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比例法测定结核菌药敏试验中菌液浓度的研究
为了探讨比例法测定结核菌药敏试验中结核菌悬液的佳实验浓度,采用国际推行的比例法,用10-2 mg/ml、10-3 mg/ml、10-4 mg/ml、10-5 mg/ml、10-6 mg/ml,5个浓度进行试验,并与国际推行的比例法进行比较.结果用10-2 mg/ml、10-4 mg/ml、接种培养基,其药敏试验结果成功率高;基础培养基上结核菌生长良好,便于结果判断;结果报告及时;与国际推行的比例法进行相比较,药敏试验结果差异性不显著(P＞0.05).试验结果表明,比例法测定结核菌药敏试验时,佳菌液浓度是10-2 mg/ml、10-4 mg/ml.
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用鸡血代替羊血制作血平板
微生物学试验离不开培养基[1]的制备.根据培养的细菌种类和培养的目的不同,可配置不同种类的培养基:如基础培养基、营养培养基、鉴别培养基等.
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幽门螺杆菌感染BALB/c小鼠模型的研究
随着对幽门螺杆菌(H.pylori)疫苗、致病机理、药物筛选等方面研究的深入，人们越来越多地需用动物模型。我们用含有cagA和vagA基因阳性的Hp株sydney strain1(SS1)感染BALB/c小鼠，作Hp慢性感染小鼠的动物模型，试验用空肠弯曲菌琼脂基础培养基培养，微需氧条件下37℃培养3～5?d。SPF级BALB/c小鼠40只，雌性，7～8周龄，重17～20克，分实验组、对照组。实验组动物模型灌喂H.pylori菌液，0.4ml/只(每ml约含Hp 109条)，连续5次，10?d完成，对照组动物则不作相应处理。
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第三相蛋白分离结合水平双相凝胶电泳对福赛类杆菌蛋白分离影响的研究
福赛类杆菌菌株(Bacteroides forsythus ATCC43037)在以TSB为基础培养基中加入酵母提取物,氯化血红素,维生素K3,DTT及NAM,37℃厌氧(80% N2,10% H2,10% CO2)培养7 d,超声波破碎细胞,然后用ReadyPrep TM Sequential Extraction试剂盒按说明书对超声破碎细菌全细胞蛋白进行分步系列提取.
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乙肝治疗性可复制型DNA疫苗pSVK-HBVA高稳定宿主菌的筛选及其基础培养基的选择
目的 为乙肝治疗性可复制型DNA疫苗质粒pSVK-HBVA筛选稳定性高,能多次传代的宿主菌,以满足中试工艺的要求,同时对该工程菌适的基础发酵培养基进行选择.方法 将质粒pSVK-HBVA分别转化几种不同的大肠杆菌感受态细胞并提取质粒,通过琼脂糖凝胶电泳检测质粒的形态结构,连续传代法对工程菌的稳定性进行检测;选取质粒含量高和稳定性好的工程菌作为原始种子,按照2010版<中国药典>要求建立工程菌的三级种子批,并对种子批进行鉴定.同时,从LB,TB,M9(甘油),M9(葡萄糖)4种培养基中为工程菌筛选质粒产量高的基础发酵培养基.结果 经过筛选发现,在以大肠杆菌XL10-Gold为宿主菌时,质粒pSVK-HBVA表现出了同常规质粒DNA类似的稳定性,转接传代30次也未发生重组或片段丢失,能满足后续中试工艺的要求,LB作为基础培养基能得到高的质粒容积产率为5.5 mg/L.结论 大肠杆菌XL10-Gold是一个更利于可复制型DNA疫苗质粒pSVK-HBVA扩增的宿主菌,该工程菌发酵的佳基础培养基是LB培养基.
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沙培林腹腔灌注治疗恶性腹水的护理
沙培林是将人源A组溶血性链球菌在Berubeimer基础培养基中培养并经青霉素G在45 ℃热处理后制成的白色冻干粉剂,主要用于恶性胸、腹水的非特异性免疫治疗.
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DOE法优化筛选表达胰高血糖素样肽-1融合蛋白的CHO细胞用培养基
目的 运用实验设计(Design of Experiment,DOE)方法优化筛选表达胰高血糖素样肽-1(glucagon-like peptide-1,GLP-1)融合蛋白的CHO细胞用培养基,以提高细胞生长密度及目的 蛋白表达量.方法 采用Minitab软件对实验进行DOE优化筛选.考察不同基础培养基、流加培养基及其策略优化对CHO活细胞密度(viable cell density,VCD)与GLP-1融合蛋白表达的影响,确定适培养基组合.结果 从15种基础培养基中筛选出3组基础培养基,从5种流加培养基中筛出1种流加培养基,并在此基础上优化了相关流加补料策略.经适培养基组合验证,试验组CHO细胞的VCD高为(19.90±0.78)×106个/mL,对照组高为(14.30±0.60)×106个/mL;试验组GLP-1融合蛋白表达高为2.51g/L,对照组小于1.51 g/L,目的蛋白表达量优化后较优化前提高了80％以上.结论 优化后的培养基组合显著提高了CHO细胞生长密度及目的蛋白产量,DOE方法是一种短期快速提高蛋白表达的有效方法.
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复方野山蚁口服液对果蝇寿命的影响
目的:研究复方野山蚁口服液对果蝇寿命影响方法:果蝇的卵、幼虫、蛹、成虫均培养在25±1℃和相对湿度60%-70%的柱形玻璃小室中,每室容积约60cm.按不同性别、组别分室饲养,每室饲养25～30只.收集10h内羽化的成虫,用乙醚浅度麻醉后分出雌雄,在基础培养基中饲养,设空白对照组、复方野山蚁口服液低浓度组(0.5%)、中浓度组(1%)、高浓度组(3%)及阳性对照(首乌片)组(1%).以上药物浓度均为每100克培养基所含复方野山蚁口服液原生药或首乌片的克数.每4天更换一次培养基,每天定时记录死亡数,直到全部死亡.以平均寿命和高寿命为指标,用t检验两两对比,评价所试药物的延寿时间.
