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大肠杆菌O157菌株的噬菌体分型研究
目的探讨O157菌株噬菌体分型在细菌分型诊断中的应用.方法应用6株大肠杆菌分型噬菌体对30株O157菌株进行噬菌体裂解实验,通过其裂解模式进行噬菌体分型.结果菌株进行亚分型时噬菌体分型能较好地体现出菌株的地域特征,同一fliC型别的菌株,可以具有不同的噬菌体裂解模式,不同fliC型别的菌株,可以具有相同的噬菌体裂解模式.结论fliC型别与噬菌体分型可以互相补充.为流行病学调查和疫情控制提供有力的病原学证据.
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浙江省1988~1995年伤寒沙门氏菌病原学监测研究
本文报告了浙江省1988~1995年收集的1351株伤寒沙门氏菌的噬菌体分型和耐药性测定结果.共分出24个噬菌体型别,以M1、A、D2、E1等型为主,分型率为83.12%.耐药性测定结果表明,伤寒沙门氏菌对氟哌酸和丁胺卡那霉素的敏感率在99%以上.伤寒菌对抗菌药物的耐药性主要与流行菌株的噬菌体型别有关,M1型与非M1型菌株的耐药性有显著差异.
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海、水产品中污染霍乱弧菌的鉴定和分子特征分析
目的 了解调查年份不同种类海、水产品中分离的霍乱弧菌的血清学分型、噬菌体-生物分型及毒力因子携带情况,分析海水产品污染状况与疫情的关系,为疫情预测和制定防治对策提供参考.方法 应用血清学分型及噬菌体-生物分型方法分析所分离菌株的生物表型,应用PCR方法检测毒力基因的携带情况.结果 检测的64株菌株中O139型菌株占48.44%(31/64),O1群小川型占31.25%(20/64),O1群稻叶型占20.31%(13/64);O1群噬菌体-生物分型显示均为非流行株;对61株菌毒力基因检测结果显示:O139霍乱弧菌毒力基因的检出率(83.33%)远高于O1群小川型霍乱弧菌(15.38%)和O1群稻叶型霍乱弧菌(11.11%).结论 O139型霍乱弧菌主要存在于甲鱼、甲鱼养殖水及甲壳类海水产品中,而且多为产毒株,这些海、水产品是预防和控制霍乱疫情的重要环节.
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51株临床铜绿假单胞菌ERIC-PCR分型与噬菌体分型比较研究
目的 探讨噬菌体分型技术和ERIC-PCR技术对51株临床铜绿假单胞菌的相关性. 方法 临床铜绿假单胞菌51株使用PL39、PL15、PL16、PL18、PL49和PL62(滴斑法)进行噬菌体分型,采用肠杆菌基因间重复一致序列为引物进行ERIC-PCR分型,比较两种分型方法的差异. 结果 51株铜绿假单胞菌的ERIC-PCR指纹图谱使用UPGMA法进行聚类分析,分为1型、2型和3型,使用噬菌体分型可分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ和Ⅵ群6个群.经Spearman等级相关分析,铜绿假单胞菌ERIC-PCR分型与6种噬菌体分型无显著相关性(r=-0.055,P>0.05). 结论 细菌ERIC-PCR分型较噬菌体分型分辨率低,因此在细菌同源性分析时应结合多种分型技术分析菌株的遗传进化关系.
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宋内志贺菌食物中毒分离株型别分析
志贺菌传统分型方法主要是生化鉴定、血清学和噬菌体分型等,由于志贺菌的血清型别与部分大肠埃希菌存在交叉凝集,因此,无法体现暴发菌株间的遗传信息.为了探讨用于细菌性传染病监测、传染源追踪、传播途径调查和识别等暴发调查的适宜技术,本研究采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)方法[1],对1起由宋内志贺菌引起幼儿园食物中毒中的菌株进行了分子流行病学分析.现将结果报告如下.
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江苏省伤寒沙门菌噬菌体分型与耐药性监测报告
伤寒是我省常见和重点控制的肠道传染病.为掌握伤寒流行规律,为伤寒防治提供依据,我们在省内设立监测点开展了伤寒病原学噬菌体分型及耐药性监测.现将1995~2000年结果报告如下.
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广州市健康人群携带的沙门菌噬菌体分型
沙门菌是引起食物中毒的重要致病菌之一,健康人携带的沙门菌是潜在的传染源.随着科学技术的发展,细菌学分型技术已不能满足传染源追踪和流行病学调查的需要.自1938年Craigie和颜春晖首先报道用Vi噬菌体进行伤寒沙门菌的分型以来,噬菌体的诊断及分型技术得到广泛的应用.国内有关从病人中分离的伤寒及鼠伤寒沙门菌的噬菌体分型的报道较多[1~5],但对健康人携带的多种血清型沙门菌的噬菌体分型较少见.我们于2000年8月~2001年7月对广州市健康体检从业人员中分离的沙门菌进行噬菌体分型.现将结果报告如下.
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温州市1999年霍乱病原学鉴定报告
1999年本实验室收到各县(市)站上送霍乱弧菌菌株共133株,其中O139群霍乱弧菌122株,小川型霍乱弧菌11株.经血清学、噬菌体弃去生物分型及药敏试验,结果发现:今年的噬菌体分型与药敏试验有新的动向.现报告如下.
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江苏省常见噬菌体型伤寒沙门氏菌的分子流行病学研究
选择3组随机引物,利用随机扩增多态性DNA技术,对江苏省1988~1997年分离到的72株分属于M1、D2、E1和D1噬菌体型的伤寒菌株进行分子流行病学研究.综合3组引物扩增的结果分析,26株M1型噬菌体型的伤寒菌呈7个基因型,其中1988~1991年分离到的14株菌表现为7个基因型,M1型菌株在长期的进化过程中,产生了许多基因型,造成了80年代末和90年代初江苏省大范围的伤寒高强度流行,1992年后M1型菌株的基因型趋于同一化,伤寒疫情也逐步呈下降趋势;D2型菌株基因型保持较强的稳定性;E1型和D1型伤寒菌随时间的变迁,其基因型也随着改变.
关键词: 伤寒沙门氏菌 噬菌体分型 随机扩增多态性DNA -
辽宁省鼠伤寒沙门氏菌噬菌体分型及耐药谱监测
辽宁省自1988年以来从不同地区、不同来源标本中分离到151株鼠伤寒沙门氏菌,可分为14个噬茵体型,分型率为97.35%.其中4774为我省优势噬菌体型,占暴发株的57.80%.151株鼠伤寒沙门氏菌耐药谱复杂,所有菌株均呈三耐以上.
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多重PCR系统的建立及其在社区型甲氧西林耐药性金黄色葡萄球菌中PVL噬菌体分型中的应用
从基因组型和表型两方面解析从医院环境中分离出的社区型甲氧西林耐药性金黄色葡萄球菌( MRSA),对携带杀白细胞素(PVL)基因的MRSA中的PVL溶原噬菌体进行分型.方法 聚合酶链式反应(PCR)解析菌株所携带的SCCmec基因岛型及PVL毒素基因;凝固酶试验测定菌株的凝固酶型;设计8组PCR反应组合检测PVL溶原噬菌体型.结果 36株菌株所携带的SCCmec基因岛分型多样化.携带Ⅳc型SCCmec的菌株占多数,为16株(44.4%),其次为携带Ⅱ型SCCmec的菌株,为10株(27.8%).各菌株所携带的SCCmec型别与菌株的凝固酶分型高度一致.经多重PCR检测,6株PVL阳性菌株所携带的PVL噬菌体型分别为φ108PVL型(3株),φ2958PVL型(1株)和φSa2mw型(2株).结论 院内分离的社区型MRSA的基因型和表型多样化,PVL噬菌体分型的多重PCR系统具有可应用性,应用此系统对鉴别具有异构六角形头部和伸长形头部的PVL溶原噬菌体有意义.
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小儿伤寒50例临床分析
近年来,本地区小儿伤寒发病率有所上升,尤其是在近郊农村出现一定规模的流行.自1994年5月至1998年10月,我院共收治小儿伤寒50例,经Vi抗原噬菌体分型,M1菌株占92%,其它菌株(E1、D1等)占8%,出现了较严重的并发症,现报告如下.
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江苏省伤寒病原菌、耐药性及噬菌体分型研究
目的:开展对伤寒病原学和耐药性监测以及伤寒噬菌体的分型研究,摸清伤寒流行规律,为制定防治措施提供依据.方法:伤寒沙门菌分型用血清凝集法;药敏试验用WHO推荐的改良K-B法;噬菌体分型用96型伤寒Vi-Ⅱ型噬菌体分型法.结果:血清学分型为:伤寒、副伤寒甲、副伤寒乙分别占75.1%、12.2%、0.9%,其他型占11.8%.561株伤寒杆菌噬菌体分型率为81.3%,分出25个噬菌体型,其中以D1型、M1型、D2、型、J1型、E1型为主要流行型,分别占18.6%、15.6%、15.4%、12.7%和11.0%.另外,E4、K3和32型在国内和省内为首次报道.不同年份、不同流行地区分型率以及强势噬菌体型分布不同.对磺胺甲基异噁唑、红霉素伤寒耐药菌株分别占96.5%、89.5%;而甲型副伤寒100.0%为耐药株.对复方新诺明伤寒、甲型副伤寒杆菌耐药株分别占79.4%、58.3%.M1型多重耐药现象依然严重.结论:疫情强度与强势流行株及强势株的耐药有关;伤寒沙门菌对多粘菌素B、丁胺卡那、庆大霉素、氯霉素、诺氟沙星、氧氟沙星、头孢他定药物敏感,其结果可供临床治疗与现场防治用药参考.
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湖州地区伤寒杆菌耐药性监测及噬菌体分型
目的了解湖州地区伤寒杆菌对抗菌药物的耐药状况、噬菌体型别分布及对β-内酰胺类抗生素的耐药机制.方法对1987~1999年湖州市中心医院和湖州市防疫站分离的766株伤寒杆菌进行了耐药性监测,对1987~1988年(33株)和1998~1999年(43株)伤寒杆菌进行噬菌体分型及对1999年30株伤寒杆菌进行超广谱β-内酰胺酶检测.结果湖州地区1998~1999年与1987~1988年流行的伤寒杆菌噬菌体型别大体相同,主要为M1、A、E1、D1、D7型;但M1型菌检出率明显下降(x2=5.20,P<0.05),并出现两种新的型别(D9型及M4型).伤寒杆菌对氯霉素的敏感率从1990年起已恢复至90%以上,但新近发现的5株多重耐药伤寒杆菌对包括第三代头孢菌素在内的多种抗菌药物均有不同程度的耐药,均为M1型菌株,产超广谱β-内酰胺酶.结论湖州地区伤寒杆菌流行菌株主要为M1、A、E1、D1、D7型,氯霉素仍为治疗伤寒的敏感药物.M1型菌株与多重耐药性密切相关,其对β-内酰胺酶类抗生素的耐药机制可能为产生超广谱β-内酰胺酶.
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铜绿假单胞菌分型方法研究进展
铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)为人类条件致病菌,尤其在医院内感染中占重要地位,特别是耐药PA的增加使临床治疗日趋困难.长期以来因外源性感染PA所致的院内感染是医院感染控制的棘手问题.对PA进行分型研究是临床进行流行病学调查的重要手段,也为切断传染途径、控制院内感染暴发流行提供了科学依据,对PA的分型方法既有表型分型方法如血清学分型、抗菌谱分型、噬菌体分型、生物分型、绿脓素分型等.
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噬菌体分型技术和脉冲场凝胶电泳技术对肠炎沙门菌分型的比较
目的:比较噬菌体分型技术和脉冲场凝胶电泳(PFGE)技术对肠炎沙门菌分型的分辨力.方法:对从病人及食物分离出的83株肠炎沙门菌,用9种沙门菌噬菌体进行分型,以XbaI作为限制性内切酶进行PFGE分型.结果:噬菌体将83株肠炎沙门菌分为4种型,PFGE将83株肠炎沙门菌分为19种型.同种噬菌体型的肠炎沙门菌用PFGE可分出更多的型.结论:在肠炎沙门菌的分型上,PFGE比噬菌体分型显示了更高的分辨力,PFGE技术仍然是目前肠炎沙门菌分型的"金标准",它更适合于食物中毒的分子流行病学调查.
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金黄色葡萄球菌的定量耐药谱分型
我们对临床分离的144株金黄色葡萄球菌作了定量耐药谱分型和噬菌体分型.将相似性系数E引入菌株相似性分析,大大提高了耐药谱分型的辨别力和重复性.我们还采用Hunter介绍的辨别力指数D来评价方法的辨别力,使辨别力数字化.噬菌体分型除采用国际通用基本分型噬菌体外,还首次将国际中心新建立的一套10个MRSA分型噬菌体用于我国临床菌株分型.试验表明,定量耐药谱分型的分型率高(100%),重复性好(98.3%),辨别力强(0.988),且方法简便,是金葡菌流行病学分型的有效方法.而噬菌体分型的分型率较低,为63.2%,有必要继续改进分型噬菌体.
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我国12省区845株伤寒杆菌不同噬菌体型耐药性研究
为较面全面监测我国伤寒菌的耐药性,1995年~1998年,我们在伤寒噬菌体分型监测的基础上,对来自我国12省区的845株伤寒杆菌(28个噬菌体型)进行了15种抗菌药物的耐药性研究,现将结果报告如下:1 材料与方法1.1 菌株来源:分别来自江西、河南、江苏、湖北和浙江等12省区110个县区的伤寒患者,带菌者的血、大便、外环境及蝇体标本,其中500余株是由北京流研所基因工程室收集提供.全部菌种均在本实验室做血清鉴定后转种鸡蛋斜面备用.
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大肠杆菌O157∶H7的噬菌体分型
目的 探讨江苏省大肠杆菌O157∶H7菌株的噬菌体型别分布及菌株之间的同源性.方法 应用大肠杆菌分型噬菌体对87株O157∶H7分离株进行噬菌体裂解试验,通过其裂解模式进行噬菌体分型.结果 87株O157∶H7可分为11个噬菌体型别,其中37/12型多,占35.63%.同一时期同一地区的临床病人、宿主动物和食品分离株有相同的噬菌体型别(36/12和36/10),来自不同地区的宿主动物分离株有相同的噬菌体型别.结论 同种噬菌体型别的O157∶H7在本省不同地区的宿主动物间水平传播,本省O157∶H7感染病人可能是因食用被该病原体污染的食物或通过直接接触宿主动物而感染.
关键词: 大肠杆菌O157∶H7 噬菌体分型 同源性分析 -
71例小儿化脓性颈淋巴结炎病原菌的研究
71例小儿化脓性颈淋巴结炎脓培养发现,金黄色葡萄球菌(以下简称金葡菌)占83.1%,链球菌占8.5%;93.8%的金葡菌产生β-内酰胺酶;对青霉素、氨苄青霉素耐药率高,分别为91.5%、93.0%,对万古霉素、妥布霉素全部敏感.联用噬菌体分型、质粒DNA分析结果提示:能为29型噬菌体裂解的金葡菌是本地小儿颈淋巴结炎的流行株;鼻腔、貌似正常的湿疹皮肤是金葡菌定植入侵,造成感染的门户;正确使用糖皮质激素和抗生素既可减少颈淋巴结炎发生,又可减少耐药质粒传播.