双抗原夹心酶免疫试验对人畜布鲁氏菌抗体检测的研究

目的 为人畜布鲁氏菌病(布病)血清学诊断、监测及流行病学调查提供实用和简便的方法.方法 在首次制备布鲁氏菌(布氏菌)抗原-辣根过氧化物酶结合物的基础上,建立了检测人畜布氏菌抗体的双抗原夹心酶免疫试验(DAgS-EIA,包括DAgS-ELISA及DAgS-DIEA).用本法及间接ELISA(I-E LISA)、试管凝集试验(SAT)及虎红平板凝集试验(RBPT)等常规血清学方法对从河南省及河北省收集的部分布病患者、可疑患者,布氏菌感染羊只以及布氏菌感染的实验动物血清标本进行了检测.结果 对布病患者及可疑者的检查结果表明,阳性率以D AgS-ELISA高(60.0%～62.9%),余依次为RBPT(48.6%～58.1%)、I-ELISA (55.6%)、DAgS-DIEA(53.7%)及SAT(44.2%);对布氏菌感染羊的阳性率均为81.8%.结论 上述结果表明,双抗原夹心酶免疫试验检测人畜布氏菌抗体,不仅特异、简便而且仅制备一种布氏菌抗原-酶结合物就可对人及多种动物进行检测.

日本血吸虫病免疫诊断的研究进展与问题

对日本血吸虫病的实验诊断,尽管可采用病原学方法,但由于血吸虫在终宿主体内的寄生有着特殊的生物学关系,导致在慢性病人和低度感染者的粪便中难以查见病原体,而且多数病原学方法的操作繁琐.为寻找更敏感和较简便的方法来替代或补充病原学诊断方法的不足,自50年代起,国内外学者就开始进行了免疫诊断的研究,经过半个世纪的努力,取得了显著进展.已发展了皮试、尾蚴膜实验、环卵沉淀实验、间接血凝和多种酶免疫试验等方法;鉴定出10余种有较好诊断价值的抗原(包括同源和异源抗原);创立了多个检测系统(如循环抗原、循环抗体和循环复合物的检测);探索了皮内、血、尿多个测试途

428 用酶免疫试验定量测定灵芝中的灵芝酸A

酶免疫试验检测人畜布氏菌感染的研究概况

自Corlsson应用酶免疫试验(Immunoassayy,EIA)检测牛血清中布氏菌抗体以来,该技术被广泛应用于人畜布氏菌病(简称布病)的诊断与鉴别诊断和监测与流行病学调查等[1～5].

类风湿因子阳性血清对酶免法丙肝抗体检测结果影响分析

第二代、第三代丙肝抗体酶免疫试验(抗-HCV EIA)诊断试剂的出现,提高了HCV抗体的检出率.由于现用的试剂盒所用包被抗原为合成多肽抗原和基因工程抗原(包括HCV病毒结构区核心抗原和非结构区抗原),增加了试验的敏感性和特异性.类风湿因子(RF)阳性血清对现用试剂盒是否有干扰,是否造成假阳性结果,为此我们进行了初步检测,结果如下.

建立双抗原夹心酶免疫试验对人畜布鲁氏菌抗体检测的研究

目的 为人畜布鲁氏菌病(布病)的血清学诊断、监测及流行病学调查提供特异、敏感、快速的试验方法.方法 在制备高滴度的布鲁氏菌(布氏菌)抗原及其抗原辣根过氧化物酶结合物基础上.建立了检测人畜布氏菌抗体的双抗原夹心酶免疫试验(DAgS-EIA),包括常规双抗原夹心酶联免疫吸附试验(DAgS-ELISA)、双抗原夹心酶免疫斑点试验(DAgS-DIEA)以及快速双抗原夹心ELISA(快速DAgS-ELISA),并对影响本试验的主要因素因素进行了试验.结果 制备了高滴度的布氏菌抗原及其抗原酶结合物和冻干制品.并在此基础上,建立了常规DAgS-ELISA及DAgS-DIEA以及快速DAgS-ELISA检测人畜布氏菌抗体方法.经对115份布病患者血清检测结果,阳性率以DAgS-ELISA为高(61.7%),其余依次为RBPT(58.1%)、I-ELISA(55.6%)、DAgS-DIEA(53.7%)、及SAT(44.2%)且用DAgS-EIA检测布氏菌感染羊、牛、猪及实验动物家兔、豚鼠和小鼠均为强阳性反应,而对正常人、羊、牛、猪及实验动物血清均为阴性反应.结论 双抗原夹心酶免疫试验检测人畜血清布氏菌抗体,不仅特异、敏感、快速、简便而且仅需制备单一的布氏菌抗原酶结合物就可对人及各类动物血清布氏菌抗体进行检测.

酶联免疫试验与免疫比浊法检测类风湿因子的结果比较分析

目的探讨酶联免疫试验和免疫比浊法检测类风湿因子（RF）在类风湿性关节炎（RA）诊断中的临床应用价值。方法采用酶联免疫试验为实验组、免疫比浊法为对照组院实验组（n=352），对照组（n=352），分别检测我院住院患者和门诊就诊者的类风湿因子，对阳性检出率采用SPSS 18.02检验进行结果比较分析。结果实验组与对照组，RF阳性分别为134例占38.06%，85例占24.14%；其中，经过临床诊断有131例被确诊为类风湿性关节炎患者，在这131例类风湿性关节炎（RA）中，实验组院检出RF阳性126例，检出率96.18%。对照组院检出RF阳性83例，检出率63.36%。酶联免疫试验检出率明显优于免疫比浊法，经统计学处理差异显著(<0.05)。结论两种检验方法相关性良好,酶联免疫试验检测类风湿性因子结果的诊断价值比免疫比浊法要高，方法简便，敏感性优于免疫比浊法，值得推广。

新型蛋白用于梅毒诊断的前景

梅毒是一种由苍白密螺旋体苍白亚种引起的性传播疾病，虽然青霉素可以有效地治疗这种疾病，但其仍然在世界范围内流行，部分原因是由于目前诊断检测的不足。在这里，我们报告了三种新型诊断候选蛋白的可溶性重组型变体Tp0326、Tp0453和Tp0453-Tp0326嵌合体。通过对感染的初期、中期和潜伏阶段的血清样本（ n＝169）中这些重组蛋白的特点进行筛选来评估它们的敏感性。通过筛检用标准诊断测试法确定的假阳性进行特异性评估（n＝21），还有来自潜在交叉感染患者的样本（钩端螺旋体、莱姆病螺旋体、幽门螺杆菌、EB病毒、乙肝病毒、丙肝病毒或巨细胞病毒）（n＝38），和来自未感染个体的样本（ n ＝11）。 Tp0326、Tp0453和 Tp0453-Tp0326嵌合体的敏感性分别为86％、98％和98％，特异性分别为99％、100％和99％。在直接比较时，用Captia 梅毒（梅毒螺旋体）-G 酶免疫测定法（ Trinity Biotech公司）筛检相同的血清样品，发现其灵敏度为98％，特异性为90％。特别是在分类分析假阳性样品时，Tp0453和嵌合型表现出优异的精度（100％，而Captia检测为43％）。这些调查结果确定作为新型的梅毒特异性诊断候选蛋白，Tp0453和Tp0453-Tp0326嵌合体的性能优于目前所用的诊断梅毒的酶免疫试验，且能够准确地检测感染的各个阶段。