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基于16S rRNA的聚合酶链反应技术用于肺部感染患者痰标本中军团菌的检测
目的 建立实时荧光定量聚合酶链反应(real-time PCR)方法,检测肺部感染患者痰液中军团菌属特异性16S rRNA基因.方法 利用军团菌属特异性16S rRNA基因保守序列设计引物和探针,优化反应条件和反应体系,对嗜肺军团菌、非嗜肺军团菌及其他病原菌标准菌株进行检测,验证该方法的特异性和敏感性.对150例肺部感染患者痰液标本进行检测,阳性者对基因扩增产物测序作验证试验.结果 该方法检测军团菌属所有标准菌株均出现阳性信号,其他非军团菌属检测结果均为阴性,灵敏度为10 cfu/ml.150例肺部感染患者的痰液标本,经荧光定量PCR法检出军团菌阳性27例,阳性率为18.0％(27/150),经16S rRNA基因测序验证,阳性率为15.0％(22/150),经,检验二者差异无统计学意义(x2=3.2,P＞0.05),表明其较好的符合性和等效性.结论 realtime PCR法检测患者痰液标本中军团菌,具有快速、敏感、特异等特点,适用于临床军团菌感染调查及快速检测.
关键词： 实时荧光定量聚合酶链反应 军团菌属 痰液 -
四种检测方法用于上海市口岸管道水军团菌存在状况调查的研究
目的 比较传统的平板培养法、普通聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)、实时荧光定量PCR(realtime fluorescence quantitative PCR,real-time PCR)和荧光染料叠氮溴化乙锭(ethidium monoazide,EMA)结合荧光定量PCR的方法(EMA-荧光定量PCR)对管道水中军团菌的检测效果.方法 于2010年对上海市2个口岸管道水进行采样,共采集132份.分别采用传统的平板培养法、普通PCR、荧光定量PCR和EMA-荧光定量PCR对水样中军团菌进行定性和/或定量分析.结果 对132份管道水标本进行军团菌定性检测,平板培养法、普通PCR、荧光定量PCR和EMA-荧光定量PCR检出军团菌污染率分别为18.9％、20.5％、24.2％和24.2％.3种定量方法(平板培养法、荧光定量PCR和EMA-荧光定量PCR)对阳性标本中军团菌定量数值分别为50～ 1320菌落形成单位/升(cfu/L)、20～13 085基因单位/升(GU/L)和10～4480 GU/L.对于132份水样,3种方法对军团菌含量分析的定量数值大小差异有统计学意义(x2=193.6,P＜0.01),其中荧光定量PCR的定量数值高,EMA-荧光定量PCR的数值次之,平板培养的数值低.结论 上海市口岸管道水中军团菌污染率和含菌量高.荧光定量PCR和EMA-荧光定量PCR方法检测管道水中军团菌的灵敏度优于传统的培养方法,EMA-荧光定量PCR方法适合用于环境水体中军团菌活菌监测.
关键词： 军团菌 管道水 实时荧光定量聚合酶链反应 EMA-荧光定量PCR -
去甲二氢愈创木二酸对乳腺癌细胞系Erα和ERβmRNA表达水平的调节及对增殖的影响
目的 探讨植物雌激素木质素类物质去甲二氢愈创木二酸(NDGA)对乳腺癌细胞系MCF-7中雌激素受体(ER)α、 ERβ mRNA的调节作用,及对其增殖的影响,探讨木脂素类植物雌激素是否通过选择性ER调节剂的机制起作用.方法 培养乳腺癌细胞系MCF-7,用不同浓度NDGA处理细胞系3 d后,采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法,观察不同剂量NDGA对两种ER亚型表达的影响.结果 NDGA中等、较大剂量时对MCF-7细胞系的增殖有明显抑制作用.实时荧光定量PCR结果表明NDGA处理细胞系3 d后ERα表达先下降后上升,ERβ表达渐上升.结论 木脂素类植物雌激素NDGA明显抑制乳腺癌细胞系MCF-7的增殖,且能够改变其ER不同亚型的表达,ER表达趋势改变提示NDGA具有ER调节剂的作用.
关键词： 植物雌激素 木脂素 去甲二氢愈创木二酸 雌激素受体 实时荧光定量聚合酶链反应 -
实时荧光定量聚合酶链反应技术检测人早孕蜕膜和黄体中期子宫内膜白血病抑制因子的表达
目的探讨白血病抑制因子(LIF)在人早孕期子宫蜕膜和黄体期子宫内膜的表达情况. 方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)技术,对36例正常早孕子宫蜕膜和34例输卵管阻塞妇女黄体中期子宫内膜进行LIF定量检测. 结果黄体中期子宫内膜LIF表达量高于早孕期子宫蜕膜组织,表达中位数(M)分别为240.00和46.50 ng/L.两组比较差异有显著性(P<0.01). 结论 LIF基因在黄体中期(胚泡着床期)子宫内膜表达量较高, 在早孕期子宫蜕膜表达量较低,提示黄体中期和早孕期LIF基因表达量的差异与胚泡着床和妊娠维持的不同生理阶段有关.
关键词： 子宫内膜 白血病抑制因子 早孕期 黄体中期 实时荧光定量聚合酶链反应 -
巨细胞病毒IgG阳性育龄妇女体液阳性情况研究
目的:比较巨细胞病毒(CMV) IgG阳性育龄妇女外周血、尿液、阴道分泌物及乳汁中CMV排出情况,并探讨妊娠与体液排毒之间的关系.方法:应用酶联免疫吸附测定法对1 063例血清进行CMV IgG检测,阳性756例.对其中422例CMV IgG阳性的育龄妇女,应用实时荧光定量聚合酶链反应技术同时检测外周血白细胞、尿液、阴道分泌物中CMV DNA含量.22例孕妇随访至分娩,检测其乳汁中CMV排出情况.结果:422例CMV IgG阳性的育龄妇女中外周血白细胞、尿液、阴道分泌物CMV DNA检测的阳性率(1.4％、6.4％、13.7％)差异有统计学意义(x2=48.615,P＜0.01).未妊娠妇女组、早期妊娠妇女组、中晚期妊娠妇女组分泌物CMV DNA阳性率(11.0％、14.4％、26.7％)差异有统计学意义(x2=7.919,P=0.019).随访的22例CMV IgG阳性孕妇有10例产后乳汁中检测出CMV DNA,阳性率为45.5％；孕期体液有CMV排出的孕妇分娩后乳汁中CMV的检出率高于孕期无体液排毒者.结论:对于CMV IgG阳性的育龄妇女,应重视无症状排毒情况,尤其重视对尿液、阴道分泌物以及产后母乳CMV排出的检测.
关键词： 巨细胞病毒 实时荧光定量聚合酶链反应 妊娠 体液 -
利用实时荧光定量PCR技术快速诊断唐氏综合征的研究
目的:建立实时荧光定量聚合酶链反应( RT - qPCR)技术,快速诊断唐氏综合征.方法:应用RT - qPCR方法同时扩增位于21号染色体上的唐氏综合征特异区域基因片段( DSCR3)和12号染色体上的磷酸甘油醛脱氢酶基因,根据相对定量指标△CT值区分唐氏综合征患者和正常人.结果:正常人组和唐氏综合征患者组△CT值差异有统计学意义(P＜0.001),且无交叉重叠.结论:RT-q PCR技术快速诊断唐氏综合征方法可行,具有简单、快速、特异性高等特点.
关键词： 唐氏综合征 实时荧光定量聚合酶链反应 相对定量 快速诊断 -
肝组织中HBV cccDNA荧光定量聚合酶链反应检测法的建立
目的 建立和优化一种灵敏、特异的检测肝组织中乙型肝炎(乙肝)病毒(HBV)共价闭合环状DNA(cccDNA)荧光定量聚合酶链反应(荧光定量PCR).方法 设计检测HBV DNA(tDNA)和cccDNA特异性引物及探针,用3.44×100-3.44×109copies/μl含HBV全基因组序列(C基因型)质粒作为标准品,建立荧光定量PCR检测标准曲线.取33例乙肝肝癌患者肝组织标本、13例慢性乙肝患者肝活检组织标本和10例非乙肝患者肝组织标本,验证该法灵敏度和特异度.提取肝组织中DNA,取一部分进行质粒安全ATP依赖的DNA酶(PSAD)酶切;另一部分不酶切作为tDNA和β-globin检测样本,分别进行HBV cccDNA、tDNA和p-globin定量检测,以β-globin为参比,对每个细胞的HBV cccDNA和tDNA含量进行标准化.结果 检测肝组织中HBV cccDNA和tDNA定量的线型范围均为3.44 × 100-3.44×109 copies/μl.检测HBV cccDNA和HBV DNA下限均为3.44×100copies/μl.33例乙肝肝癌患者和13例慢性乙肝患者的肝组织中HBV cccDNA低含量分别为0.003 copies/cell和0.031 copies/cell;检测10份非乙肝肝癌患者的肝组织标本均为阴性.应用PSAD消化肝组织中提取的DNA可减少假阳性,提高cccDNA检测法特异度达7.24× 102倍.对2例乙肝肝癌患者的肝组织标本重复检测5次,Ct值的变异系数为0.224%～0.609%.结论 该方法灵敏度和特异度高,重复性好,可用于检测肝组织中HBV cccDNA.
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玉郎伞多糖抗鸭乙型肝炎病毒及保护肝细胞作用
目的:观察玉郎伞多糖(YLSP)在鸭乙型肝炎病毒(DHBV)持续性感染模型中对鸭血清乙型肝炎病毒DNA的抑制作用及保护肝细胞的作用.方法:将DHBV-DNA强阳性麻鸭随机分为YLSP高、中、低剂量组(10,5,2.5 g·kg-1)、拉米夫定(3TC,0.05 g·kg-1)组和模型组,以上各组每日上午灌胃给药1次,连续14 d.于用药前(T0)、用药7d(T7)和14d(T14)及停药后3d(P3)取静脉血用实时荧光定量PCR检测DHBV-DNA含量,同时采用酶联免疫吸附(ELISA)法测定上清液鸭乙型肝炎病毒表面抗原(DHBsAg)和e抗原(DHBeAg)的滴度;在停药3d后,取肝脏匀浆,检测肝匀浆液中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性以及丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)的含量.结果:与模型组相比,YLSP高、中剂量治疗组给药7d(T7)和14d(T14)即能明显抑制DHBV-DNA复制及血清DHBsAg,DHBeAg的滴度显著降低(P＜0.05或P＜=.01),停药后3d(P3),YLSP高剂量组仍能显示出持续有效,血清DHBV-DNA水平及血清DHBsAg,DHBeAg的滴度均无反跳现象(P ＜0.05或P＜0.01);在停药3d后,肝匀浆液中SOD,GSH-Px活性以及MDA,GSH的含量,YLSP高、中剂量组仍能显示出持续有效,没有出现反跳现象(P ＜0.05或P＜0.01).结论:YLSP具有有效抑制DHBV-DNA和保护肝细胞的作用.
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一种国产乙型肝炎病毒核酸定量检测试剂不同检测平台上的验证情况分析
目的 将圣湘公司乙型肝炎病毒(HBV)核酸定量检测试剂盒(PCR-荧光探针法)在不同荧光定量PCR系统进行性能验证,以给出该试剂盒在不同检测平台上的性能评价.方法 依据美国临床和实验室标准化协会(CLSI)颁布的EP系列文件和《医学实验室质量和能力认可准则》相关文件,应用Roche LightCycler(R)480 Ⅱ实时荧光定量PCR系统及美国ABI 7500型实时荧光定量PCR系统对圣湘公司乙型肝炎病毒(HBV)核酸定量检测试剂盒(PCR-荧光探针法)进行临床样本精密度、正确度、可报告范围和检测下限的性能验证实验.结果 LightCycler(R)480 Ⅱ实时荧光定量PCR系统:2×106 IU/mL浓度水平批内精密度为1.38％,批间精密度为0.25％;2×104IU/mL浓度水平批内精密度为0.35％,批间精密度为0.79％.正确度验证可溯源标准品,偏倚均小于7.5％,符合厂家说明及文件要求.HBV DNA定量结果在2.1×102IU/mL至2.1×107IU/mL浓度水平范围内线性关系良好(R2=0.9994),临床可报告范围为2.1×102IU/mL～2.1×108IU/mL.该系统检测下限为148 IU/mL.ABI 7500型实时荧光定量PCR系统:2×106IU/mL浓度水平批内精密度为0.70％,批间精密度为1.34％.2.5×104IU/mL浓度水平批内精密度为1.18％,批间精密度为3.01％.正确度验证可溯源标准品,偏倚均小于7.5％,符合厂家说明及文件要求.HBV DNA定量结果在2×102IU/mL至2×10sIU/mL浓度水平范围内线性关系良好(R2 =0.9991),临床可报告范围为2×102IU/mL ～2×109IU/mL.该系统检测下限为203 IU/mL.结论 圣湘公司乙型肝炎病毒(HBV)核酸定量检测试剂盒(PCR-荧光探针法)在Roche LightCycler(R)480 Ⅱ实时荧光定量PCR系统及美国ABI 7500型实时荧光定量PCR系统上的性能验证结果均符合试剂说明书性能范围,检测结果无明显差异,均可准确快捷的对HBV DNA定量检测,为后续超敏定量工作奠定基础.
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定量PCR技术快速分析噬菌体展示肽库的应用
目的 建立无需转染菌株的快速定量方法,用以分析噬菌体展示肽库筛选.方法 选取Ph.D.-C7C噬菌体展示肽库,进行梯度稀释并提取基因组,在其载体序列上设计一对通用引物,运用SYBR Green的方法进行荧光定量PCR扩增,通过计算该方法的特异性、精密度和线性范围来确定该检测方法的可行性.结果 通过溶解曲线得知该对引物可特异性筛选噬菌体展示七肽库.通过计算每个浓度的Ct值及其偏差可发现,该体系在2×104pfu/mL～2×1010pfu/mL的浓度范围内线性关系良好,且在2×105pfu/mL～2×1010pfu/mL的浓度范围内批间不精密度小于15％.结论 建立的荧光定量PCR体系可以避免转染菌株所带来的繁琐人工劳动,并可以特异、准确、快速的对噬菌体展示肽库进行定量分析.
关键词： 噬菌体展示 实时荧光定量聚合酶链反应 文库筛选 -
全血标本冷藏保存一周对血清HBV DNA复测结果的影响
目的 探讨全血标本冷藏保存1周对血清乙肝病毒DNA(HBV DNA)复检结果的影响.方法 采集乙肝患者外周全血150例,及时2～8℃保存,分别于采血后第1天和第7天用实时荧光定量PCR法(FQ-PCR)检测血清HBV DNA水平.结果 150例全血标本第1天、第7天时血清HBV DNA载量分别为:5.50±1.46、5.64±1.53,结果呈小幅升高趋势,但两组差异无统计学意义(P＞0.05);以第1天结果为基准,第7天时结果偏倚绝对值为(4.26±0.03)％,其中15例偏倚大于±7.5％.结论 以分析中质量控制为前提,全血标本冷藏保存l周对血清HBV DNA复测结果的影响符合ISO 15189室内质控要求,能满足临床追加检测或复查申请;操作误差和FQ-PCR方法学的不足仍是造成复测较大偏差的主要原因.
关键词： 乙肝病毒DNA 实时荧光定量聚合酶链反应 质量控制 -
神经型一氧化氮合酶相关分子NIDD mRNA在周围神经损伤后的表达变化
目的 探讨正常及损伤的周围神经中神经型一氧化氮合酶(nNOS)相关分子(NIDD)的表达定位与变化.方法 在利用实时荧光定量PCR(FQ-PCR)研究大鼠坐骨神经损伤对nNOS及其相关分子NIDD mRNA表达变化的基础上,通过原位杂交与间接免疫荧光相结合的方法进一步研究其表达定位情况.结果 nNOS及NIDD mRNA主要分布在正常和损伤坐骨神经的施万细胞(SCs)中,损伤后表达增多,分别在神经夹伤后2周以及切断后1周的近、远侧断端中出现表达高峰.原代培养的SCs中也检测到nNOS及NIDD,其mRNA分布在核周细胞质区域.结论 周围神经损伤对nNOS相关分子NIDD的表达有影响,SCs表达NIDD可能参与神经损伤后再生修复机制.
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日本沼虾酚氧化酶原基因cDNA的全长克隆及表达分析
目的 克隆日本沼虾酚氧化酶原(proPO)基因,进行生物信息学及时空表达分析.方法 利用RT-PCR和快速扩增cDNA末端(RACE)技术从血细胞中克隆proPO基因cDNA全长序列,用生物软件对其序列进行生物信息学分析;proPO基因时空表达分析采用RT-PCR和Real-time PCR方法;腹部肌肉注射嗜水气单胞菌(5.0×109/L)诱导酚氧化酶(PO),20 μl/只,注射后3、6、12、24h取其血淋巴,分别测定血细胞proPO mRNA水平及血清酚氧化酶(PO)活力.结果 日本沼虾proPO基因cDNA全长2428bp,包含71 bp的5'UTR、344 bp的3'UTR和2013bp的开放阅读框(ORF).ORF编码671个氨基酸,预测蛋白分子量为76.5kD,理论等电点(pI)约为7.31;含有2个保守的铜离子结合位点和6个组氨酸残基、1个蛋白酶水解位点和硫酯样的基序(GCGWPRHM);含有3个血蓝蛋白结构域;与罗氏沼虾proPO的相似性高,为93％,与其他甲壳动物proPO相似性为50％～ 53％.该基因表达具有组织特异性,血细胞高,肝胰腺有较弱表达,肌肉、鳃、肠、大颚器官和卵巢不表达;血细胞proPO基因的表达量在蜕皮前期(D0/1)高;嗜水气单胞菌刺激后6h血细胞proPO mRNA水平及血清中PO活力均显著增加.结论 与其他甲壳动物相似,日本沼虾proPO基因具有2个保守的铜离子结合位点;其表达呈组织特异性,高出现在血细胞;在蜕皮周期的前期(D0/1)血细胞表达量高;嗜水气单胞菌可诱导proPO基因的表达以及PO活力,提示该基因是参与机体免疫防御反应的一种重要分子.
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日本三角涡虫热休克蛋白90基因克隆及其表达模式
目的 克隆日本三角涡虫热休克蛋白90(Djhsp90)基因,并对其在不同应激条件下表达模式进行分析.方法 采用PCR技术克隆日本三角涡虫hsp90 cDNA全长序列和基因组DNA序列,利用生物信息学软件对其序列进行分析,采用实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time PCR)技术检测其在再生、饥饿和热激过程中的表达模式.结果 Djhsp90 cDNA全长2354 bp,含有2148 bp的开放阅读框(ORF),编码715个氨基酸,含有真核生物HSP90家族蛋白的5个标签序列和末端高度保守序列MEEVD.基因组DNA测序表明,该基因仅含有1个内含子(48 bp),内含子的5'-和3'-剪切位点符合经典的“GT-AG”法则.涡虫切断后1d Djhsp90的表达量显著增加,2d达到高峰,3d后逐步下降到正常水平.持久饥饿过程中Djhsp90的表达量维持在较高水平.提高培养温度能显著诱导Djhsp90的表达,且涡虫头部对热效应敏感.结论 我们成功克隆了日本三角涡虫hsp90基因,并证实切割、饥饿和热激能诱导其表达上调.
关键词： 热休克蛋白90 基因克隆 实时荧光定量聚合酶链反应 涡虫 -
乳酸抑制脂多糖介导的核因子-κB p65入核转录及环氧化酶-2转录
目的 探讨嗜酸乳杆菌代谢产物乳酸(LA)对内毒素(LPS)介导的NF-κB p65入核、转录及环氧化酶-2(COX-2)转录的抑制作用.方法 以体外培养的大鼠肠黏膜微血管内皮细胞(RIMMVECs)为材料,设对照组、LPS组、LA预处理组和NF-κB特异性阻断剂吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)预处理组4个实验组.LPS作用30min后,Western blotting检测不同实验组细胞核、细胞质内NF-κB p65蛋白水平,LPS作用9h后,实时荧光定量PCR法检测NF-κB p65、COX-2 mRNA水平.结果 LPS作用30min后,各实验组细胞NF-κB p65蛋白总量差异不显著,但LA和PDTC预处理组细胞核内NF-κB p65比例显著低于LPS组；LPS作用9h后,LA和PDTC预处理组细胞NF-κB p65和COX-2 mRNA水平显著低于LPS组.结论 乳酸具有类似NF-κB阻断剂的作用,可以抑制LPS介导的NF-κB p65入核、转录,抑制NF-κB下游靶基因如COX-2的转录,从而发挥抗炎作用.
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实时荧光定量PCR测定瑞香素类抗疟化合物对恶性疟原虫核糖核酸还原酶基因表达的影响
目的 测定瑞香素类抗疟化合物对恶性疟原虫核糖核酸还原酶(RNR)基因表达的影响. 方法 体外同步培养的恶性疟原虫经瑞香素及其衍生物DA78与DA79 作用后,抽提总RNA,并合成相应的特异性引物,运用实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time PCR)测定瑞香素类抗疟化合物对恶性疟原虫RNR基因表达的影响. 结果 恶性疟原虫体外经瑞香素及其衍生物作用后的RNR基因扩增标准曲线在105～109拷贝(copies)/ml范围内呈良好的线性关系,R2为0.997 52;瑞香素及其衍生物DA78与DA79对恶性疟原虫RNR作用后,其原始拷贝数分别为81 173.23、124 830.83和74 801.35,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.01),而瑞香素的铁螯合能力被饱和后,对该基因的表达未产生显著抑制(P＞0.01). 结论 瑞香素类抗疟化合物体外抑制恶性疟原虫RNR的基因表达,RNR可能作为瑞香素类抗疟化合物抗疟作用的候选靶分子之一.
关键词： 瑞香素 疟原虫 恶性 核糖核酸还原酶 实时荧光定量聚合酶链反应 -
实时定量PCR方法对儿童肺炎支原体血症诊断价值研究
目的 评价实时定量PCR方法对儿童肺炎支原体血症诊断的临床应用价值,为支原体肺炎早期诊断及防控工作提供依据. 方法 采用实时定量PCR方法对医院儿科148例肺炎支原体(MP)感染疑似病例血清进行检测,并与临床诊断和血清免疫学结果进行比较. 结果 实时定量PCR方法能够检出MP DNA的浓度范围为6.4×10-2ng·μl-1～200 ng·μl-1.应用实时定量PCR方法诊断MP感染的灵敏度为86.67％,特异度为91.78％,诊断符合率为89.19％,与临床诊断比较差异无统计学意义(P＞0.05)；以血清学试验结果为“金标准”,实时定量PCR方法对MP感染诊断的灵敏度为75.00％,特异度为77.63％,一致率为76.35％,两种方法差异无统计学意义(P＞0.05)；实时定量PCR方法和血清学试验联合检测对MP感染诊断的灵敏度为97.26％,特异度为78.67％,诊断符合率为87.84％,与临床诊断差异有统计学意义(P＜0.05). 结论 采用实时定量PCR方法对儿童肺炎支原体血症诊断的灵敏度和特异度较高,联合血清免疫学结果检测的灵敏度可达97.26％,可供临床应用.
关键词： 实时荧光定量聚合酶链反应 肺炎支原体 早期诊断 -
骨桥蛋白基因C707T多态性与系统性红斑狼疮关联性研究
目的 探讨骨桥蛋白(OPN)707C/T位点的基因多态性与系统性红斑狼疮(SLE)发病的关联性.方法 收集SLE患者143例(年龄:39.4±12.1岁;女/男:134/9),均符合美国ACR1997分类标准,同时选择97例(年龄:34.4±9.5岁;女/男:87/10)健康体检者,采用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测OPN基因C707T多态性.结果 707C/T位点的基因型和等位基因分布在SLE患者组和正常对照组中差异无统计学意义(P>0.05).结论 OPN基因707C/T多态性与SLE发病无关.
关键词： 系统性红斑狼疮 骨桥蛋白 酶联免疫吸附 实时荧光定量聚合酶链反应 -
慢性丙型肝炎患者幽门螺杆菌感染及其相关因素分析
目的:探讨幽门螺杆菌(H pyloH)在慢性丙型肝炎中的作用.方法:采用Hpylor流行病学诊断标准检测血清anti-Hpylori-IgG,来判定是否存在Hpylori 感染,实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)方法检测血清中HCV RNA的含量,聚合酶链反应.微板核酸杂交.酶联免疫测定法检测血清中HCV基因型.结果:HpyloN感染率在慢性丙型肝炎组、丙型肝炎肝硬化组和合并肝癌组明显高于健康对照组(55.5%、76.5%、78.6%VS 43.4%,P＜0.05),且随着病变程度的加重,Hpylon感染率增加.不同HCV载量的慢性丙型肝炎患者Hpylon感染率均增加.基因1a型、1b型、2a型和2b型患者HpyloN感染率分别为59.5%、66.7%、65.0%和59.2%,各基因型之间比较无显著性差异.结论:慢性丙型肝炎患者幽门螺杆菌感染率明显增加,H pylori在慢性丙型肝炎向肝硬化和肝癌的发展过程中可能与HcCV发挥协同作用.
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钠氢交换体1 mRNA在心衰患者心肌组织中的表达
者心肌组织中NHE1mRNA表达明显高于心功能Ⅰ级组(P<0.01),同时与心功能Ⅱ级组比较,心功能Ⅲ级组患者心肌组织中NHE1mRNA水平增高,且差异有统计学意义(P<0.05).结论 心衰患者心肌组织中存在NHE1mRNA的高水平表达,提示NHE1可能在心衰的发生和发展过程中起着重要作用.
关键词： 钠氢交换体1 心力衰竭 心肌组织 实时荧光定量聚合酶链反应
