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朱砂根的组织培养与植株再生
目的:研究药用植物朱砂根组培快繁技术,为其产业化生产提供科学依据.方法:考察不同基本培养基、植物激素、添加物等对腋芽诱导、增殖及植株再生的影响.结果:以朱砂根带芽茎段为外植体,初代培养腋芽诱导的佳培养基为MS+6-BA 0.5 mg·L~(-1)+NAA 0.1 mg·L~(-1).腋芽增殖的佳培养基配方为MS+6-BA 2.0 mg·L~(-1)+NAA 0.1 mg·L~(-1)+KT 0.5 mg·L~(-1).生根培养基为1/2MS+IBA 0.2 mg·L~(-1);添加0.2%的活性炭可明显促进根的生长,提高生根率、生根数.有利于朱砂根无菌苗移栽存活的基质类型为河沙.珍珠岩-蛭石(1:1:1),或蛭石.珍珠岩(1:1),成活率在80%以上.结论:通过腋芽增殖快繁育苗技术可获得完整植株,达到快速繁殖的目的.
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青天葵组织培养及植株再生的研究
目的:对青天葵进行组织培养并获得再生植株.方法:考察不同外植体、植物生长调节剂、添加物等对根状茎及再生植株生成的影响.结果:以球茎为外植体效果好,6-BA 2 mg·L-1诱导球茎生成根状茎的效果优于6-BA 1 mg·L-1,椰汁、活性炭对根状茎的生长有促进作用.结论:青天葵球茎接种于1/2MS+6-BA 2 mg·L-1培养基上,能够诱导出芽,芽接种于添加了10%椰汁和1‰活性炭的培养基中能够生成大量的根状茎,将白色的根状茎接种于1/2MS+1‰活性炭的培养基中能够先形成球茎,并进一步形成再生植株;将绿色的根状茎接种于1/2MS+6-BA 2 mg·L-1+NAA 2 mg·L-1的培养基上能够直接形成再生植株.
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抱茎苦荚菜的组织培养及植株再生
目的:探讨苦荬菜组织培养和植株再生条件.方法:以苦荬菜叶片为外植体,应用正交设计方法,对愈伤组织的诱导和分化培养基进行优化筛选.结果:佳的愈伤组织诱导培养基为MS+2,4-D 1.5 mg·L-1+6-BA 1.5 mg·L-1+NAA 1.0 mg·L-1+IBA 1.5 mg·L-1+KT 1.5 mg·L-1,佳的不定芽诱导培养基为MS+2,4-D 0.2 mg·L-1+6-BA 0.5 mg·L-1+NAA 0.5 mg·L-1+IBA 0.5 mg·L-1+KT 0.5 mg·L-1,不定芽经附加IBA 0.1 mg·L-1的1/4 MS培养基生根后移栽成活,获得再生植株.结论:建立了一套有效的苦荬菜组织培养再生体系.
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湖北麦冬花药愈伤组织诱导及再生植株的获得
目的:探讨药用植物湖北麦冬花药愈伤组织诱导和植株再生条件.方法:以湖北麦冬花药为外植体,采用MS培养基,附加不同的植物激素进行实验.常规压片法结合显微镜进行再生植株染色体的计数分析.结果:MS+2,4-D 1.0 mg·L~(-1)+KT 2.0 mg·L~(-1)诱导愈伤组织效果好,愈伤组织诱导率可达41.07%.MS+6-BA 1.5～2.0 mg·L~(-1)+NAA0.1～0.3mg·L~(-1)适于不定芽的诱导,不定芽转入附加NAA 0.1～0.3 mg·L~(-1)的1/2 MS的生根培养基上,生根后获得完整的再生植株,再生植株为体细胞起源.同时,讨论了4℃低温预处理对愈伤组织诱导的影响.结论:建立了湖北麦冬花药体细胞组织培养体系和快速繁殖途径.
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巫山淫羊藿分蘖芽组织培养研究
目的:建立巫山淫羊藿的组培快繁体系,为实现其工厂化育苗提供理论依据.方法:以巫山淫羊藿分蘖芽为外植体,MS,B5,WPM为基本培养基,添加不同浓度6-BA,NAA,GA3等植物生长调节物质,对芽的诱导与增殖条件进行了系统研究.结果:芽适宜的消毒方法为75％乙醇消毒30 s,再用0.1％ HgCl2连续2次消毒(4+2) min,污染率可控制在5％以内,存活率为75％.芽诱导适宜的培养基为WPM+ 6-BA 2.0 mg·L-1+NAA0.1 mg·L-1+GA3 0.5 mg·L-1,诱导率为75.5％,且基本培养基和6-BA对诱导率的影响达到极显著水平；芽增殖的适宜培养基为WPM+6-BA2.0mg·L-1 +NAA0.5mg·L-1,增殖系数为3.3；佳生根培养基为1/2 WPM+IBA0.5 mg·L-1 +0.05％活性炭,生根率为90％,每株3～6条根,苗生长健壮.结论:筛选出了分蘖芽适宜的消毒方法及不定芽诱导、增殖和生根适宜的培养基,建立了巫山淫羊藿分蘖芽的组培快繁体系.
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麻花秦艽组织培养及植株再生的研究
目的:研究药用植物麻花秦艽组织培养技术,为工厂化育苗提供科学依据.方法:以麻花秦艽根、茎育出的无菌苗为外植体,采用MS培养基,附加不同的植物激素进行实验.结果:以MS培养基为基本培养基,附加BA 0.5～1.0mg·L-1+NAA 0.5mg·L-1,适于丛生芽的诱导与增殖;附加IAA 1.0mg·L-1+BA 3mg·L-1,适于愈伤组织的诱导;附加IAA 1.0mg·L-1+BA 2.0～3.0mg·L-1适于愈伤组织继代培养,附加BA 2.0mg·L-1+NAA 0.5mg·L-1适于愈伤组织的分化.结论:通过诱导愈伤组织途径可以达到快速繁殖的目的.
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巫山淫羊藿离体胚培养的研究
目的:研究药用植物巫山淫羊藿组织培养技术,为工厂化育苗提供科学根据.方法:以巫山淫羊藿的种胚为外植体,采用MS培养基,附加不同浓度2,4-D,6-BA,IBA,NAA进行正交试验.结果:诱导愈伤组织的优培养基为:MS+2,4-D 2 mg·L-1 +IBA2mg·L-1+NAA 0.5 mg·L-1;愈伤组织分化的优培养基为:MS+6-BA1 mg·L-1 +NAA0.5mg· L-1+IBA 1 mg·L-1；诱导芽的优培养基为:MS+IBA2mg·L-1 +6-BA0.5 mg·L-1；芽增殖的佳培养基为:MS+ 6-BA 1.0 mg·L-1 +NAA0.5 mg· L-1.结论:通过诱导愈伤组织途径和丛生芽途径,建立了巫山淫羊藿种胚外植体诱导和培养方法,达到快速繁殖的目的.
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催眠睡茄植株再生体系的建立
目的:建立和优化催眠睡茄植株再生体系.方法:以催眠睡茄的叶片作为外植体,探讨不同植物生长物质对愈伤组织诱导,丛生芽分化以及试管苗生根的影响.结果和结论:愈伤组织诱导的佳培养基是MS+1.0mmg·L-12,4-D +0.1mg·L-1 KT;丛生芽诱导的优培养基是MS +1.0mg·L-1 6-BA +0.1 nmg·L-1NAA,试管苗生根诱导优培养基为1/2MS +0.5 mg·L-1NAA;在珍珠岩-腐殖土(1∶1)的基质中,再生植株室外移栽成活率达到92％.
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渐危药用植物珊瑚菜胚状体途径再生植株的研究
目的:研究离体条件下珊瑚菜种子休眠的原因,建立胚状体途径再生植株的方法.方法:研究离体条件下胚乳因素和外源激素在解除珊瑚菜种子休眠过程中的作用,以及激素浓度对胚性愈伤组织诱导及胚状体再生植株的影响.结果:保留1/3胚乳的珊瑚菜种子萌发率高,可以达到31％.而TDZ,6-BA,GA3处理不仅对解除珊瑚菜种子休眠的作用不大,同时容易导致出现畸形苗.在附加1.0 mg·L-12,4-D的MS培养基上,胚性愈伤的诱导率可以达到57％.将培养20d左右胚性愈伤组织转入MS培养基上40d左右就可分化形成子叶期胚状体,然后再继代培养20d即可得到再生植株.结论:建立一套有效的珊瑚菜再生植株体系.
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菱叶红景天组织培养及植株再生
目的:探索菱叶红景天组织培养与植株再生技术并优化体外繁殖体系.方法:采用正交试验设计分别研究外植体种类、植物生长物质种类和浓度对菱叶红景大愈伤组织的诱导、丛生芽的产生以及生根诱导的影响,实验数据进行极差和方差分析.结果:影响菱叶红景天愈伤组织诱导的因素依次为外植体>2,4-D>6-BA,叶片产生愈伤组织佳的培养基为MS附加2,4-D 1.5 mg·L1和6-BA 0.5 mg·L-1;影响菱叶红景大丛生芽诱导的因素依次为外植体>NAA>6-BA,茎段产生丛生芽佳的培养基为MS附加6-BA 1.5 mg·L-1和NAA 1.0 mg·L-1;试管苗生根的佳培养基为1/2MS附加IBA 1.0 mg·L-1,生根率可达90%以上,生根试管苗移栽成活率达98%以上.结论:本试验初步建立了菱叶红景天组织培养与植株再生的基本体系.
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夏枯草愈伤组织诱导和植株再生技术的研究
目的:探讨夏枯草愈伤组织诱导和植株再生条件.方法:采用正交试验法研究不同外植体、蔗糖、植物生长物质及其配比对夏枯草愈伤组织诱导和分化的影响.结果和结论:以叶片为外植体诱导愈伤效果好,茎段次之,叶柄不能诱导出愈伤组织;6-BA是影响夏枯草愈伤组织形成的主要因素;诱导愈伤组织的适宜培养基为MS+6-BA 3.0 mg·L~(-1)+NAA 0.1 mg·L~(-1)+2,4-D 0.5 mg·L~(-1)+蔗糖3%;宜于愈伤组织分化的培养基为1/2 MS+6-BA 3.25 mg·L~(-1)+NAA 1.25 mg·L~(-1)+蔗糖2%;佳生根培养基:MS+IBA 1.0 mg·L~(-1)+蔗糖3%.
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滴水珠原生质体的分离纯化与植株再生
以滴水珠的幼嫩叶片为材料,对影响原生质体分离纯化、培养及植株再生的因素进行了研究.结果表明:适合滴水珠叶片的酶解体系为13％ CPW(细胞原生质体洗液)+1.0％纤维素酶+0.1％果胶酶,pH 6.0,适宜酶解温度为25 ～28℃,酶解时间为4h;滴水珠叶肉原生质体纯化以上浮法蔗糖梯度离心效果佳,以25％的蔗糖做梯度材料,500 r·min-1离心10 min;用于培养滴水珠原生质体的培养基为MS +0.5 mg·L-1 6-BA +0.25 mg·L-1NAA 13％甘露醇,培养3d有细胞分裂启动迹象,30 d左右形成愈伤组织,转移至MS +0.5 mg.L-16-BA+0.25 mg· L-1NAA固体培养基上增殖培养,并继代数次,5～6个月后愈伤组织可分化出芽并再生植株.
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款冬叶柄愈伤组织培养与再生体系建立
以款冬幼嫩叶柄为材料,研究植物生长调节剂对其离休培养与植株再生的影响,建立了款冬离体快繁技术体系.结果表明:款冬叶柄切段较理想的灭菌方法为75％乙醇浸泡30 s,转入饱和漂白粉上清液浸泡15 min;适合愈伤诱导的培养基为MS +6-BA 3.0 mg·L-1 +2,4-D 2.0 mg·L-1,诱导率96.2％;在培养基MS +ZT2.0 mg·L-1 +NAA 0.3 mg·L-1上芽苗分化效果较好,分化率91％,平均芽数8.26个;较佳的不定芽增殖培养基为MS+KT 1.0 mg·L-1+IBA 0.3 mg·L-1,增殖倍数为11.81,平均苗高4.9 cm;生根培养基为1/2MS+ IBA 0.2 mg·L-1,生根数平均为5.68条,生根率为95.22％以上;瓶苗移栽于河沙-有机肥3∶1的基质中生长良好,成活率达90％以上;大田试验表明:同等栽培条件下款冬组培株、栽培株和野生株在生长量与花粒产量等方面存在显著差异,以组培株生长量与花粒产量相对较高.组培品与野生品有效成分含量基本一致.
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青蒿的组织培养及植株再生
目的探讨不同部位青蒿的组织培养与植株再生能力.方法以植物黄花蒿的花枝、花序及叶片为外植体,以MS培养基为基础培养基,附以不同的激素组合,进行中药青蒿的愈伤组织诱导及植株再生.结果愈伤组织的生成能力为花枝大于花序且二者均大于叶片;植株再生以花枝的培养结果佳.
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波棱瓜愈伤组织诱导及植株再生研究
目的 研究波棱瓜愈伤组织诱导、分化及生根的条件,探讨波棱瓜快速繁殖新途径,为波棱瓜组织培养与离体植株再生奠定基础.方法 以波棱瓜幼嫩茎段和叶片为材料,比较不同外植体、基本培养基及植物生长调节剂对波棱瓜愈伤组织诱导、分化及生根的影响.结果 幼嫩茎段作为外植体时,其出愈率较叶片高,愈伤量大;MS基本培养基能够产生明显的愈伤组织,出愈率较高;幼嫩茎段愈伤组织诱导适宜的培养基为MS+6-BA2 mg/L+NAA 0.5 mg/L,出愈率达93.3％.愈伤组织的佳分化培养基为MS+ 6-BA2 mg/L+ NAA 0.1 mg/L+ KT 3.0 mg/L,分化率达87.2％.生根培养的适宜培养基为1/2MS+NAA 1.0 mg/L,生根率达95％.结论 波棱瓜幼嫩茎段在适宜的培养基中可通过愈伤组织途径分化不定芽,且极易生根,能够得到正常生长发育的再生植株.
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曼陀罗种子萌发及植株再生
目的 探索曼陀罗种子萌发及组织培养条件的优化.方法 利用不同质量浓度GA3及不同处理时间的曼陀罗种子,测定其发芽率和发芽势；采用正交设计法探讨不同植物激素配比及培养基对曼陀罗再生体系建立的影响.结果 种子用60mg/L GA3浸泡10h后发芽率高,达到73.33％;叶片用75％乙醇消毒15s后用0.1％ HgCl2处理3 min时成活率高,为70.59％;以叶片为外植体诱导出愈伤组织的佳培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA,诱导率达92.5％;丛生芽诱导的适宜培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA,诱导率达到94.50％;生根为不加激素的MS培养基,15d后根系粗壮,移栽成活率达90％以上.结论 使用GA3促使曼陀罗种子快速萌发,用“两步法”建立了曼陀罗高效无菌再生体系.
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三七体细胞胚发生及植株再生过程中主要皂苷成分的累积
目的 分析以栽培三七Panax notoginseng根为外植体诱导体细胞胚发生及植株再生过程中总皂苷及3种人参皂苷(人参皂苷Rg1、Re、Rb1)的累积规律.方法 采用分光光度法分析体细胞胚发生发育过程中不同时期的总皂苷累积量；采用高效液相色谱法测定3种人参皂苷(人参皂苷Rg1、Re、Rb1)的累积量.结果 体胚苗中的总皂苷质量分数高,为7.79％,占栽培三七根(8.61％)的90.48％,质量分数低的为胚性愈伤组织,为2.47％.因材料的比生长速率存在差异,总皂苷累积效率的顺序为体胚苗＞前期体胚＞后期体胚＞胚性愈伤.对3种人参皂苷单体物质的分析显示:后期体胚中3种人参皂苷的量总和大,为7.05 mg/g,胚性愈伤组织的低,为2.78 mg/g;人参皂苷Rg1在前期体胚时质量分数达到高,为2.24 mg/g;人参皂苷Rb1在后期体胚中的质量分数达到高,为4.03 mg/g;人参皂苷Re在胚性愈伤组织中的量高,为1.21 mg/g.3种人参皂苷的总累积效率在前期体胚中达到大,为5.022 5 mg/(g.周),在体胚苗中低,为1.947 4 mg/(g·周).结论 总皂苷质量分数及累计效率均在体胚苗中达到大值；3种人参皂苷总量及总累计效率分别在后期体胚和前期体胚中达到大值.
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防风愈伤组织诱导及植株再生体系的建立
目的 建立防风Saposhnikovia divaricate再生体系.方法 研究不同外植体、温度、培养基、光照条件对诱导防风愈伤组织的影响,采用响应面试验设计,优化愈伤组织诱导及增殖的激素配比.结果 以防风的叶片为外植体,诱导愈伤组织适培养基为MS+ 6-BA 0.90 mg/L+2,4-D 1.05 mg/L+KT 0.96 mg/L,25℃恒温12 h/d光照培养;适增殖培养基为MS+6-BA 0.56 mg/L+2,4-D 0.48 mg/L+KT 0.40 mg/L,继代周期为35 d;诱导丛生芽适培养基为MS+NAA 0.6 mg/L+6-BA 1.0 mg/L;适生根培养基为MS+NAA 0.4 mg/L+6-BA 0.1 mg/L.结论 成功诱导防风愈伤组织并建立稳定高效的植株再生体系.
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黄花乌头体细胞胚胎发生及其植株再生
目的对不同植物激素及其配比对黄花乌头体细胞胚胎诱导及植株再生进行研究,为药用植物黄花乌头的资源开发提供理论依据.方法以黄花乌头的茎、叶、胚轴、胚根和子叶为外植体考察不同植物激素对黄花乌头愈伤组织诱导、体细胞胚胎发生及植株再生的影响.结果外植体接种于MS+2,4-D 1 mg/L+6-BA 0.5 mg/L的培养基上愈伤组织诱导率高,愈伤组织在MS+2,4-D 0.2 mg/L+6-BA 0.5 mg/L的培养基上连续继代几次后,分化出淡绿色具有圆锥状或原球状突起的胚性愈伤组织.胚性愈伤组织能够在MS+6-BA 2 mg/L的培养基上形成不定芽,该芽能够在MS+IBA 0.5 mg/L的培养基上生根,形成完整的再生植株.结论利用体细胞胚胎发生技术可以成功地得到再生植株,从而为濒危植物黄花乌头的资源开发和保护提供新途径.
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绞股蓝叶片分化与植株再生
目的 建立高效稳定的绞股蓝受体系统,为绞股蓝基因转化研究奠定基础.方法 以五叶绞股蓝Gynostemma pentaphyllum叶片作为外植体,采用不同配比激素的MS培养基进行诱导培养获得丛生芽,进而生根获得再生植株.结果 采用MS+6-BA 1.0 mg/L培养基时,绞股蓝叶片分化频率高(40%),MS+6-BA1.0 mg/L适合绞股蓝丛生芽继代增殖,1/2 MS适宜诱导生根获得健全再生植株.结论 为利用根癌农杆菌介导法进行绞股蓝基因转化建立了稳定的直接分化再生系统.
