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α-平滑肌肌动蛋白在臀肌挛缩症中的表达及意义
目的:观察α-平滑肌肌动蛋白(alpha-smooth muscle actin,α-SMA)在臀肌挛缩症的表达、分布.方法:利用免疫组化染色辅以计算机图像定量分析技术,对26例臀肌挛缩症及12例正常臀肌标本α-平滑肌肌动蛋白的表达进行检测.结果:α-SMA在对照组中未见明显表达.12例臀肌挛缩症组织中α-SMA染色阳性,14例臀肌挛缩组织中染色阴性,病变组与对照组比较差异有显著性(P＜0.001);7岁以上组臀肌挛缩症组织α-SMA表达明显减弱,与7岁以下组臀肌挛缩症组织(包括7岁)比较差异有显著性(t=2.364,P=0.028).结论:①肌纤维母细胞是臀肌挛缩症发病的关键病理因素;②臀肌挛缩症中肌纤维母细胞的表达强度与病程有关,7岁以上组病程较长,表达明显减弱,这给临床治疗提供了新思路.
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肌动蛋白和转化生长因子-β1在大鼠试验性肺气肿发生中的作用
目的观察大鼠小气道上皮细胞肌动蛋白和转化生长因子(TGF)-β1在呼吸道上皮损伤修复及肺气肿发生中的作用.方法将Wistar大鼠随机分为2组:吸烟加肺炎克雷伯杆菌感染组(SI组)和对照组(C组).SI组应用吸烟加反复肺炎克雷伯杆菌感染法建立大鼠慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型,C组动物不吸烟不染菌.透射电镜和光镜观察肺组织病理学改变.对各组动物进行动脉血氧分压(PaO2)、动脉血二氧化碳分压(PaCO2)和右心室收缩压(RVSP)测定.免疫组织化学链霉素抗生物素蛋白-过氧化物酶(SP)法检测各组大鼠小气道上皮细胞肌动蛋白和TGF-β1表达的变化.结果第16周SI组大鼠与C组比较,小气道炎症反应明显,细支气管壁明显增厚(P<0.05),内径与外径比明显降低(P<0.05),并于16周形成明显的肺气肿,肺腺泡内小动脉肌化明显(P<0.05).SI组动物第8周和第16周PaO2比C组明显降低(P<0.05),而RVSP比C组明显升高(P<0.05).C组大鼠小气道上皮细胞肌动蛋白表达较弱[吸光度值(A值)为0.09±0.03],第4周和第8周,SI组小气道上皮细胞肌动蛋白阳性表达明显增强(A值分别为0.24±0.06和0.25±0.05,P<0.05).C组大鼠肺组织TGF-β1为阴性,SI组大鼠第2、4、8和16周均可见TGF-β1阳性表达[阳性细胞数分别为(33.33±12.11)/mm,(45.71±15.12)/mm,(71.43±16.76)/mm,(86.25±20.66)/mm],SI组第8周与第4周比较TGF-β1表达增强显著(P<0.05).结论小气道上皮细胞肌动蛋白和TGF-β1表达增强,干扰呼吸道上皮细胞的修复功能可能在促进吸烟加肺炎克雷伯杆菌感染引起的大鼠肺气肿过程中起作用.
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抗纤灵对5/6肾切除大鼠肾组织α-SMA和Ⅰ型胶原的影响
目的 采用5/6肾切除方法建立慢性肾衰竭动物模型,观察抗纤灵对5/6肾切除大鼠肾组织α-SMA和Ⅰ型胶原的影响.方法 将SD大鼠随机分为假手术组和造模组,造模组以5/6肾切除方法建立慢性肾衰竭动物模型,1周后按血肌酐水平将造模大鼠分为模型组、福辛普利组和抗纤灵组.福辛普利组给予3.3 mg·kg-1·d-1福辛普利灌胃,抗纤灵组给予23 g·kg-1·d-1抗纤灵灌胃,模型组和假手术组给予等量生理盐水灌胃,8周后采用免疫组化、实时荧光定量PCR(RT-PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)测定各组大鼠肾组织α-SMA和Ⅰ型胶原基因和蛋白的表达.结果 模型组大鼠肾组织中肾小管及间质区Ⅰ型胶原及α-SMA表达较假手术组明显升高(P<0.01),抗纤灵组与模型组比较均明显下降(P<0.01);模型组大鼠表达α-SMA mRNA和Ⅰ型胶原mRNA水平较假手术组明显升高(P<0.001),抗纤灵组与模型组比较均明显下降(P<0.01或P<0.05);模型组大鼠表达α-SMA和Ⅰ型胶原蛋白水平较假手术组明显升高(P<0.001),抗纤灵组与模型组比较均显著下降(P<0.001).结论 抗纤灵可降低肾间质成纤维细胞α-SMA的表达,减少肌成纤维细胞的活化与形成,继而使细胞外基质Ⅰ型胶原生成减少,从而延缓慢性肾衰竭大鼠肾纤维化进程,保护残肾功能.
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鸦胆子油对血小板聚集的抑制作用及其机制的体外研究
目的 以人洗涤血小板为模型,体外观察鸦胆子油对血小板聚集的抑制作用,并探讨其可能机制.方法 将不同浓度鸦胆子油与人洗涤血小板作用,分为4组:空白组(加丙酮)、阴性对照组(加丙酮,0%),9.0%鸦胆子油组及22.5%鸦胆子油组.以血小板聚集分析仪检测ADP、AA、胶原和凝血酶诱导的血小板大聚集率、以流式细胞仪检测活化血小板膜FIB-R和P-选择素表达水平,以SDS-PAGE分析血小板肌动蛋白聚合体的变化.结果 9.0%鸦胆子油组ADP、AA、胶原和凝血酶诱导的血小板聚集率分别为(57.7±4.0)%、(62.2±3.9)%、(66.9±5.0)%和(71.8±5.1)%,均低于阴性对照(0%)组的(75.3±4.1)%、(79.3±4.8)%、(80.6±5.4)%和(84.1±6.2)%,差异均有统计学意义(t值分别为7.312、8.785、9.123和9.466,P均<0.01);22.5%组分别为(39.2±3.5)%、(45.8±3.4)%、(51.2±3.9)%和(56.7±4.8)%,显著低于9.0%组,差异有统计学意义(t值分别为9.123、10.221、9.533和10.243,P均<0.01).22.5%鸦胆子油组对血小板聚集的抑制率分别为47.9%、42.2%、36.5%和32.6%,显著高于9.0%组的23.4%、21.6%、17.0%和14.6%,差异有统计学意义(χ~2值分别为13.08、9.77、9.70和8.93,P均<0.01).血小板聚集水平与鸦胆子油浓度呈负相关(r=-0.952,-0.961,-0.970和-0.975,P<0.01).9.0%鸦胆子油组ADP诱导的血小板FIB-R表达水平和P-选择素表达水平分别为(64.7±4.0)%、(3.91±0.21)%,均低于阴性对照组的(85.5±4.6)%和(5.05±0.27)%,差异有统计学意义(t值分别为11.35、7.81,P均<0.01);22.5%鸦胆子油组分别为(36.2±3.9)%和(2.34±0.15)%,低于9.0%组,差异有统计学意义(t值分别为14.35、14.80,P均<0.01);22.5%鸦胆子油组对FIB-R的抑制率为57.7%,高于9.0%组的24.3%,差异有统计学意义(χ~2=23.05,P<0.01).9.0%和22.5%鸦胆子油组与空白组在相对分子质量43 000为肌动蛋白区带的吸光度值之比分别为1.77±0.12和1.68±0.10,明显低于阴性对照组与空白组的比值2.22±0.15,差异有统计学意义(t=7.21、8.14,P值均<0.01);22.5%胆鸦子油组为1.68±0.10,与9.0%组间差异无统计学意义(t=2.77,P>0.05).结论 鸦胆子油通过抑制活化血小板膜纤维蛋白原受体的表达,并抑制肌动蛋白聚合以及释放反应,从而剂量依赖性地抑制血小板的聚集反应,可能有抗血栓的功效.
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转换生长因子-β_1对肺成纤维细胞窖蛋白-1与细胞外基质表达的影响
目的 研究转换生长因子-β_1(TGF-β_1)对人胚肺成纤维细胞(HFLF)的窖蛋白-1、Ⅰ型胶原和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的影响.方法 体外培养HFLF,以未加TGF-β_1的HFLF为对照组.分别以不同终浓度(2、5和10 μg/L)TGF-β_1处理的HFLF为实验组,每组5×10~8细胞,实验重复3次,逆转录-PCR和Western blot法分别检测TGF-β_1刺激3、6、12和24 h后各组窖蛋白-1及其mRNA、Ⅰ型胶原和α-SMA蛋白表达.组间均值比较采用单因素方差分析,采用直线回归模型进行相关性分析.结果 TGF-β_1作用后,HFLF窖蛋白-1的mRNA和蛋白表达逐渐减少,呈时间-浓度依赖关系;TGF-β_1作用12 h,中剂量组(5 μg/L)窖蛋白-1的mRNA和蛋白表达的积分吸光度值(0.59±0.06和0.53±0.04)明显低于对照组(1.22±0.12和1.45±0.06),差异均有统计学意义(F值分别为29.279和95.786,均P＜0.01);TGF-β_1作用24 h,中剂量组(5 μg//L)Ⅰ型胶原和α-SMA蛋白表达的积分吸光度值(1.35±0.09和0.75±0.06)明显高于对照组(0.28±0.04和0.18±0.04),差异均有统计学意义(F值分别为81.221和65.477,均P＜0.01);相关分析结果显示,HFLF窖蛋白-1的蛋白表达下调与Ⅰ型胶原和α-SMA蛋白表达上调旱显著负相关(r值分别为-0.923和-0.793,均P＜0.05).结论 TGF-β_1可下调HFLF窖蛋白-1的mRNA和蛋门表达,并与Ⅰ型胶原和α-SMA蛋白表达上调呈负相关,提示HFLF窖蛋白-1下调可能与肺间质纤维化的发生和发展有关.
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转化生长因子β1诱导BALB/c 3T3成纤维细胞转化及对早期生长反应基因1表达的影响
目的 探讨转化生长因子β1(TGF-β1)促进BALB/c 3T3成纤维细胞向肌成纤维细胞转化及对早期生长反应基因1(Egr-1)表达的影响.方法 实验组用TGF-β110 ng/ml处理BALB/c3T3成纤维细胞,对照组不给予TGF-β1.采用流式细胞仪检测孵育24、48、72 h的α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)阳性细胞百分比,用免疫细胞化学方法及Western免疫印迹法检测TGF-β1处理15、30、60、90、120、180、240 min的Egr-1表达情况.结果 用TGF-β110 ng/ml培养24 h,实验组和对照组的α-SMA阳性细胞百分率分别为(6.65±0.48)%和(5.53±0.62)%;继续培养至48和72 h,实验组的α-SMA阳性细胞百分率[(28.38±3.60)%和(36.04±0.73)%]显著高于对照组[(9.49±0.21)%和(15.23±0.33)%].免疫细胞化学染色检测Egr-1的结果显示,培养90 min时实验组细胞中出现棕黄色阳性染色颗粒,而对照组阳性染色细胞较少.Western免疫印迹法检测Egr-1的结果显示,实验组培养15 min时的灰度水平(55±26)和对照组(38±18)无明显差别;随着给予TGF-β1时间延长,实验组灰度水平逐渐增加,60和90 min时(115±14和129±22)显著高于对照组,之后实验组灰度水平逐渐降低,在240 min时达低点(39±7).结论 TGF-β1能诱导BALB/c 3T3成纤维细胞向肌成纤维细胞分化,并且在此过程的早期Egr-1表达增加.
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特发性肺纤维化患者肺组织中窖蛋白-1和细胞外基质的表达
目的 研究特发性肺纤维化(IPF)患者肺组织窖蛋白-1和细胞外基质表达的变化及其意义.方法 6例IPF患者的肺组织标本来自2005年1月至2008年12月南京大学医学院附属鼓楼医院呼吸科住院患者,其开胸肺活检组织病理诊断符合普通型间质性肺炎.6例肺癌患者行肺叶切除,取其远离病变的肺组织标本作为对照组.用RT-PCR、Western blot及免疫组织化学方法检测肺组织标本中的窖蛋白-1 mRNA和蛋白表达.Western blot检测肺组织标本的胶原-Ⅰ、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和Smads蛋白表达.结果 IPF患者肺组织窖蛋白-1的mRNA和蛋白表达(分别为0.05±0.02和0.16±0.05)明显低于对照组(分别为0.66±0.19和0.81±0.11),差异有统计学意义(F值分别为8.465和353.836,均P＜0.05).IPF患者肺组织的胶原-Ⅰ (0.85±0.11)和α-SMA蛋白(0.78±0.08)表达明显高于对照组(分别为0.16±0.04和0.14±0.05),差异有统计学意义(F值分别为485.09、410.027,均P＜0.05).IPF患者肺组织的p-Smad2蛋白(0.78±0.08)和p-Smad3蛋白(0.86±0.07)表达明显高于对照组(分别为0.17±0.04和0.14±0.04),差异有统计学意义(F值分别为521.97和530.48,均P＜0.05)；而Smad7蛋白表达(0.22±0.05)明显低于对照组(0.78±0.08),差异有统计学意义(F=414.84,P＜0.05).结论 IPF患者肺组织窖蛋白-1表达下调与特发性肺纤维化的发生和发展有关.
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纤维溶解酶原激活物抑制剂-1对大鼠胚肺成纤维细胞的影响
目的 研究纤维溶解酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)对大鼠胚肺成纤维细胞增殖、转化及胶原合成的影响,探讨PAI-1在肺纤维化发生中的作用.方法 体外分离培养Wister 待产孕大鼠胚肺成纤维细胞,应用四甲基偶氮唑盐试验观察不同浓度(5、10、20、40、80 μg/L)的PAI-1刺激12、24和48 h后成纤维细胞的增殖率;选用PAI-1适浓度20 μg/L刺激48和72 h后,细胞免疫化学法检测增殖细胞核抗原(PCNA)的表达;实时PCR法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原24和48 h时mRNA表达的变化.结果各浓度PAI-1刺激成纤维细胞后,以20 μg/L 12 h增殖率及吸光度值高,分别为62.6%和0.573±0.039.在12 h中,不同浓度组较对照组差异有统计学意义(F=111.112,P=0.000),选择20 μg/L为适浓度.免疫细胞化学法检测20 μg/L PAI-1刺激48、72 h后,PCNA表达的积分吸光度值分别为3685±686和2530±477,较对照组差异有统计学意义(F=7.85,P=0.020).PAI-1刺激成纤维细胞24和48 h后,α-SMA表达上调(230±11)%和(159±9)%,较对照组差异有统计学意义(F=39.92,P=0.000).Ⅰ型胶原表达上调(92±8)%和(65±12)%,差异有统计学意义(F=32.61,P=0.001).结论 PAI-1可以促进成纤维细胞增殖、转化及胶原合成,可能促进肺间质纤维化的发生和发展.
关键词： 成纤维细胞 纤溶酶原激活物抑制物1 细胞增殖 肌动蛋白类 胶原Ⅰ型 -
替米沙坦对非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝纤维化基质金属蛋白酶-13及其抑制因子-1的表达和胰岛素抵抗的影响
目的 观察替米沙坦对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)大鼠肝纤维化的疗效和对基质金属蛋白酶-13(MMP-13)及其抑制因子-1(TIMP-1)的表达和胰岛素抵抗的影响.方法 30只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、模型组和替米沙坦干预组.模型组和干预组给予高脂饲料喂养16周诱发脂肪性肝炎,其中干预组于高脂喂养12周后,给予替米沙坦[5mg/(kg.d)]灌胃治疗4周.16周末处死所有动物.检测血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)及空腹胰岛素(FINS)、空腹血糖(FPG),并计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),RT-PCR和Western blot法检测肝组织TIMP-1、MMP-13 mRNA和蛋白的表达水平.病理切片观察组织学改变,免疫组织化学法检测a-平滑肌肌动蛋白(a-SMA)的表达情况.结果 模型组血清ALT,AST,FPG,FINS及HOMA-IR较正常组均显著升高(均P＜0.01).与模型组相比,干预组血清ALT,FPG,FINS及HOMA-IR均明显下降,差异具有统计学意义(均P＜ 0.01).AST与干预组相比存在下降趋势,但差异无统计学意义(P＞0.05).与模型组相比,替米沙坦可显著改善肝脏炎症活动度及肝纤维化程度(均P＜ 0.01).干预组HOMA-IR较模型组明显降低[(3.59±0.29)vs(6.23±0.19),P＜ 0.01].干预组肝组织a-SMA的表达明显减少,肝组织MMP-13 mRNA和蛋白的表达均增加,TIMP-1 mRNA和蛋白的表达均降低(均P＜0.01).结论 替米沙坦对NASH大鼠具有改善胰岛素抵抗和抗肝纤维化的作用.
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脑淀粉样血管病中α-平滑肌肌动蛋白表达的变化
目的 脑淀粉样血管病(CAA)患者不同病变程度脑小动脉中α-平滑肌肌动蛋白(α-SM-actin)表迭变化的对比.方法 将10例CAA患者的200支小动脉,依据淀粉样变的严重程度分为无病变组及轻、中、重度病变组,5例正常同龄人的100支脑小动脉设为对照组.对比观察各病变组血管的病理改变以及α-SM-actin表达的变化.结果 所有病变组α-SM-actin阳性物质主要位于中膜区靠近内侧部位,阳性单位值均小于对照组,且病变程度越重,阳性单位值越小;无病变组阳性单位值较对照组无显著差异.结论 CAA整个病程中,血管平滑肌细胞因其周围淀粉样物质的毒性作用,由外层向内层逐步发生结构和功能的改变,直至终细胞死亡.
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乳鼠脑血管平滑肌细胞的分离培养与鉴定
目的 建立一种快速、简单、高效的脑血管平滑肌细胞分离和培养方法,对脑血管疾病机制的研究提供实验材料基础.方法 用不合EDTA胰蛋白酶消化组织获取细胞,继而于倒置相差显微镜下观察细胞的生长情况,对第3代细胞采用a-肌动蛋白荧光免疫染色法,同时MTT检测细胞的生长趋势.结果 运用胰酶消化法获得并培养出大量的脑血管平滑肌细胞,荧光免疫染色法鉴定结果显示阳性表达,纯度98％.结论 此方法简单、操作性强,目标细胞获得率高,为老年性脑血管疾病机制研究提供材料支持.
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丹参酮ⅡA诱导骨髓间充质干细胞向心肌细胞分化的研究
目的 探讨丹参酮ⅡA对骨髓间充质干细胞(BMSC)定向分化为心肌样细胞的影响.方法 取SD大鼠四肢骨骨髓,分离培养BMSC,第2代细胞应用终浓度为500 ng/ml丹参酮ⅡA定向诱导(诱导组),将不添加任何诱导剂的BMSC设为对照组.应用免疫细胞化学技术检测结蛋白、α-横纹肌肌动蛋白(α-SCA-actin)和心肌特异性肌钙蛋白T(cTnT)的表达情况.免疫荧光双标染色技术检测α-SCA-actin和cTnT的表达.透射电镜观察2组超微结构的改变.结果 免疫细胞化学染色结果显示,与对照组比较,诱导组BMSC中结蛋白(50279.6±2575.2) vs(1325.6±196.1)、α-SCA-actin(44 738.3±1963.3) vs (1446.3±202.4)、cTnT(27 658.8±2382.2) vs (1369.1±214.2)明显升高(P＜0.01).免疫荧光双标染色法检测诱导组α-SCA-actin阳性为红色,cTnT阳性为绿色,两者重叠部位为黄色,呈现共表达.透射电镜结果显示,诱导组细胞可见平行排列的肌丝并富含线粒体、糖原和核糖体以及丰富的粗面内质网.结论 经丹参酮ⅡA诱导的BMSC具有向心肌细胞分化的表型.
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RNA干扰人血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体表达对内皮细胞骨架损伤的影响
目的 构建针对人血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1(LOX-1)基因的RNA干扰慢病毒载体,并转染人脐静脉内皮细胞后,采取氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导观察对内皮细胞骨架损伤的影响.方法 体外培养人脐静脉内皮细胞分为对照组、ox-LDL组(ox-LDL处理)、阴性转染组(ox-LDL处理+阴性慢病毒转染)和慢病毒转染组(ox-LDL处理+佳干扰序列慢病毒转染).荧光显微镜观察转染效率,Western blot检测磷酸化肌球蛋白轻链(p-MLC)、Rho激酶(ROCK)、LOX-1蛋白的表达;免疫荧光法观察细胞骨架肌动蛋白(F-actin)的变化.结果 与对照组比较,ox LDL组和阴性转染组p MLC、ROCK、LOX-1蛋白表达增高;细胞F-actin发生损伤并伴含量减少(P＜0.05).与阴性转染组比较,慢病毒转染组抑制p-MLC、ROCK、LOX-1蛋白表达,减轻F-actin损伤及伴含量增加(P＜0.05).结论 干扰LOX-1表达对ox-LDL诱导引起的内皮细胞ROCK、p-MLC表达增加及细胞骨架损伤均有抑制作用.
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糖尿病心肌病心肌细胞纤维化的病理改变
目的 研究糖尿病(DM)大鼠不同病程心肌纤维化及其相关病理变化.方法 选取18只DM心肌模型后大鼠随机分为DM大鼠1个月组(DM1组)、3个月组(DM3组)、6个月组(DM6组),每组6只.另选18只健康大鼠作为对照组.采用氯胺T法测定羟脯氨酸含量,为心肌胶原总含量.免疫组织化学染色测定心肌胶原蛋白Ⅰ、Ⅲ和心肌细胞心肌型α肌动蛋白(α-actin)及转化生长因子β1(TGF-β1)平均积分吸光度(A).光镜和透射电镜下观察心肌病理变化.结果 DM6组心肌胶原总含量明显高于DM1组和DM3组(P＜0.01).与对照组比较,DM3组心肌胶原蛋白Ⅰ表达伴随TGF-β1的表达开始明显增加(P＜0.01).心肌细胞心肌型α-actin表达较对照组明显减少(P＜0.01).各组大鼠心肌横切面可见粗大胶原纤维相互连接成网状,排列紊乱,分布不匀.α-actin表达明显减少,有糖原沉积现象.结论 胶原蛋白Ⅰ呈现持续性增加是DM大鼠心肌纤维化的主要原因.TGF-β1参与了心肌纤维化发生的早期过程.糖原沉积和心肌细胞心肌型α-actin表达减少是DM心肌病的病理基础.
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葫芦素B对压力负荷诱导的心肌纤维化的作用机制
目的 探讨葫芦素B对压力负荷诱导的心肌纤维化的作用机制.方法 选择C57小鼠60只,随机分为假手术组、葫芦素B组、结扎术组(主动脉结扎术)、联合组(葫芦素B+主动脉结扎术),每组15只.术后1周给予葫芦素B灌胃处理0.2 mg/(kg·2 d),持续到术后4周],主动脉结扎术诱导心肌纤维化模型.用免疫组织化学方法检测心脏微血管密度;免疫荧光检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达;运用免疫荧光染色和蛋白免疫印迹法检测CD31、CD34、α-SMA和波形蛋白表达和内皮间质转化程度.结果 假手术组和葫芦素B组术后4周心脏微血管密度、α-SMA,波形蛋白、CD31、CD34表达无明显变化(P＞0.05).与假手术组比较,结扎术组术后4周心脏微血管密度、CD31、CD34表达明显下调,α-SMA、波形蛋白表达明显增加(P＜0.05).联合组术后4周心脏微血管密度、CD31、CD34表达明显高于结扎术组(4.31±1.06 vs 2.24±0.78,0.22±0.04 vs 0.05±0.02,0.12±0.02 vs0.04±0.01,P＜0.05),α-SMA、波形蛋白表达明显低于结扎术组(0.31±0.03 vs 0.98±0.04,0.05±0.02 vs 0.53±0.07,P＜0.05).结论 葫芦素B可以通过抑制内皮向间质转化改善压力负荷诱导的心肌纤维化.
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微小RNA-1在心血管疾病中的研究进展及作用机制
微小RNA (microRNA,miRNA)是一类保守的单链非编码RNA分子,以序列特异性方式在转录后水平调控靶基因表达[1].目前研究发现,动植物和病毒中均存在大量的miRNA表达,并可参与包括细胞增殖、凋亡、分化和代谢等多种生物学进程[2].
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射血分数保留的心力衰竭管理
2016年ESC科学年会公布的心力衰竭(心衰)指南提出,心衰是一种临床综合征,以典型的症状为特征,包括呼吸困难,足踝部水肿和乏力.伴随体征有颈静脉压力升高、肺裂隙、外周水肿.心衰原因有结构性或功能性心脏异常.导致静息或压力负荷状态下心输出量减少和(或)心腔内压力增加[1].2016年ESC提出新的心衰分类:(1)射血分数减低的心衰(HFrEF),症状和(或)体征,LVEF＜40％;(2)射血分数中间值的心衰,症状和(或)体征,LVEF 40％～49％;(3)射血分数保留的心衰(HFpEF),症状和(或)体征,LVEF≥50％.3种心衰都包括:升高的N末端B型钠尿肽前体(NT-proBNP);相关的结构性心脏病,左心室肥厚(LVH)或左心房扩大和(或)舒张功能障碍.
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A型肉毒毒素对成纤维细胞中α平滑肌肌动蛋白和肌球蛋白-Ⅱ表达的影响
目的 探讨不同浓度A型肉毒毒素(botulinum toxin type A,BTXA)对瘢痕内成纤维细胞中α平滑肌肌动蛋白(α smooth muscle actin,α-SMA)和肌球蛋白-Ⅱ(myosin-Ⅱ)表达水平的影响.方法 从手术切除的挛缩性瘢痕组织中分离培养原代成纤维细胞,选取3～5代成纤维细胞随机分为正常组、低浓度BTXA组(1.0 U/106cells)和高浓度BTXA组(2.5 U/106cells),于药物作用后1、4、7d观察成纤维细胞的生长状况,并采用Wstern blot对成纤维细胞中α-SMA和myosin-Ⅱ的表达进行测定.结果 正常组成纤维细胞生长状态良好;低浓度BTXA组第4天时细胞增殖速度减慢;高浓度BTXA组第4天时细胞部分出现核固缩,第7天时细胞排列较疏松,视野呈现较多凋亡的细胞.α-SMA和myosin-Ⅱ表达在第4天时正常组显著高于BTXA作用组(P＜0.05),第7天时低浓度BTXA组与高浓度BTXA组间比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 BTXA能够促进成纤维细胞凋亡,减少成纤维细胞中α-SMA和myosin-Ⅱ的表达,且在一定范围内,浓度越高抑制作用越明显.
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胎儿宫内生长迟缓患者脐动脉波形异常与胎盘病理改变的关系
目的 探讨胎儿宫内生长迟缓（IUGR）患者胎儿脐动脉波形异常与胎盘重量、体积及各级绒毛血管数量的关系。方法 选择分娩前1周内，患IUGR或B超检查有胎儿脐动脉波形异常的患者40例，分为脐动脉波形异常伴IUGR 10例为研究组；脐动脉波形异常不伴IUGR（AN）；脐动脉波形正常伴IUGR（NA），脐动脉波形正常不伴IUGR（NN）各10例为对照组。用免疫组织化学SP法，检测以上各组胎盘干血管中α-平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin，α-SMA）表达，以确定各级绒毛和各级血管，比较研究组和各对照组间胎盘重量、体积大小、各级绒毛及血管数量。结果 （1）研究组胎盘重量、体积分别为（283.40±23.82) g及（234.60±52.08) cm3；与对照组比较明显减小(P分别<0.05～<0.001)。（2）研究组胎盘各级血管（干血管数量）、绒毛数量（干绒毛数量）分别为(3.59±0.49)个及（2.83±0.50)个;与对照组比较均显著下降(P分别<0.05～0.001)。结论 IUGR患者的脐动脉波形异常与胎盘重量、体积减小、各级绒毛血管数量显著减少有关。胎盘绒毛血管减少的原因可能是胎盘绒毛血管原发性发育不良所致，而非血管选择性闭锁。
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心脏α肌动蛋白基因在胚胎心脏发育中的时空表达
目的了解心脏α肌动蛋白(cardiac alpha-actin, CAA)基因在胚胎心脏发育过程中的时空表达规律,探讨其与心脏畸形发生的关系.方法用电刺激方法制备鸡胚心脏畸形模型.用实时荧光定量PCR方法检测胚胎发育不同阶段CAA基因表达量的动态变化;用免疫组化方法检测CAA蛋白在胚胎不同发育时期表达部位的变化.结果 (1)CAA基因在胚胎发育早期即开始表达,以后表达量逐渐增加至稳定.CAA主要局限在心脏部位表达,并随着心肌结构的发育成熟表达逐步增强;在肝脏、脑、胃等器官中不表达或微量表达.(2)心脏神经嵴被破坏的实验组胚胎在胚龄第2～7天,CAA基因相对表达量明显低于正常对照组胚胎相对应时期(P= 0.013).实验组心脏组织在第7、9、15天时CAA基因表达量也明显低于正常对照组(P=0.029).结论 CAA基因与心脏发育密切相关.CAA基因表达受到心脏神经嵴细胞调控,剔除心脏神经嵴后其表达减少,影响了心肌细胞的成熟和分化,可能是导致心脏畸形发生的一个重要因素.
