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参苏饮含药血清对小鼠巨噬细胞Toll样受体及其下游信号转导通路的影响
目的:研究参苏饮含药血清对脂多糖(LPS)和聚肌胞(POLY I:C)刺激的小鼠巨噬细胞株RAW264.7表达Toll样受体3(TLR3),Toll样受体4(TLR4)及其下游信号转导通路髓样分化蛋白(MyD88),肿瘤坏死因子受体相关因子-6(TRAF-6),Toll样受体相关分子(TRAM)和Toll样受体相关的干扰素活化子(TRIF)mRNA的影响.方法:用LPS(5 μg·mL-1),POLYI:C(50 μg·mL-1)分别刺激RAW 264.7细胞株,同时给予参苏饮含药血清(11.2,6.7,4.0,2.4,1.5 g·kg-1·U-1)进行干预,ELISA法测定细胞培养上清液中炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和干扰素-β(IFN-β)的含量.先计算参苏饮IC50,然后再以IC50(11,5,2.5,4.9 g·kg-1·U-1)做为药物剂量进行干预,荧光定量PCR方法测定TLR3,TLR4和下游通路相关指标mRNA的表达,分析评价参苏饮含药血清清热解毒药效学作用的现代药理学基础.结果:参苏饮含药血清对POLYI:C刺激的TLR3及其下游通路的MyD88和TRAM有抑制作用,对LPS刺激的TLR4的病理性升高无抑制作用,但对TLR4下游通路TRAM和TRIF mRNA的表达有明显的抑制作用.以上综合作用引起炎症因子TNF-α和IFN-β的降低.结论:参苏饮清热解毒的药效学作用可能与抑制TLR3,MyD88,TRAM和TRIF等细胞因子的表达有关.
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黄连素抑制慢性心衰大鼠心肌炎性反应
目的 在慢性心衰(CHF)大鼠模型检测Toll样受体4(TLR4)的表达,探讨黄连素在慢性心衰炎性反应干预中可能的作用机制.方法 大鼠每周腹腔注射阿霉素2.8 mg/kg共10周建立慢性心衰模型,将其随机分为黄连素组、安慰剂组及对照组,每组10只.黄连素组给予黄连素每天21 mg/kg灌胃4周,另两组给予等量0.9％氯化钠注射液.用酶联吸附免疫反应法(EHSA)检测大鼠血清中BNP、TNF-α、IL-1及IL-6的含量；qRT-PCR法检测大鼠血清诱生型一氧化氮合酶(iNOS)表达；HE染色观察大鼠心肌细胞形态学改变；免疫组织化学观察大鼠心肌TLR4蛋白表达和分布.结果 黄连素组大鼠血清TNF-α、IL-1、IL-6及iNOS mRNA水平显著低于安慰剂组(P＜0.05)；黄连素组及安慰剂组TLR4吸光度值均高于对照组,而黄连素组显著低于安慰剂组(P＜0.05).结论 黄连素可能通过抑制TLR4信号传导抑制慢性心衰炎性反应.
关键词： 黄连素 慢性心力衰竭 Toll样受体4(TLR4) -
TLR4介导汉滩病毒感染的血管内皮细胞转录因子NF-κB和IRF-3的细胞核移位
目的 观察汉滩病毒(HTNV)感染的TLR4基因沉默的EVC304细胞(TLR4~-EVC304)转录因子NF-κB和IRF-3的细胞核移位情况,为抗HTNV固有免疫及其信号转导研究提供新资料.方法 用汉滩病毒76-118株分别感染TLR4~-和TLR4~+EVC304细胞,同时以LPS作为阳性对照组,无任何刺激作为阴性对照组,6 h后用间接免疫荧光方法检测NF-κB和IRF-3的细胞核移位现象.结果 汉滩病毒76-118株刺激6 b后,在TLR4~+EVC304细胞中,NF-κB和IRF-3发生细胞核移位,而在TLR4~- EVC304细胞中未出现细胞核移位现象.结论 TLR4可能介导了HTNV感染的EVC304细胞中NF-κB和IRF-3的细胞核移位.
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腺苷对脂多糖致大鼠心肌细胞肥大影响
目的 探讨腺苷对脂多糖诱导乳鼠心肌细胞肥大的影响及作用机制.方法 原代培养新生大鼠心肌细胞,以脂多糖1 mg/L诱导心肌细胞肥大,观察不同浓度腺苷对肥大心肌细胞影响,以计算机图像分析系统检测细胞体积,逆转录聚合酶链式反应法检测心房钠尿肽(ANP) mRNA,western blot法检测心肌细胞Toll样受体4(TLR4)的蛋白量,酶联免疫吸附试验检测肿瘤坏死因子(TNF-α)的含量.结果 腺苷能有效抑制脂多糖诱导的心肌肥大,与模型组比较,低、中、高剂量腺苷组细胞体积分别减小15.6％、27.1％和32.8％ (P ＜0.05),心肌细胞的ANP mRNA表达均较模型组降低(P＜0.01)；与脂多糖组比较,0.25、1、4 mg/L腺苷组TLR4蛋白表达[(0.56±0.04)、(0.47±0.02)]均降低(P＜0.05),细胞外液TNF-α含量[(30.8±4.1)、(22.7±2.9)、(19.1±3.7) pg/mL]均减少(P＜0.01).结论 腺苷对脂多糖诱导的乳鼠心肌细胞有保护作用,其机制可能与抑制TLR4表达有关.
关键词： 腺苷 脂多糖 炎症因子 肿瘤坏死因子(TNF-α) Toll样受体4(TLR4) -
Toll样受体4在C3H/HeJ小鼠军团菌感染模型中作用
目的 探讨Toll样受体4(TLR4)在军团菌感染中作用.方法 用C3H/HeJ小鼠、C3H/HeN小鼠作为实验动物,实验设C3H/HeJ、C3H/HeN染菌组及C3H/HeN对照组,染菌组气管注射军团菌悬液建立军团菌感染模型,对照组气管注射无菌生理盐水;观察主要脏器系数及肺组织病理改变,流式细胞术测定各组小鼠外周血单个核细胞(PBMC)中TLR4蛋白表达量变化.结果 肺组织病理切片显示染菌组均有炎性细胞浸润并出现肺泡血管出血现象;与C3 H/HeN对照组比较,染菌72 h C3H/HeJ、C3H/HeN染菌组小鼠肺脏、脾脏脏器系数均升高,差异有统计学意义(P＜0.05);染菌12 h时,C3H/HeJ染菌组小鼠PBMC中TLR4蛋白表达量为(48.3l±5.22),低于C3H/HeN染菌组的(113.70±17.74) (P ＜0.05),C3H/HeN染菌组与C3H/HeN对照组TLR4蛋白表达量差异无统计学意义(P＞0.05).结论 TLR4基因突变使小鼠对军团菌反应性降低,但TLR4对军团菌的抗感染作用机制仍需进一步研究.
关键词： Toll样受体4(TLR4) 军团菌 小鼠 -
TLR4与胰岛素抵抗小鼠主动脉炎性细胞因子表达
目的 探讨Toll样受体4(TLR4)对小鼠胰岛素抵抗的作用及对主动脉炎性细胞因子的影响.方法 选取出生21 d雄性C57BL/6小鼠45只,随机分为3组,每组15只,对照组(基础饲料)、高脂对照组和TAK-242组(给予高脂饲料);7个月后,行葡萄糖耐量试验(GTT)和胰岛素耐量试验(ITT);TAK-242组(胰岛素抵抗小鼠)给予TLR4抑制剂TAK-242干预5个月,采血进行GTT和ITT后,处死小鼠,收集血清和主动脉组织标本;采用实时荧光定量PCR方法检测小鼠主动脉组织TLR4的表达及其下游肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)含量;采用全自动生化分析仪测定血清总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和甘油三酯(TG)含量.结果 与对照组比较,高脂组小鼠在高脂饲喂3个月后体重明显升高,7个月后小鼠调节血糖能力受损,胰岛素敏感性降低;TAK-242干预5个月后,与高脂对照组比较,TAK-242组小鼠葡萄糖调节能力和胰岛素敏感性均有所改善;与对照组比较,高脂对照组与TAK-242组小鼠血清中TG、TC、LDL-C、HDL-C水平均明显升高(P＜0.05);高脂对照组与TAK-242组小鼠血清中TG、TC、LDL-C和HDL-C水平无明显差异;实时荧光定量PCR结果显示,高脂对照组小鼠主动脉组织中TLR4、TNF-α和IL-6表达水平[分别为(1.91±0.32)、(2.71±0.52)、(3.24±0.41)]与对照组比较[分别为(1.00±0.20)、(1.00±0.17)、(1.00±0.23)]明显升高(P＜0.01);与高脂对照组比较,TAK-242组小鼠主动脉组织中TLR4、TNF-α和IL-6表达水平[分别为(1.23 ±0.27)、(1.93 ±0.35)、(1.67±0.30)]均下调(P＜0.05).结论 高脂饮食可诱导小鼠胰岛素抵抗;胰岛素抵抗状态下,主动脉炎症的发生可能与TLR4信号通路活化有关.
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TLR4与胰岛素抵抗研究进展
Toll样受体家族(Toll-like receptors,TLRs)是哺乳动物体内唯一可以将细胞外抗原识别信息向细胞内传递并引发炎症反应的跨膜蛋白,在已发现的11种TLR中,TLR4是研究热点之一.TLR4与炎症有着密不可分的关系,胰岛素抵抗早期即处于一种慢性炎症状态,治疗胰岛素抵抗对预防Ⅱ型糖尿病有重要作用[1].1 TLR4的调节作用存在于Kupffer细胞(肝巨噬细胞)和其他巨噬细胞的脂联素刺激TLR4信号通路,激活下游腺苷酸活化蛋白激酶(adenosine monophosphate-activated protein kinase,AMPK),白介素10(interleukin-10,IL-10)和血红素氧-1,其中巨噬细胞内的AMPK可抑制脂多糖诱导核因子κB抑制蛋白(inhibitor of KB,IκB)和激活cAMP应答元件结合蛋白(cAMP response element blinding protein,CREB).活性核受体转录因子糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferators-activated receptorγ,PPARγ)和肝脏X受体α(liver Xreceptorα,LXRα)均会干扰TLR4基因转录和TLR4介导的炎症反应.
关键词： Toll样受体4(TLR4) 胰岛素抵抗 炎症 -
蝉蜕、僵蚕对系膜增生性肾小球肾炎模型大鼠肾组织Toll样受体4表达的影响
目的:观察蝉蜕、僵蚕对系膜增生性肾炎模型大鼠的治疗作用及对肾组织Toll样受体4表达的影响.方法:选用清洁级Wistar大鼠60只,随机分为正常对照组、模型组、蝉蜕高剂量组、蝉蜕低剂量组、僵蚕高剂量组、僵蚕低剂量组,采用改良慢性血清病法复制MsPGN模型,各组大鼠分别给予蝉蜕、僵蚕不同剂量颗粒冲剂灌胃,正常对照组和模型组给予等量自来水灌胃.检测各组大鼠24h尿蛋白定量,血清ALB、BUN、Cr、TC.HE染色观察各组肾组织的病理变化;免疫组化法观察各组大鼠肾脏组织中Toll样受体4的表达情况.结果:蝉蜕、僵蚕各剂量组大鼠尿蛋白明显减少,血清白蛋白不同程度升高,肌酐、尿素氮降低.肾脏病理改善,肾脏组织中Toll样受体4的表达减少.结论:蝉蜕、僵蚕能改善脂质代谢,减少蛋白尿,抑制肾小球系膜细胞的增殖,减轻系膜基质积聚,其作用机制可能与抑制肾脏组织中TLR4过度表达有关.
关键词： 系膜增生性肾炎 蝉蜕 僵蚕 Toll样受体4(TLR4) -
TLR4在冠状动脉粥样硬化性心脏病患者单个核细胞炎性反应中的作用
目的 探讨冠状动脉粥样硬化性心脏病患者外周血单个核细胞Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)介导的炎性反应及在急性冠状动脉事件中的作用.方法 连续入选研究对象,取外周血分离单个核细胞,予以脂多糖(LPS)和(或)阿托伐他汀处理.流式细胞仪检测细胞TLR4表达,ELISA法检测肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6、IL-1、IL-10水平.结果 急性冠状动脉综合征(ACS)组单个核细胞TLR4及TNF-α、IL-6、IL-1明显高于稳定型心绞痛(SAP)组、冠状动脉慢血流(CSF)组及健康对照(HC)组,而IL-10低于其他各组(P＜0.05).LPS刺激后,与HC组比较,SAP组、CSF组TLR4及TNF-α、IL-6、IL-1明显高于原有水平,IL-10低于原有水平(P＜0.05),而阿托伐他汀干预能抑制这一现象.阿托伐他汀干预ACS组可致TLR4和TNF-α、IL-6、IL-1水平下降,IL-10水平上升(P＜0.05).结论 TLR4过度表达及其炎症反应可能与ACS的发生密切相关.LPS能激活SAP患者、CSF患者单个核细胞TLR4,介导炎性反应.阿托伐他汀能抑制TLR4的过度表达及其炎性反应.
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TLR4在盐酸戊乙奎醚改善大鼠重症急性胰腺炎相关肺损伤中的作用研究
目的 探讨Toll样受体4(TLR4)调控的NF-κB及炎性因子IL-1β、IL-6在盐酸戊乙奎醚减轻大鼠重症急性胰腺炎(SAP)相关肺损伤(PALI)中的表达变化及可能作用.方法 36只健康雄性成年SD大鼠,应用随机数字表法分为三组,每组12只:假手术组(A组)、PALI模型组(B组)、盐酸戊乙奎醚(PHCD)+PALI模型组(C组).B、C组采用4％牛磺胆酸钠(1 mL/kg)逆行性胰胆管注射法建立大鼠PALI模型.C组在建立PALI模型后即刻给予大鼠腹腔内注射PHCD(0.2 mg/kg),A组和B组经腹腔注射等量0.9％氯化钠溶液.造模后12h处死大鼠,取肺组织称质量后计算肺湿干质量比(W/D),Western Blot检测肺组织TLR4的表达,免疫组织化学法检测肺组织NF-κB p65的蛋白表达,光镜下观察胰腺及肺组织病理学变化并评分,ELISA法检测肺组织的IL-1β、IL-6和血清淀粉酶水平.结果 B组和C组大鼠的胰腺组织均存在广泛的中性粒细胞浸润、腺泡出血坏死和脂肪坏死,胰腺组织损伤评分均明显高于A组(P＜0.01),而B组和C组大鼠血清淀粉酶水平及胰腺组织损伤评分比较差异无统计学意义(P＞0.05).B组和C组大鼠的肺组织W/D值均明显高于A组(P＜0.01),C组的肺组织病理学变化较B组明显改善,肺W/D值明显降低(P＜0.05).与A组比较,B、C组大鼠肺组织的TLR4表达明显升高(P＜0.01),C组大鼠肺组织的TLR4表达明显低于B组(P＜0.05).B组和C组大鼠肺组织的NF-κB p65、IL-1β、IL-6表达较A组明显升高(P＜0.01),C组大鼠肺组织的NF-κB p65、IL-1β、IL-6表达较B组明显降低(P＜0.05).结论 PHCD虽不能改变SAP胰腺组织的损伤,但可能通过影响TLR4调控的NF-κB及IL-1β、IL-6炎性因子的表达而有效减轻大鼠的PALI.
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乌司他丁对小鼠急性肺损伤保护作用及机制的研究
目的 研究乌司他丁(ulinastatin,UTI)对急性肺损伤(acute lung injury,ALI)小鼠的保护作用,并探讨其机制.方法 雄性SPF级C57/BL小鼠64只,按随机数字表均分为:健康对照组(Sham组)、Sham+UTI组、脂多糖组(LPS组)、LPS+UTI组.气管内滴注LPS建立ALI模型,Sham+UTI组和LPS+UTI组建模前30 min皮下注射UTI 10000 U/kg.监测各组小鼠72 h生存率.建模后24 h取支气管肺泡灌洗液(BALF)和肺组织,检测BALF中炎性细胞、中性粒细胞和巨噬细胞数;测定肺组织湿/干质量比(W/D);观察肺组织病理学变化并计算肺损伤评分;测定肺组织中髓过氧化物酶(MPO)活性及丙二醛(MDA)含量;测定肺组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1(IL-1)、IL-6、IL-2 mRNA水平,检测肺组织中TLR4/NF-κB表达情况.结果 LPS+UTI组小鼠生存率较LPS组明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);LPS+UTI组肺组织W/D、肺组织病理评分及肺组织中MPO活性和MDA含量较LPS组明显降低,TNF-α、IL-1、IL-6、IL-2 mRNA水平较LPS组明显降低,且TLR4/NF-κB mRNA表达水平较LPS组显著降低,差异均具有统计学意义(P<0.05或P<0.01).结论 UTI可减轻LPS诱导的ALI小鼠肺组织的炎性反应,提高ALI小鼠生存率,这可能与UTI影响TLR4/NF-κB信号通路有关.
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外源性硫化氢对小鼠动脉粥样硬化的调节作用及机制
目的 研究外源性硫化氢(H2S)通过Toll样受体4(TLR4)对ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化的调控作用及机制. 方法 制作ApoE-/-小鼠颈动脉粥样硬化不稳定斑块模型,外源性H2 S缓释剂GYY4137干预. 模型分为正常对照组?不稳定斑块组?不稳定斑块组+不同剂量GYY4137组?不稳定斑块+LY294002组. 检测小鼠血脂水平,油红染色检测粥样硬化斑块,ELISA法检测血浆炎症因子TNF-α?IL-6?IL-1和IL-10,Western blot检测斑块组织内TLR4?PI3K?Akt?磷酸化Akt(P-Akt)蛋白表达. 结果 与对照组比较,模型组脂质成分及促炎因子TNF-α?IL-6?IL-1增加,抑炎因子IL-10减少,粥样斑块内TLR4?PI3K?P-Akt蛋白表达增加(P<0.01).GYY4137中?高剂量干预减少模型组脂质成分及促炎因子TNF-α?IL-6?IL-1表达,增加抑炎因子IL-10,减少TLR4?PI3K?P-Akt蛋白表达(P<0.01).LY294002干预效果与GYY4137类似. 结论 外源性H2 S能调控TLR4及TNF-α?IL-6?IL-1?IL-10表达,防止ApoE-/-小鼠颈动脉粥样斑块发生?发展,作用与PI3K-Akt信号通路有关.
关键词： 动脉粥样硬化 硫化氢(H2S) 炎症因子 Toll样受体4(TLR4) -
硫化氢对脂多糖诱导急性肺损伤的保护作用
目的 探讨硫化氢对急性肺损伤(acute lung injury,ALI)的保护作用及其机制.方法 雄性SD大鼠共48只,随机分为脂多糖组(n=24)和脂多糖+NaHS组(n=24).3 h后检测肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性、丙二醛(MDA)含量、核转录因子-κB(NF-κB)活性、Toll 样受体(Toll like receptor,TLR) 4 mRNA、巨噬细胞移动抑制因子 (macrophage migration inhibitory factor,MIF)mRNA、肺湿质量/干质量(W/D)、肺组织的病理变化和外周血中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)的含量.结果 脂多糖+NaHS组肺损伤显著改善.与脂多糖组比较,脂多糖+NaHS组肺组织TLR4和MIF mRNA 表达降低,MPO活性、MDA含量、肺W/D下降,血浆TNF-α、IL-6含量降低.结论硫化氢可通过抑制TLR4和MIF的表达减轻ALI的肺部炎性反应.
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连续性血液滤过治疗对严重脓毒症患者炎症介质及单核细胞中TLR4和miRNA-146a的影响
目的 探讨连续性血液滤过(CBP)治疗对严重脓毒症患者血液中炎症介质、单核细胞中Toll样受体4(TLR4)和miRNA-146a的影响.方法 选择符合纳入标准的脓毒症患者40例,分为CBP组及脓毒症组,另选15例健康医务人员为对照组.动态检测患者第0、12、24、48、72 h血液中TNF-α、IL-1、IL-6水平及外周血单核细胞中TLR4 mRNA、TLR4、miRNA-146a的表达量的变化,并将TLR4 mRNA、TLR4的表达水平和miRNA-146a的表达水平进行相关性分析.结果 CBP组及脓毒症组TNF-α、IL-1及IL-6的分泌水平较治疗前皆有不同程度下调(P＜0.05),CBP组下调幅度明显大于脓毒症组.CBP组随着治疗的进行,TLR4 mRNA、TLR4及miRNA-146a的表达水平较治疗前有所下调(P＜0.05),在第24 h前只有小幅度下调,而在第48 h才出现明显下调；脓毒症组在治疗后第72 h才出现小幅度下调.CBP组miRNA-146a表达水平与TLR4 mRNA、TLR4的表达水平呈正相关(P ＜0.001).结论 CBP不仅能有效地清除脓毒症患者循环中高浓度的炎症因子,同时还可以对参与炎症反应发生和发展的相关分子,如TLR4及miRNA-146a进行调节,从而发挥对脓毒症的治疗作用.
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丹参注射液对糖尿病大鼠肾小管TLR4蛋白表达的影响
目的 研究丹参注射液对糖尿病大鼠肾小管Toll样受体4(TLR4)蛋白表达的影响.方法 高糖高脂饲料联合腹腔注射链脲佐菌素建立大鼠糖尿病模型,40只大鼠随机分为正常组、模型组、二甲双胍组、丹参注射液组,每组10只.给药6周后,HE染色观察大鼠肾组织病理变化,免疫组化染色观察TLR4蛋白表达,Western blot检测高糖环境下大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E)增殖及TLR4蛋白表达.结果 丹参注射液缓解了大鼠肾小管病变.与模型组比较,丹参注射液组TLR4蛋白表达显著降低(P＜0.01);高糖环境下其质量浓度为30 mg/mL时可显著促进NRK-52E细胞增殖(P＜0.05),并呈剂量依赖性地显著降低TLR4蛋白表达(P＜0.05,P＜0.01).结论 丹参注射液可保护糖尿病大鼠肾小管,降低高糖环境下NRK-52E细胞TLR4蛋白表达,从而改善糖尿病肾病.
关键词： 丹参注射液 糖尿病 肾小管 Toll样受体4(TLR4) -
中药通过调控TLR4介导的信号转导通路防治缺血性脑卒中的研究
脑缺血后所致的炎症级联反应在脑损伤中具有重要的作用.Toll样受体4(TLR4)介导的信号转导通路参与了脑缺血再灌注的炎症损伤,热休克蛋白70 (HSP70)作为TLR4内源性配体,与TLR4结合,通过信号级联传导,参与脑损伤的病理生理过程.近年来许多中药用于治疗缺血性脑卒中的研究,本文就中药调控TLR4介导的信号转导通路防治缺血性脑卒中的研究进展作一综述.
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婴幼儿呼吸道合胞病毒(RSV)肺炎Toll样受体4(TLR4)的检测及分析
目的 观察婴幼儿呼吸道合胞病毒(RSV)肺炎急性期外周血单核细胞表面TLR4的表达以及TLR4表达和急性感染期疾病严重程度之间的关联,并对RSV感染的发病机制作讨论.方法 应用直接免疫荧光法对2374例急性呼吸道感染患儿鼻咽分泌物标本进行RSV病毒抗原检测,对其中40名婴幼儿鼻咽部脱落上皮细胞RSV阳性患儿,用流式细胞仪检测其外周血单核细胞表面TLR4的表达,同时设30名同龄健康儿童为对照组.结果 1岁以内患儿RSV阳性率为50.89%,男性阳性比例高于女性,但阳性率无显著性差异(χ2=2.106,P>0.05);患儿组TLR4为87.57%±7.49%,对照组TLR4为54.92%±4.21%,两者存在显著性差异(P＜0.05).结论 ①RSV是婴幼儿期间的急性下呼吸道感染的主要病原体.②RSV阳性肺炎感染患儿早期外周血单核细胞表面TLR4表达明显升高.
关键词： 呼吸道合胞病毒 Toll样受体4(TLR4) 流式细胞 婴幼儿 -
金欣口服液对RSV感染细胞TLR4及TNF-α表达的影响
目的 研究开肺化痰清热止咳中药金欣口服液对呼吸道合胞病毒(RSV)感染的Hep-2细胞TLR4及该通路下游细胞因子TNF-α表达的影响.方法 制备血行药物成分溶液,作用于RSV感染的Hep-2细胞,通过RT-qPCR、免疫荧光标记结合激光共聚焦技术及ELISA法,分别观察分析细胞TLR4 mRNA、蛋白和相关细胞因子的表达水平,分析药物作用机制.结果 与病毒对照组比较,金欣口服液作用于RSV感染的Hep-2细胞后,TLR4 mRNA及蛋白表达显著降低,TNF-α表达显著降低,细胞病变程度减轻.结论 金欣口服液含药血清可以通过下调TLR4和TNF-α表达水平减轻感染RSV后Hep-2细胞的病变程度.
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TLRs与NF-kB在大鼠骨关节炎滑膜中的表达及意义
目的:探讨不同造模时间下大鼠滑膜组织中的Toll样受体(Toll-like Receptors,TLRs)和核因子-kB(NF-kB)在骨关节炎(Osteoarthritis,OA)病程中的内在联系,研究其表达特点及变化规律.方法:将80只Wistar大鼠随机分为5组,每组16只.模型组大鼠利用经典Hulth法建立2,4,6周膝OA动物模型,同样方式切开假手术组皮肤及关节囊进入关节腔,空白对照组不予手术.按期提取滑膜样本,对其进行形态学观察并用实时PCR法检测各组滑膜组织中TLR2,TLR4及NF-kB的表达.结果:重度OA模型中的TLR2表达显著增加(P＜0.05);随着造模时间的延长,TLR4的表达逐渐受到抑制(P＜0.05);NF-kB在2,4,6周模型组中均大量袁达(P＜0.05),且表达量与造模时间成正比.结论:大鼠膝关节OA模型造模成功,OA病程时间与TLR2,TLR4和NF-kB的表达之间存在显著的相关性,三者是导致OA发生的重要影响因子.
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急性脑梗死患者TLR4/NF-κB信号通路水平与脑血流量的相关性研究
目的 评价急性脑梗死患者血清中toll 样受体4(TLR4)和核转录因子(NF-κB)信号通路水平与脑血流量的相关性.方法 选取在本院接受治疗的100例大脑中动脉(MCA)供血区域脑梗死患者作为试验组,再选取同期接受体检健康的100例正常人作为对照组,采用免疫组织化学方法检测2组患者的TLR4和NF-κB水平,分析2组研究对象的大脑前动脉(ACA)、MCA收缩期血流峰值与TLR4、NF-κB的相关性.结果 试验组ACA血流峰值(55.54±4.22)cm/s高于对照组(48.65±3.54)cm/s(t=9.145,P<0.001),而试验组MCA血流峰值(132.45±5.65)cm/s低于对照组(141.54±3.54)cm/s(t=8.436,P<0.001).试验组TLR4水平(4.29±0.46)ng/mL及NF-κB水平(144.43±23.67)ng/mL均高于对照组TLR4(3.65±0.57)ng/mL及NF-κB(115.63±24.45)ng/mL(t=5.861、5.677,P=0.012、0.0018);TLR4及NF-κB水平与ACA血流速度呈正相关,与MCA血流速度呈负相关(P<0.05).结论 急性脑梗死患者MCA、ACA血流峰值与TLR4及NF-κB水平存在相关性.
