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北京人类免疫缺陷病毒1型阳性吸毒者env基因序列测定和亚型分析
人类免疫缺陷病毒1型(human immunodeficiency virus type 1,HIV-1)高度变异既是病毒自身特点决定的,也是适应环境和免疫逃逸的结果[1].一般来说感染的途径不同,HIV-1病毒的变异情况也不同.北京于1993年发现首例静脉吸毒感染HIV的吸毒者,2000年开始对吸毒人群进行哨点监测,2006年首次对流动人口中的吸毒者HIV-1毒株亚型进行测定,但关于北京吸毒人群HIV-1的毒株亚型及其分布仍知之甚少.
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6种藏族药提取物体外抗HIV-1活性的初步探讨
目的:对斑花黄堇、木藤蓼、野棉花、黄花铁线莲、黑心虎耳草和短尾铁线莲6种藏药提取物的体外抗艾滋病病毒Ⅰ型(HIV-1)病毒活性的评价及其作用机制的初步研究.方法:采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法细胞毒性实验和HIV-1假病毒单周期感染实验检测提取物的体外抗病毒活性和细胞毒性;利用表面等离子共振(surface plasmon resonance,SPR)技术、蛋白酶、整合酶和逆转录酶体外活性抑制实验初步探讨药物的作用靶点.结果:在这6种藏药提取物中,木藤蓼、野棉花、黑心虎耳草提取物具有较好的体外抗HIV-1病毒活性,半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC50)分别为(6.47±0.78),(11.97 ±1.09),(11.7±0.79) mg·L-1,且细胞毒性较小,三者均具有较好的体外抑制整合酶活性.结论:木藤蓼、野棉花、黑心虎耳草提取物具有较好的抗HIV-1病毒的作用,其作用机制与整合酶的抑制作用有关.
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野生冬虫夏草水提物体外抗HIV-1病毒作用的初步研究
研究分析野生冬虫夏草的水溶浸提物抑制人免疫缺陷病毒Ⅰ型(human immunodeficiency virus-1,HIV-1)的效果及其抗病毒作用的靶点.研究分别选取新鲜虫体、子座、全草、干燥虫体和子座5种不同组分,获得水溶性提取物,采用CCK-8实验检测水提物的细胞毒性;假病毒单周期感染实验评价水提物的体外抗病毒活性;体外检测水提物对逆转录酶活性的影响,应用表面等离子共振(SPR)技术检测水提物与HIV-1 Vif蛋白的相互作用.这5种虫草水提物均具有显著的体外抗HIV-1病毒活性,抑制HIV-1逆转录酶的活性,新鲜子座水提物与Vif蛋白有良好的体外结合力.本实验明确了野生冬虫夏草的体外抗病毒活性,其作用机制可能与抑制逆转录酶活性和体外Vif蛋白有关,研究将为抗HIV-1病毒药物的研发提供实验基础.
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检测人APOBEC3G与HIV-1病毒感染因子的新方法及原理
自2002年人APOBEc3G蛋白被发现以来,HIV-1 Vif与人APOBEC3G已作为抗HIV-1药物新的治疗靶点被越来越多的抗AIDS研究人员所关注.在抗HIV治疗日趋困难的今天,人们希望从这个HIV-1的非结构蛋白和与它相对的人内源性保护因子中找到答案.新的检测Vif与APOBEc3G相互作用的方法则为找到答案提供了更快、更准确的技术手段.
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APOBEC3G和HIV-1病毒感染因子Vif研究新进展
固有免疫在机体抵御HIV-1感染过程中发挥重要作用.载脂蛋白B mRNA编辑酶催化多肽样蛋白(apolipoprotein B mRNA-editing enzyme catalytic polypeptide protein,APOBEC)家族的成员APOBEC3G(A3G)可以通过胞嘧啶脱氨机制抑制HIV-1的复制,发挥固有免疫的作用;病毒感染因子(virus infectivity factor,Vif)能与A3G结合并引发A3G的降解,使HIV-1的感染率增加100倍以上.该研究为以Vif-A3G为靶点的抗HIV-1药物的研究提供了新的思路.因此A3G、Vif及其相互作用机制成为HIV-1研究的热点.
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HIV-1病毒载量测定技术的新进展
HIV-1病毒载量是指机体内游离病毒的含量.它是一个计数单位,表示每毫升血浆中含多少拷贝数的HIV-1RNA,是反映HIV-1患者疾病进展的关键指标之一[1].通过对HIV-1病毒载量的测定,不仅可以帮助判断HIV-1感染者的状况,还可以用于判断抗病毒治疗的效果,当患者出现耐药性时,也能很快地给出结果从而指导治疗的优化[2].相对于CD4的测定,病毒载量的测定能够提供较早的参考信息.
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HIV-1流行株去糖基化修饰gp41突变体的构建及其表达和纯化
目的:构建HIV-1ⅢB标准株、中国大陆地区主要流行株CRF-BC和海南省流行株CRF-AE野生型和突变型gp41表达载体,获得gp41重组蛋白.方法:利用基因定点突变的方法,将HIV-1ⅢB、CRF-BC和CRF-AE流行株野生型gp41基因中特定的N611Q糖基化位点天冬酰胺Asn突变为谷氨酰胺Gln,使该位点去糖基化.利用基因工程技术构建野生型pcDNA3.1-gp41和突变型pcDNA3.1-Mgp41表达载体.取测序正确的重组质粒转染293 T细胞,重组蛋白经Ni-NTA亲和层析柱纯化后采用免疫杂交方法进行分析.结果:测序结果显示野生型gp41的N611糖基化位点均由天冬酰胺(Asn)的编码基因(AAU)突变为谷氨酰胺(Gln)的编码基因(GAA),成功构建了野生型和突变型gp41表达载体.琼脂糖凝胶电泳分析显示野生型和突变型HIV-1 gp41基因大小约为700 bp,Western blot免疫杂交结果显示在26 kD处出现目的条带,与预期一致.结论:成功构建了HIV-1流行株去糖基化修饰gp41突变体,为研究去糖基化修饰gp41蛋白与疾病发生发展的分子机制奠定基础.
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结核分枝杆菌诊断抗原的性质和应用
结核分枝杆菌(MTB)能增强HIV-1病毒在体内的繁殖,因此,结核病流行国家艾滋病患者感染情况更加严重[1],1995年美国科学家报道了对MTB的保护性免疫反应的研究,1997年世界卫生组织把发现种属特异性抗原作为结核分枝杆菌的研究重点.自酶联免疫法(ELISA)应用临床以来,血清学检测结核病人特异性抗体和抗原已成为结核病诊断的辅助方法.
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AIDS/HIV相关的神经系统并发症
艾滋病(AIDS)是人类免疫缺陷病毒(HIV)感染后所致的免疫缺陷相关综合症,HIV直接感染或因免疫缺陷所致的机会性感染可引起多种神经系统损害.本文将对AIDS的流行病学、发病机制、神经系统并发症、诊治及预后的研究作一综述.
关键词: 获得性免疫缺陷综合征 HIV-1病毒 神经系统 并发症