蛋白合成增加,进而减轻了紊乱的信号转导系统对脑组织引起的损害等作用有关.
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苦参碱抑制大肠癌HT-29细胞环氧化酶-2表达的研究
目的从基因和蛋白水平探讨中药成分苦参碱(matrine)对大肠癌HT-29细胞环氧化酶-2(COX-2)表达的影响.方法分别采用RT-PCR、Western-blot、ELISA等方法检测不同浓度苦参碱处理HT-29细胞前后COX-2 mRNA、蛋白及其产物前列腺素E2 (PGE2)水平的改变.结果苦参碱可抑制HT-29细胞COX-2 mRNA、蛋白表达及PGE2合成水平,但对COX-1无影响.当苦参碱2.0 mg/ml处理时,COX-2 mRNA表达在处理后6h和9h时抑制率均为100%;细胞培养液PGE2合成水平在9h时抑制率为63.9%;COX-2蛋白表达在12h和24h时抑制率分别为48%和100%.结论苦参碱具有选择抑制HT-29细胞COX-2的基因转录、蛋白表达和功能活性等作用, 在一定浓度和时间范围内, 表现出时效与量效关系.
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马立克氏病病毒meq基因细胞转化机制的新研究进展
马立克氏病病毒(Marek's disease virus,MDV)是禽类马立克氏病(MD)的病原体.MDV有三个血清型,其中MDV-1强毒株不仅可以导致宿主淋巴细胞溶细胞性病变,使淋巴组织萎缩,而且还有转化淋巴细胞能力,诱发淋巴瘤[1].meq是MDV-1的主要致瘤基因,近来研究发现,MEQ不仅具有转录活化作用,它还能与C-末端结合蛋白家族(Ct-BPs)转录辅助抑制因子结合成转录抑制复合物,抑制目的基因转录.
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植物雌激素α-玉米赤霉醇对HUVEC组织因子基因表达的转录调控作用
目的探讨植物雌激素a-玉米赤霉醇(ZAL)影响血管内皮细胞组织因子(TF)基因表达的转录调控机制,并与内源性动物类雌激素17β联雌二醇(17β联estradiol,E2)进行比较分析.方法进行人脐静脉内皮细胞(HUVECs)原代培养,利用基因重组技术构建4个含人TF基因5'上游不同长度序列的荧光素酶报告基因质粒,用脂质体转染法分别转入以下6组细胞:①正常对照组;②10-7mol/LE2刺激组;③10-7mol/LZAL刺激组;④10-6mol/LAngⅡ刺激组;⑤10-7mol/L E2+10-6mol/L AngⅡ刺激组;⑥10-7mol/L ZAL+10-6mol/L AngⅡ刺激组;测定细胞裂解液中荧光素酶比活性(relative luciferase activity,RLA)的变化.结果转染pGL3-TF-171/+71的各组细胞RLA均较低,不同刺激组之间无显著差异;AngⅡ可使质粒pGL3-TF-593/+71,pGL3-TF-316/+71,pGL3-TF-236/+71荧光素酶表达大量增加,E2、ZAL均可不同程度地抑制AngⅡ的上述效应,2者间无显著差异.结论含有1个NF-κB位点和2个AP-1位点的-236 bp~-171 bp区域在E2或ZAL影响TF基因转录中有重要作用.
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TACC蛋白与肿瘤
TACC蛋白家族的成员是中心体主轴的组成蛋白,被认为与多种肿瘤的形成相关.TACC蛋白可能通过调节染色体的稳定性,以及细胞内相关基因的转录,从而影响了肿瘤的形成.但是现有的研究尚不能阐明TACC蛋白在肿瘤中的确切作用.本文综述了近年来关于TACC蛋白与肿瘤关系的研究,并且着重介绍了TACC蛋白调控肿瘤形成的分子机制.
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EGF对HaCaT细胞中神经元限制性沉默因子表达的影响
表皮生长因子(epithelial growth factor,EGF)在皮肤的发育、稳态维系和创伤修复中起重要作用.EGF能够通过与受体结合激活下游信号通路,促进角质形成细胞的增殖,此过程中涉及多种转录调控因子的参与,其中包括Kruppel转录因子家族的神经元限制性沉默因子(neuron-restrictive silencing factor,REST/NRSF),REST能够与NRSE/RE1(neuron-restrictive silencer element,NRSE;又称repressor element 1,REl)等序列结合,使组蛋白去乙酰化,阻遏基因转录[1].本文研究了EGF对皮肤角质形成细胞HaCaT细胞系中REST表达的影响,为探索REST在角质形成细胞中的调控机制提供依据.
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外源多胺对大鼠再生肝细胞鸟氨酸脱羧酶基因转录的调节
目的 研究天然多胺(腐胺、精脒和精胺)对大鼠再生肝细胞鸟氨酸脱羧酶(ODC)基因转录的调节,探讨多胺在肝再生中的作用.方法 大鼠部分肝切除术诱导再生肝,采用原位杂交技术分析ODC mRNA的表达量,外源多胺(溶于0.9%NaCl)的处理用皮下注射法.结果 外源多胺处理后,再生肝ODC mRNA水平的变化趋势与对照组相似,但不同种类、剂量的多胺,结果差异明显.在所观察到的整个肝再生期间,高剂量腐胺(20 mg/kg体重)处理组mRNA水平始终低于对照组,特别在部分肝切除后2、4和10 h与对照组相比具有显著性差异(P<0.05);低剂量(0.02 mg/kg体重)的腐胺处理组,只在4 h和12 h显著高于对照组.高剂量精脒(0.15 mg/kg体重)处理组的ODC mRNA水平始终低于对照组(在10 h例外);而低剂量(0.03 mg/kg体重)处理组则不同,ODC mRNA水平表现出先抑制(在2 h)后促进(在4 h和6 h)的特点.精胺的作用与精脒相似.结论 不同浓度的多胺(主要是精脒和精胺)对大鼠再生肝细胞ODC基因转录存在着反馈调节作用.
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核转录因子kappa B的研究进展
生物体的生长、发育、分化的过程是受一系列基因表达而调控的,转录因子则对基因表达起着开或关的作用(单独作用或与其他蛋白联合作用.)核转录因子(nuclear transcription factor)是一类蛋白质,它们具有和某些基因上启动子(promotor)区的固定核苷酸序列结合,而启动基因转录的功能.核转录因子kappa B(NF-κ B)是其中重要的一组蛋白质.
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卵巢切除对大鼠子宫雌激素受体亚型的影响
雌激素在生长、分化及雌性生殖功能中扮演重要角色.雌激素的作用是由靶细胞内雌激素受体(estrogen receptor,ER)所介导的,ER是类固醇受体超家族成员之一,它是通过与雌激素受体反应元件结合调控基因转录,而在靶细胞中发挥功能的.
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核受体超家族介导基因调控的分子机制
核受体超家族由甾体激素、甲状腺激素、维甲酸、维生素D等化学信号的受体及配体未明的多种孤儿受体组成,该家族成员的主要功能是作为配体激活的转录因子,调控代谢、发育、生殖相关基因的表达.核受体与启动子和增强子上的激素应答元件及其它DNA序列特异性激活因子结合,而激活或阻遏靶基因的转录.核受体调控基因转录需要募集称为辅调控因子的蛋白分子,这些蛋白分子与核受体一起装配成多组分的复合物,它们可提供相关的酶促活性和脚手架功能.通过与基础转录机器的相互作用和对染色质结构的可逆性共价修饰等作用,辅调控因子调控核受体对靶基因转录的激活或阻遏.许多辅调控因子本身受到多条细胞内信号转导途径的调控.
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组蛋白修饰酶对基因转录的调控
基因在转录过程中,需招募多种组蛋白修饰酶来对组蛋白进行化学修饰,这些化学修饰包括:组蛋白的甲基化、乙酰化、磷酸化、泛素化和SUMO化等.大多数组蛋白修饰酶能与不同的转录因子形成复合物,并引起组蛋白和DNA之间相互作用的改变,从而调控基因的转录.本文总结了各种组蛋白修饰酶复合物的组成、结构及功能方面的研究进展.
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诱导性 RNAi 在体试验证实转录因子 BATF 参与CD8+ T 细胞分化起始过程
效应性 CD8+ T 细胞分化成熟是机体抵抗病原体侵袭及疫苗发挥作用的重要环节。激活后数小时内,初始 CD8+ T 细胞起始一系列基因转录促进向效应性及记忆型 T 细胞分化,然而这一过程的调节机制尚不清楚。利用病毒转导 shRNA 是一项经典的通过特异性敲低某基因实现研究该基因功能的技术,但该项技术在初始 T 细胞中效率非常低。后续改进的方法多集中在通过给予各种体外刺激如 TCR、感染、细胞因子等激活初始 T 细胞而达到提高转导率的目的,可是这种额外的干扰对细胞的正常分化过程造成较大影响。
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NF-κB 激活的 GSNOR 基因转录可抑制 NGF 诱导的 PC12分化
NO 广泛参与神经系统神经元细胞周期、生长分化及突触形成等过程。S-亚硝基谷胱甘肽还原酶(S-nitrosoglutathione re-ductase,GSNOR)作为神经元中蛋白亚硝基化的主要调控因子对学习和记忆功能有重要影响,然而其在神经元的分化及突触形成过程中的作用机制尚不清楚。
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CRISPR-Cas 系统介导的基因组编辑和基因转录调控
CRISPR 是一个特殊的 DNA 重复序列家族,其基因结构的主体是由同向重复序列(repeat)与间隔序列(spacer)构成的多段 R-S 结构组成,称为 CRISPR 基因座(CRISPR locus)。在 CRISPR位点的一端存在几组编码蛋白质的基因序列,称为 CRISPR 相关(CRISPR-associated,Cas)基因,其编码的蛋白质称为 CAS 蛋白。利用 CRISPR-Cas9系统对 DNA 分子的靶向切割特性,使其可被用于定向的基因修饰。除用于定点的基因编辑,CRISPR-Cas 系统也可用于干扰目的基因的转录。
关键词: 基因组编辑 基因转录 CRISPR-Cas 系统 -
从基因水平对新型佐剂在旋毛虫疫苗中免疫调节作用的探讨
目的从细胞因子的基因转录水平探讨两种新型佐剂霍乱毒素B亚单位(CT-B)和皂素(Saponin)在旋毛虫疫苗中的免疫调节作用. 方法 36只NIH小鼠随机分为CT-B佐剂免疫组、Saponin佐剂免疫组和对照组.将CT-B和Saponin分别与旋毛虫肌幼虫可溶性抗原混匀后,以口服或皮下注射途径免疫小鼠,隔周1次.第3次免疫后1周,经口感染旋毛虫感染期肌幼虫.感染后第8 d,采用RT-PCR技术分析各组小鼠脾细胞在体外旋毛虫肌幼虫抗原刺激下,转录细胞因子IFN-γ、IL-2、IL-4及IL-5 mRNA的水平 . 结果各组小鼠的脾细胞在体外抗原诱导下均未能转录IL-2和IFN-γmRNA,但均有不同程度的IL-4和IL-5特异扩增,两免疫组的IL-4及IL-5 mRNA转录水平明显高于对照组.结论 Th2细胞及其分泌的细胞因子在机体抗旋毛虫的保护性免疫中发挥着重要作用;从佐剂角度提高旋毛虫疫苗的保护性是可行的.
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聚酰胺抑制基因转录研究进展
聚酰胺(polyamide)是一类人工合成的小分子,能以序列特异性与DNA小沟结合,从而干扰天然转录因子与特定DNA序列的结合,实现对特定基因表达的调控.此类小分子发展迅速,近年来与烷化剂连接而提出了基因沉默新途径,具有特异基因治疗的潜力.本文总结了聚酰胺对特定基因转录抑制的研究进展.