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白芍提取物对PMS肝气郁证大鼠下丘脑Cav1.2介导的CaM/CaMK Ⅱ/BDNF信号通路的影响
目的:本文主要探讨白芍提取物对PMS肝气郁证大鼠下丘脑Cav1.2钙通道关键蛋白CACNA1C及其下游信号通路中CaM、BDNF蛋白表达和对CaMK Ⅱ磷酸化的影响,从而明确白芍提取物治疗肝气郁结证的分子作用靶点.方法:利用慢性束缚应激法制备PMS肝气郁证大鼠模型,使用白芍提取物进行药物干预.模型制备成功后检测下丘脑CACNA1C蛋白表达,以及下游信号通路中CaM、BDNF蛋白表达和CaMK Ⅱ的磷酸化水平.离体培养海马原代神经元,通过KCl激活L型钙通道,检测白芍提取物中的有效成分单体芍药苷对细胞内钙超载的影响.结果:PMS肝气郁证大鼠下丘脑CACNA1C蛋白表达增加,CaMK Ⅱ磷酸化水平提高,BDNF表达减少,说明白芍提取物可显著改善上述蛋白表达异常的现象,抑制KCl激活的L型钙通道引起的细胞内钙离子浓度的增加.结论:白芍提取物可能是通过调控细胞内Cav1.2,抑制其下游CaM/CaMK Ⅱ信号通路的活化发挥治疗PMS肝气郁证的作用.
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白芍提取物对经前期综合征肝气郁证模型大鼠额叶5-HT3A/3BR分布与蛋白表达的影响
目的:本研究就5-羟色胺3受体(5-HT3R)水平探讨白芍提取物(Radix Paeoniae Alba Extract,RPAE)干预经前期综合征(Premenstrual Syndrome,PMS)肝气郁证抑郁情绪的分子作用机制.方法:复制PMS肝气郁证大鼠模型,用白芍提取物进行药物干预,采用免疫荧光技术和蛋白印迹技术(western blot)分别检测5-HT3AR和5-HT3BR在大鼠脑内的分布和蛋白表达情况.结果:5-HT3AR和5-HT3BR在各组大鼠额叶均有阳性表达;与正常组大鼠相比,模型组大鼠额叶5-HT3AR、5-HT3BR蛋白表达水平均显著升高(P＜0.05);与模型组大鼠相比,白芍提取物组大鼠额叶5-HT3AR蛋白表达水平均显著下降(P＜0.05).结论:白芍提取物能够调控PMS抑郁症大鼠额叶5- HT3AR和5-HT 3BR蛋白表达,这可能是其干预PMS肝气郁证抑郁情绪的作用机制之一.
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白芍提取物抗抑郁及抗炎作用的研究
目的 研究白芍提取物对小鼠抗抑郁及抗炎作用的影响.方法 雄性昆明小鼠随机分为正常对照组、模型组、白芍提取物高剂量组[255 mg/(kg·d)]和白芍提取物低剂量组[95 mg/(kg·d)]、盐酸氟西汀组[3.033 mg/(kg·d)],其中利血平诱导的急性抑郁症实验,分组及给药方法同上,除正常对照组外,其余均腹腔注射利血平[5mg/(kg·d)],连续给药7 d,利用小鼠悬尾实验(TST)和小鼠强迫游泳实验(FST)评价药效;使用利血平拮抗实验评价对于中枢单胺神经功能的影响.用二甲苯致耳肿胀方法评价抗炎效果.结果 FST和TST中,白芍提取物高剂量组与模型组比较,相对不动时间明显缩短(P<0.05);在利血平拮抗实验中,白芍提取物低剂量组可拮抗利血平诱导的小鼠眼睑下垂、肛温下降和运动不能(P<0.05).抗炎实验结果显示白芍提取物低剂量组能显著改善小鼠耳肿胀炎症症状(P<0.05).结论 白芍提取物对小鼠有抗抑郁及抗炎作用,可能通过影响中枢单胺神经功能对抑郁及炎症进行调节.
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苯酚硫酸一步法测定白芍提取物中总糖含量
目的:建立白芍提取物中中总糖含量的测定方法.方法:通过单因素试验确定实验的大吸收波长,硫酸浓度,显色液用量,加热时间和显色时间.实验条件确定后,从加样回收率,重复性,线性和范围几方面进行方法学验证.同时,将优化后的方法与传统方法进行对比.结果:佳实验条件为:硫酸与水的体积比为5∶1；显色液体积为5 mL；加热时间为50min；显色时间为15 min.在佳实验条件下,葡萄糖标准溶液在0.019 ～0.189 mg线性关系良好,回归方程为y=7.488 X-0.000 2(R2=0.999 5).三个比例的加样回收率为102.00％,102.15％,95.86％,RSD分别为2.08％,1.51％,2.24％；6份样品的重复性RSD为2.4％.结论:该方法准确可靠,操作简单,也可用于其他中药提取物的质量控制.
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白芍提取物对小鼠改善睡眠的影响
目的 研究不同剂量白芍提取物对改善睡眠的影响.方法 各项实验所用动物均按体重随机分成 4 组,每组12只,设100、200、300mg/kgb.wt./d(分别相当于临床剂量的5倍、10倍,15倍) 3个白芍提取物剂量组和阴性对照组(蒸馏水).灌胃容积均为20ml/kg. wt,连续 30d.观察白芍提取物对小鼠改善睡眠作用.结果 白芍提取物在 30Omg/kg剂量时对戊巴比妥钠有协同作用 (P＜0.05).结论 白芍提取物具有改善睡眠作用.
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白芍提取物对小鼠改善睡眠的影响
目的 研究不同剂量白芍提取物对改善睡眠的影响.方法 各项实验所用动物均按体重随机分成 4 组,每组12只,设100、200、300mg/kgb.wt./d(分别相当于临床剂量的5倍、10倍,15倍) 3个白芍提取物剂量组和阴性对照组(蒸馏水).灌胃容积均为20ml/kg. wt,连续 30d.观察白芍提取物对小鼠改善睡眠作用.结果 白芍提取物在 30Omg/kg剂量时对戊巴比妥钠有协同作用 (P＜0.05).结论 白芍提取物具有改善睡眠作用.
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白芍提取物对大鼠海马原代培养神经元5-羟色胺3受体介导离子通道的影响
目的 探讨白芍提取物含药血清对原代培养海马神经元5-羟色胺3受体(5-HT3R)介导离子通道的影响.方法 采用孤养结合慢性温和刺激法复制抑郁情绪大鼠模型,并采用旷场实验和糖水偏好实验进行模型评价,以白芍提取物进行药物干预,制备大鼠含药血清,对原代培养的大鼠海马神经元干预24 h后,利用Western blotting法检测各组神经元细胞5-HT3AR、5-HT3BR蛋白表达,采用全细胞膜片钳技术检测各组神经元细胞5-HT3受体通道电流.结果 与对照组相比,模型组大鼠旷场实验总路程、糖水偏好率均显著性降低(P＜0.01);模型组大鼠血清孵育的海马神经元5-HT3AR、5-HT3BR蛋白表达量均显著性升高(P＜0.05),模型组大鼠血清孵育的海马神经元电流密度值明显增加(P＜0.05).与模型组相比,白芍提取物组和氟西汀组旷场实验总得分明显提高(P＜0.05),糖水偏好率均明显增加(P＜0.01);白芍提取物组和氟西汀组大鼠含药血清孵育的海马神经元5-HT3AR、5-HT3BR蛋白表达量显著性降低(P＜0.05、0.01、0.001);白芍提取物组和氟西汀组大鼠含药血清孵育的海马神经元电流密度值均明显减少(P＜0.01).结论 白芍提取物能改善抑郁情绪模型大鼠异常升高的5-HT3R离子通道电流,这可能是白芍发挥其抗抑郁情绪的中枢作用机制之一.
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HPLC-ESI-MSn法鉴定大鼠口服白芍提取物后血清及脑内的化学成分
目的 定性分析白芍提取物在大鼠血清及脑组织中的化学成分.方法 大鼠ig给予白芍提取物后,采集血液并分离脑组织部位,采用HPLC-ESI-MSn法检测入血及分布于脑组织中的化学成分.结果 通过相应保留时间和质谱数据,以及与文献资料及对照品比对,在大鼠含药血清中共检测到34个化学成分,其中8个为新代谢产物;在全脑组织中共检测到3个化学成分,其中1个为新代谢产物.结论 建立的HPLC-ESI-MSn方法有助于阐明白芍提取物抗抑郁作用的药效物质基础.
关键词： 白芍提取物 血清 脑 HPLC-ESI-MSn 代谢产物 -
白芍提取物通过多巴胺D2受体治疗大鼠高泌乳素血症
目的 研究白芍水提取物对高泌乳素血症大鼠及体外细胞的药效学作用.方法 注射盐酸甲氧氯普胺注射液制备高泌乳素血症大鼠,观察白芍提取物对模型大鼠血清泌乳素(PRL)、雌二醇(E2)、孕酮(P)、促卵泡激素(FSH)和黄体生成素(LH)水平的影响.研究白芍提取物对大鼠垂体瘤(MMQ)细胞、垂体腺瘤(GH3)细胞和嗜铬细胞瘤(PC12)细胞株的PRL分泌、多巴胺D2受体和多巴胺转运体(DAT)的影响.结果 与模型组比较,高[28.8 g/(kg·d)]、中剂量[14.4 g/(kg·d)]的白芍提取物能显著降低高泌乳素血症大鼠的PRL水平(P＜0.01).在给药24h后,与正常组比较,5 mg/mL和10 mg/mL的白芍提取物显著抑制了MMQ细胞PRL的分泌(P＜0.01),但并不影响缺乏多巴胺D2受体表达的GH3细胞PRL的分泌;4、8 mg/mL的白芍提取物显著增加了PC12细胞多巴胺D2受体和DAT的表达(P ＜0.05,P＜0.01).结论 白芍提取物介由多巴胺D2受体治疗高泌乳素血症,且疗效显著.
关键词： 白芍提取物 盐酸甲氧氯普胺注射液 大鼠 高泌乳素血症 多巴胺D2受体 -
白芍提取物对经前期综合征肝气逆证模型大鼠海马中雌激素β受体及5-羟色胺转运体的影响
目的 探讨白芍提取物对PMS肝气逆证模型大鼠中枢海马ERβ及其介导的5-HT能系统中SERT的影响.方法 筛选动情周期规律大鼠纳入实验,随机分为正常组、模型组、白芍提取物组、氟西汀组和ERβ激动剂组.采用电刺激复制PMS肝气逆证大鼠模型,给药5 d后,分离各组大鼠海马组织,采用RT-PCR法和免疫荧光组织化学法检测各组大鼠动情接受期和非接受期ERβ、SERT mRNA和蛋白表达.结果 动情接受期的各组大鼠间旷场行为学得分,以及海马中ERβ、SERT mRNA和蛋白表达差异均无显著性.动情非接受期:与正常组相比,模型组大鼠旷场实验总路程明显增加;海马中ERβmRNA表达明显降低,SERT mRNA表达明显升高;模型组大鼠海马CA1、CA3脑区ERβ阳性细胞数和蛋白表达下降,SERT阳性细胞数和蛋白表达均明显上调;给予白芍提取物后,上述指标均得到明显改善.结论 白芍提取物可能通过改善PMS肝气逆证大鼠海马区ERβ、SERT mRNA和蛋白的表达,发挥调节PMS肝气逆证负性情绪的作用.
