065南非钩藤中的环烯醚萜苷和苯乙烷苷及其体外抑制白细胞弹性蛋白酶的活性

281 日本厚朴中的厚朴酚与和厚朴酚体外抑制人纤维肉瘤HT-1080侵袭

胃康舒宁对胃癌细胞株体外生长及细胞周期的影响

目的:观察中药复方胃康舒宁对胃癌细胞株SGC-7901体外生长情况及细胞周期的影响.方法:以胃康舒宁200,400,800 mg·L-1作用细胞24,48,72,96 h后,采用四甲基偶氮唑盐法(MTT)和流式细胞仪方法检测细胞抑制率和细胞周期各时相比率变化.结果:与空白对照组相比,胃康舒宁各组细胞抑制率明显升高(P＜0.05),其中G0/G1期细胞周期比率明显升高(P＜0.05).结论:胃康舒宁能体外抑制胃癌细胞的生长,且能将细胞周期阻滞在G0/G1期.

黄芩苷脂质体的制备及体外抗肿瘤作用

目的:制备黄芩苷脂质体,考察其在体外对肝癌HepG2凋亡的影响.方法:以包封率为主要指标,对制备方法、处方组成进行了考察,筛选佳处方工艺,考察脂质体的形态、稳定性等理化性质,并考察对肝癌HepG2凋亡的影响.结果:脂质体在电镜下呈类圆形,在冷藏条件下较稳定,采用薄膜分散法制备包封率为(34.62±0.89)％.细胞凋亡率与制剂的剂量和作用时间呈正相关.结论:薄膜分散法制备黄芩苷脂质体简便易行,该制剂对HepG2细胞有明显的体外抑制作用.

拉米夫定联合原儿茶酸对鸭乙肝病毒的体外抑制

目的:研究原儿茶酸(PA)、拉米夫定( 3TC)单用以及联合对鸭HBV(DHBV)感染、复制不同时期的影响.方法:利用感染DHBV的鸭原代肝细胞模型,从病毒感染的不同时期研究PA、3TC单用及合用的抗病毒效果.结果:PA、3TC单用及其合用,分别于DHBV感染前,感染的同时及感染后给药,均可有效抑制DHBV对鸭原代肝细胞的感染.虽然PA与3TC合用对DHBV的预防与阻断作用与单用3TC相比没有显著差异,但对DHBV的吸附与进入,感染活性与复制能力,以及肝细胞中AST,ALT酶活的抑制能力均显著强于单用3TC组.结论:PA与3TC药物组合不仅有比二者单用更强的抗DHBV作用,而且对DHBV所致鸭原代肝细胞损伤也有更强的保护作用.

金丝桃苷对人P450同工酶的体外抑制实验及大鼠灌胃给药后尿样中代谢产物的初步分析

目的:研究金丝桃苷对人P450同工酶的体外抑制作用和大鼠灌胃给药后尿样中的代谢产物.方法:采用高通量P450酶抑制剂筛选试剂盒测定了金丝桃苷对P450同工酶CYP1A2、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6和CYP3A4的体外抑制活性.大鼠灌胃给予金丝桃苷(500mg/kg)后收集0-12h内的尿样,经固相萃取法预处理后,采用LC-MS分析尿样,推断代谢产物.结果:金丝桃苷抑制5种P450同工酶的IC50均＞10 μ mol/L.大鼠口服金丝桃苷后,从尿里检测到原型药物和至少9种代谢产物,表明甲基化、硫酸化、葡萄糖醛酸化是金丝桃苷在体内的主要代谢途径.结论:金丝桃苷对5种P450同工酶基本没有抑制作用.金丝桃苷在大鼠体内广泛代谢,形成多种代谢产物.

常用中藏药体外抗结核分枝杆菌的筛选实验

结核病是由结核分枝杆菌引起的传染病,目前结核病在全球呈上升趋势.造成这种状况原因有多方面,但主要是由于结核分杆菌对常用抗结核药形成了抗药性.近几年,应用传统中药治疗结核病和体外抑制结核菌作用的研究取得了较大的进展,为了找出抗结核活性较强的天然药,本研究对常用中草药、藏药以及部分有关化合物共277种(不同品种或不同提取部位)药物进行体外抗结核分枝杆菌ATCC 27294试验.

靶向survivin的siRNA对肝癌细胞生物学行为的影响

目的:探讨转入靶向survivin的siRNA对肝癌细胞生物学行为的影响.方法:设计、合成一对survivin编码基因的反向重复序列,中间间隔9个核苷酸序列,通过定向克隆至载体PSilencer2.1,构建siRNA真核表达载体,经稳定转染HepG2细胞后对转基因后肿瘤细胞的生物学行为进行观察.结果:测序证实siRNA真核表达载体构建成功.通过RTPCR及流式细胞术检测,siRNA在mRNA及蛋白质水平抑制survivin基因表达分别达73%和75%.转染细胞生长速度明显减慢,凋亡率增加15倍.裸鼠体内成瘤率下降75%,9-30 d肿瘤体积分别为0.10±0.01 cm3,0.30±0.03 cm3,0.39±0.11 cm3,0.45±0.13 cm3,0.49±0.07 cm3,0.58±0.01 cm3,0.60±0.10 cm3,0.65±0.07 cm3,与对照组相比差异显著(P＜0.01).结论:靶向survivin的siRNA能有效降低目的基因的表达并能在体内体外抑制肝癌细胞株HepG2的生长.为进一步逆转肿瘤细胞的耐药性提供了理论指导.

肺表面活性物质对发作期支气管哮喘患者T淋巴细胞CD69的影响

支气管哮喘(简称哮喘)是一种慢性气道炎症,其中CD +4 T淋巴细胞异常活化起关键作用[1].研究表明[2, 3],哮喘发作时气道中的肺表面活性物质(PS)存在量和功能的异常,从而加重气道阻塞,而外源性补充PS可明显减轻症状.另有学者发现[4],PS的蛋白成分能在体外抑制哮喘患儿的淋巴细胞增殖,提示PS可能通过抑制T淋巴细胞活化而改善哮喘气道炎症,目前国内、外尚无定论.我们的研究拟通过测定PS干预前、后T淋巴细胞活化表达CD69的变化,探讨哮喘发病机制和新的治疗途径.

商陆抗病毒蛋白体外抑制乙型肝炎病毒复制的研究

商陆抗病毒蛋白(pokeweed antiviral protein,PAP)是从美洲商陆种子或叶子中提取的一种碱性蛋白,具有抑制流感病毒、脊髓灰质炎病毒、疱疹病毒、巨细胞病毒、HIV等多种病毒复制的作用.我们先前的研究发现:天然PAP种子体外直接作用于HepG2.2.15细胞,显示有较强的抗HBV作用,但在高剂量时对细胞有一定毒性[1].本研究旨在探讨PAP真核表达质粒体外对HBV的抑制作用.

Alphastatin体外抑制血管内皮细胞血管生成的实验研究

血管新生(angiogenesis)是肿瘤生长和转移过程中一个非常重要的阶段.研究表明,当肿瘤大小超过1～2 mm3时,其继续生长和转移则依赖于新血管的形成[1].抗肿瘤血管生成制剂可以阻断瘤体血供,有效地抑制肿瘤生长、转移和复发.目前,多种血管生成抑制剂相继被发现,研究证实具有良好的效果.2004年Staton等[1]首次研究发现人纤维蛋白原α链末端的24个氨基酸片段具有抑制体外血管生成和鼠源性肿瘤血管生成的作用,他们将其命名为alphastatin [2].本研究中,我们在体外模拟血管生成,探讨了alphastatin对人血管内皮细胞的作用,为进一步抗人源性肿瘤实验提供了依据.

番石榴叶总黄酮对MDA-MB231体外抗肿瘤效应及细胞凋亡的诱导作用

目的：研究番石榴《总黄酮对MDA-MB231肿瘤细胞体外抑制及细胞凋亡的诱导作用。方法以番石榴《总黄酮为原料,采用体外细胞培养方法,MTT法检测其对MDA-MB231肿瘤细胞株的生长抑制率,流式细胞仪检测总黄酮作用下肿瘤细胞的凋亡率。结果番石榴《总黄酮对MDA-MB231肿瘤细胞株的生长具有较强的抑制作用。总黄酮对肿瘤细胞的IC50为270μg/ml,根据番石榴总黄酮的不同给药剂量逐渐变化,测得的细胞凋亡率也呈现逐步变化过程,数值分别为2.0%、15.7%、22.1%、26.2%。结论番石榴《总黄酮醇在体外可显著抑制MDA-MB231肿瘤细胞株的生长,有效抑制细胞的增殖作用,可能与其对细胞的凋亡机制的调控有关。

012抗组合帽猴ZP1和ZP3糖蛋白表位嵌合肽抗体能体外抑制人精-卵结合

透明带(ZP)糖蛋白的组织特异性和在哺乳动物受精期间至关重要的作用,因而一直是研制避孕疫苗潜在的候选抗原.但用ZP蛋白主动免疫实现的避孕效果总是出现卵巢功能障碍问题,因此近年来许多研究开始尝试用ZP合成肽作为免疫原,以克服对卵巢严重的副反应.但是已有研究表明仅含单一表位的ZP3合成肽疫苗,其避孕效果都是不完全的.

芦荟含药血清对内毒素的体外抑制作用

芦荟为百合科芦荟属多年生肉质草本植物,其种和变种共有500多种.主要的药用芦荟有库拉索芦荟Aloe vera L.、好望角芦荟A.ferox Miller、索科特芦荟A.socotrina Lam.和芦荟A. vera L.var.chinensis(Haw.)Berger.芦荟作为中药被应用已近千年,具有致泻、抗菌、抗炎、保肝、抗肿瘤、抗组织损伤等作用.本实验通过含药血清与内毒素体外作用后测定内毒素残留量观察芦荟体外抑制内毒素的作用.

新雪颗粒体外抑制呼吸道合胞病毒作用研究

呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)是婴幼儿和低龄儿童急性上下呼吸道感染的常见病原微生物.几乎所有2岁以下儿童都有过RSV感染,尤其是以1～3个月的婴儿为重[1].到目前为止,对RSV的治疗仍无安全有效的药物,虽然许多研究已有了一定进展[2].新雪颗粒作为治疗呼吸系统疾病的常用中成药,主要成分为穿心莲、竹叶卷心、牛黄、栀子、石膏、升麻等,有清热解毒之功效,常用于普通感冒、流行性感冒、上呼吸道感染、支气管炎、肺炎、病毒性肺炎等疾病的消炎、退热.为此,本实验采用人喉上皮细胞癌细胞系(HeP-2),通过不同的给药途径,研究新雪颗粒对RSV的治疗、预防和直接杀伤作用.

HPLC法同时测定防己药材中防己诺林碱和粉防己碱

防己为防己科粉防己Stephania tetrandra S.Moore的干燥根,粉防己根中含有粉防己碱、防己诺林碱、轮环藤酚碱等成分,具有解热镇痛、风湿止痛、利尿消肿之功效[1].其中粉防己碱(TET)和防己诺林碱(FAN)是其主要活性成分,TET能够有效抑制由胶原、凝血酶、肾上腺素等引起的血小板聚集,FAN能够在体外抑制组胺的释放.因此,以粉防己碱和防己诺林碱的量来作为防己药材的质量控制指标具有十分重要的意义.

四嗪二甲酰胺体外抑制HL-60细胞增殖诱导凋亡分化作用研究

我们曾研究了四嗪二甲酰胺(ZGDHu-1)体外对急性单核细胞白血病细胞株SHI-1的作用[1].为了进一步研究ZGDHu-1抗白血病的作用,我们以HL-60细胞为模型,体外观察了ZGDHu-1对HL-60细胞增殖抑制、诱导凋亡及诱导分化的作用,并探讨其作用的分子机制.

C-末端缺陷JAKs在JAKs表达和活化及淋巴细胞白血病细胞生长中的作用

JAKs(Janus kinases/Just another kinases)是由相对分子质量(120～135)×103的JAK1、JAK2、JAK3、TYK2四个成员构成的一个家族,属于非受体型酪氨酸蛋白激酶.它可由细胞因子诱导的细胞因子受体复合物活化.作为细胞因子受体介导的信号传导途径中的重要信号分子,广泛参与机体造血和免疫细胞的生长发育、分化成熟及功能维持[1].并与多种疾病密切相关,如在炎症、过敏反应、免疫缺陷、心肌肥大、病毒感染、损伤休克、GVHD、肿瘤(特别是血液系统肿瘤)等中已发现有JAKs家族不同成员的异常表达和活化[2,3].因此,从信号传导途径治疗疾病近年来引起了人们的广泛关注[4].体外的实验表明,用JAKs的化学抑制剂,如AG-490、WHI-P131、154等在体外抑制白血病细胞株异常表达和活化JAKs后,均可有效抑制白血病细胞株的增殖并诱导调亡[5].但是由于不同的疾病异常表达和活化的JAKs不同,而这些化学抑制剂特异性差,对正常的免疫和造血细胞的生长、分化及功能也有影响,体内应用对机体存在较大的潜在威胁,因此有必要寻找一种特异的JAKs抑制剂.

人参酸性多糖体外抑制牙龈卟啉单胞菌粘附红细胞的作用

牙龈卟啉单胞菌Porphyromonas gingivalis为牙周炎的主要致病菌.以往研究表明,人参和茵陈蒿叶中的酸性多糖明显抑制幽门螺杆菌(HP)对宿主细胞的粘附.作者研究了人参和茵陈蒿酸性多糖抗牙龈卟啉单胞菌粘附红细胞的作用.

OPG治疗代谢性骨病的研究进展

骨保护素或护骨素(osteoprotegerin,OPG),从1997年发现以来,引起了许多学者的关注.作为OPG/RANK/RANKL系统成员之一,OPG在体外抑制破骨细胞前体细胞的分化、存活、融合,阻止成熟破骨细胞的活化并引起破骨细胞凋亡.骨是动态的组织,通过破骨细胞(OC)的骨吸收和成骨细胞(OB)的骨形成的平衡与协作进行骨改建.OC和OB功能的不平衡可导致以骨质增加(骨硬化症)或骨质减少(骨质疏松)为特征的骨骼畸形.随着研究的深入,OPG在治疗骨代谢性疾病和血管钙化中的价值受到研究者们高度重视,并在其他方面取得许多成果,现就相关研究进展综述如下.