首页 > 文献资料
-
丹芍化纤胶囊对体内外活化肝星状细胞增殖的影响
目的:研究中药复方制剂丹芍化纤胶囊对体内外活化肝星状细胞(HSCs)增殖的影响.方法:(1)体内实验:雄性Wistar大鼠57只分为正常组、模型组、治疗组.除正常组外,其余各组采用CCl4、饮酒、高脂低蛋白饮食等复合病因刺激制备肝纤维化动物模型8周,然后治疗组给予丹芍化纤胶囊(1g/kg体重)灌胃治疗8周.实验结束时部分大鼠用于测定肝功能及肝脏纤维化程度;部分用于分离HSCs,流式细胞仪检测细胞周期百分比.(2)体外实验:制备丹芍化纤胶囊大鼠药物血清;分离培养大鼠HSCs,并分为小牛血清组、正常大鼠血清组、丹芍化纤药物血清组,分别加入5%、10%、20%以上3种血清干预培养的HSCs,MTT比色法测定原代HSCs增殖情况.结果:(1)体内实验:治疗组较模型组肝功能、肝脏纤维化程度及HSCs增殖明显减轻.(2)体外实验:丹芍化纤药物血清组较同浓度小牛血清组、正常大鼠血清组明显抑制HSCs增殖,且此作用呈剂量依赖性.结论:丹芍化纤胶囊能显著抑制体内外HSCs增殖.
-
高瘦素影响小鼠细胞因子分泌及脾淋巴细胞增殖的实验研究
目的:探讨高瘦素(Leptin)水平在不同免疫状态下对小鼠细胞因子分泌及脾淋巴细胞增殖状况的影响.方法:选用8周龄的清洁级BALB/c雄性小鼠共50只,分成5组,分别腹腔注射外源性鼠Leptin和Leptin抗体,形成小鼠的不同Leptin水平状态;应用普乐可复(FK506)将小鼠分为正常免疫和免疫抑制状态两类,两种状态各设对照组,测定脾淋巴细胞增殖情况,ELISA方法检测外周血中IL-2、IL-4、IFN-γ和Leptin的浓度.结果:正常免疫状态下,Leptin组的脾细胞增殖与对照组无差异,细胞因子除IFN-γ升高外, IL-2、IL-4均无差异;Leptin抗体组显示脾细胞增殖能力下降,各细胞因子测定显示差异;免疫抑制状态下,Leptin组的IL-2、IFN-γ水平上升、IL-4分泌降低,这种结果也在几乎所有体外加入Leptin的各组中出现.结论:Leptin可以起免疫调节作用,增加IFN-γ、IL-2的合成,降低IL-4的产生,使免疫应答向Th1细胞方向偏离.在正常免疫状态下,Leptin的免疫调节作用不明显,而在免疫抑制情况下,这种调节作用得到体现.
关键词： 瘦素/药理学 细胞因子类/药物作用/代谢 细胞增殖/药物作用 脾/细胞学 人类 -
辛酰化和非酰化ghrelin对胰岛β细胞的作用
目的:探讨辛酰化和非酰化ghrelin对胰岛β细胞的作用及其作用途径.方法:分别用不同浓度辛酰化ghrelin及非酰化ghrelin作用于NIT-1胰岛β细胞,48 h后观察二者是否有促进胰岛β细胞增殖的作用,并随后用阻断剂NF449分别与辛酰化ghrelin及非酰化ghrelin共同作用于NIT-1胰岛β细胞,验证二者促进增殖作用途径是否为Gαs途径.结果:MTT法结果提示10-9～10-7 mol/L ghrelin和10-10～10-7mol/L非酰化ghrelin均能促进胰岛β细胞增殖,并且二者都是通过Gαs途径促进胰岛β细胞增殖.结论:辛酰化ghrelin和非酰化ghrelin都通过Gαs途径促进胰岛β细胞增殖.
关键词： 肽类激素/药理学 胰岛/细胞学/药物作用 细胞增殖/药物作用 -
苦参素对人食管癌Eca-109体外细胞增殖活性影响研究
目的:探讨苦参素对人食管癌Eca-109细胞增殖活性的影响.方法:运用MTT和流式细胞术分别检测细胞增殖率和细胞周期变化.结果:苦参素对Eca-109细胞持续作用48 h后,细胞增殖率由100%降为9.64%(P<0.001);细胞周期结果显示,G0/G1期细胞明显增多,S期细胞明显减少,与阴性对照组和阳性对照组比较,差异具有显著性(P<0.05).结论:苦参素对人食管癌Eca-109细胞增殖活性具有抑制作用,其作用机制与细胞周期阻滞于G0/G1期有关.
关键词： 苦参碱/药理学 食管肿瘤/病理生理学 细胞增殖/药物作用 人类 -
葛根素对MCF-7细胞的雌激素样促增殖作用
目的 以乳腺癌细胞株MCF-7 为靶细胞,考察葛根素对其细胞形态及增殖的影响.方法 以人乳腺癌细胞株MCF-7 为靶细胞,以雌酚酮1×10-8mol/L 为阳性对照,同时设空白对照组,葛根素干预组分为1×10-8mol/L、1×10-7mol/L、1×10-6mol/L 三个浓度组.①调整细胞浓度为4×104 个/L,接种于12 孔培养板上.48h 后,倒置显微镜下观察细胞形态变化.②调整细胞浓度为2×104 个/L,接种于96 孔培养板,采用四唑盐法测定各孔的吸光度,计算平均增殖率.上述实验每组均设8 个复孔.③调整活细胞浓度为0.9×104 个/ml,接种于24 孔培养板.24h 后,每组设12 个复孔.每天随机从每组细胞中各选出3 个孔,染色后在光镜下计数活细胞数,取平均值.连续计数3 天,以时间为横坐标,活细胞数为纵坐标,作图得细胞生长曲线.结果 经葛根素1×10-7mol/L、1×10-6mol/L 处理后第1天、第2 天和第3 天,与空白对照组相比,增殖速度均加快.结论 葛根素可剂量依赖地促进MCF-7 细胞的增殖,提示其具有弱雌激素样作用.
关键词： 葛根素/药理学 乳腺癌细胞/药物作用 细胞培养 细胞增殖/药物作用 -
GPR30在子宫平滑肌瘤细胞增殖中的作用研究
目的 探讨跨膜G蛋白偶联受体30(G protein-coupled receptor 30,GPR30)在子宫平滑肌瘤细胞中的表达及其对肌瘤中平滑肌细胞的增殖作用.方法 培养子宫平滑肌瘤原代细胞,应用免疫组织化学、免疫荧光及蛋白质印迹法检测GPR30的表达.应用蛋白印迹检测GPR30干扰后,其下游信号通路的变化.应用MTT检测在雌激素刺激下,正常子宫平滑肌细胞及平滑肌瘤细胞的生长活性.结果 子宫平滑肌瘤细胞中有GPR30蛋白的高表达,其主要位于细胞质中,在细胞核上无明显表达.在未处理组平滑肌细胞中,雌激素刺激雌激素信号通路中的ERK1/2表达增强.在GPR30干扰后的平滑肌细胞中,雌激素刺激后ERK1/2表达无显著改变.MTT结果表明在雌激素作用下,未处理组细胞存活和生长率显著增加;干扰组细胞的存活和生长率显著下降.结论 GPR30在子宫肌瘤平滑肌细胞的细胞质中高表达,可能参与子宫平滑肌细胞的增殖.
-
丙戊酸钠对Burkitt淋巴瘤Raji细胞增殖的影响及机制
目的 研究丙戊酸钠对Burkitt淋巴瘤Raji细胞增殖的影响及其机制.方法 细胞计数法检测不同浓度丙戊酸钠处理Raji细胞后细胞的增殖活性,制作生长抑制曲线.流式细胞仪检测细胞周期和凋亡率.Westernblot检测细胞周期蛋白cyclin D1和p21、凋亡抑制基因survivin的变化.结果 丙戊酸钠能明显抑制Raji细胞的增殖,其作用表现为剂量依赖性和时间依赖性(P＜0.01).流式细胞仪检测发现以3 mmol/L的丙戊酸钠处理Raji细胞后细胞阻滞于G0/G1期,其凋亡率呈时间依赖性上升(P＜0.01).Western blot检测发现3 mmol/L丙戊酸钠处理后Raji细胞cyclin D1表达明显下调而p21表达明显上调(均P＜0.05).survivin表达显著下降(P＜0.01).结论 丙戊酸钠对人Burkitt淋巴瘤Raji细胞具有明显的增殖抑制作用,其作用机制与细胞周期和诱导凋亡有关.
-
纳米银对人肺癌A549细胞增殖的影响及其作用机制
目的 探讨纳米银对人肺癌A549细胞毒性的影响及其作用机制.方法 通过显微镜观察纳米银对A549细胞形态的变化.MTT法检测不同浓度纳米银对A549细胞增殖的影响.流式细胞仪检测纳米银对A549细胞周期阻滞的影响.Westemblot和免疫组织化学法检测纳米银对A549细胞凋亡蛋白表达的影响.结果 与对照组比较,随着纳米银药物浓度的增加,A549细胞抑制率显著增加,其半数抑制率为(74.23 ±4.17) mg/L.纳米银作用于A549细胞G2/M期,纳米银中、高浓度明显上调细胞周期调控p21、p53基因的表达;纳米银可抑制Bcl-2蛋白的表达,对caspase-3有活化作用.结论 体外细胞实验证实,纳米银通过抑制A549细胞G2/M期,使p21、p53基因表达紊乱,诱导凋亡因子表达,通过多靶点作用抑制细胞生长.
-
二烯丙基二硫对人胶质瘤U251细胞增殖及细胞周期的影响
目的 研究二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)对人恶性胶质瘤U251细胞增殖及细胞周期的影响.方法 采用MTT法、流式细胞术等方法检测DADS对U251细胞的增殖抑制及细胞周期的影响.免疫细胞化学、qRT-PCR与Western blot检测cyclin B1与c-Myc表达.结果 MTT法显示,15、30、45、60 mg/L DADS处理U251细胞48小时后,生长抑制率分别为22.0％、38.8％、49.2％、55.3％,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05).流式细胞术结果显示,15、30、45、60 mg/L DADS作用U251细胞48小时后,G2/M期细胞分别为(14.1±1.2)％、(25.0±0.6)％、(41.2±1.4)％、(53.5±3.3)％,较对照组(9.6±0.9)％差异具有统计学意义(P＜0.05).免疫细胞化学显示,45 mg/L DADS处理U251细胞48小时后,cyclin B1与c-Myc蛋白平均光密度值分别从0.52±0.09、0.56±0.08显著下降至0.23 ±0.02、0.39+0.04 (P ＜0.05).qRT-PCR结果显示,cyclin B1与c-Myc mRNA表达分别下调42.0％与63.0％ (P ＜0.05).Western blot结果显示,cyclin B1、c-Myc蛋白与β-actin的平均灰度值比分别为1.12±0.14与1.20 ±0.15,明显低于对照组1.74 ±0.15与2.23 ±0.19(P ＜0.05).结论 DADS可明显抑制恶性胶质瘤U251细胞增殖与阻滞G2/M期,机制与下调cyclin B1、c-Myc有关.
-
MicroRNA-21靶向PDCD4对胃癌细胞增殖及凋亡的影响
目的 探讨MicroRNA-21对胃癌细胞中PDCD4表达、细胞增殖与凋亡的影响.方法 将MGC-803人胃癌细胞分为5组,分别为空白对照组(不转染)、阴性对照组(转染不相关siRNA),mir 21组(转染miRNA-21质粒),mir 21 Inhibitor组(转染miRNA-21抑制物)、PDCD4 siRNA组(转染PDCD4 siRNA).分别于转染后36、48、72小时收集细胞,采用实时定量PCR及细胞爬片免疫组织化学检测细胞中PDCD4基因及蛋白水平,运用MTS法检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞凋亡.结果 与空白、阴性对照组比较,mir 21组PDCD4表达量下降,细胞增殖能力增强(均P＜0.05);mir 21 Inhibitor组PDCD4表达量增多(P＜0.05),细胞增殖受到抑制(P＜0.01),细胞总凋亡比例增高(P＜ 0.05);PDCD4 siRNA组PDCD4表达几乎完全被抑制,细胞增殖能力增强(均P＜0.01),36小时时细胞总凋亡比例减少(P＜0.05).而阴性和空白对照组比较,细胞PDCD4表达量、细胞增殖与凋亡都无明显差异(P＞0.05).结论 MicroRNA-21能靶向调控PDCD4,抑制胃癌细胞MicroRNA-21的表达后可上调PDCD4表达,发挥抑制细胞增殖并诱导细胞凋亡的作用.
-
125I联合ADM对乳腺癌MCF-7细胞增殖、凋亡的影响
目的 研究放射性粒子125I联合化疗药物多柔比星(阿霉素,ADM)对乳腺癌MCF-7细胞增殖、凋亡的影响.方法 按2×2析因设计将乳腺癌敏感株MCF-7细胞随机分成A、B、C、D 4组,A组:空白对照组;B组:单纯125I粒子组;C组:单纯ADM组;D组:125I粒子+ADM组.采用流式细胞术检测各组干预后的细胞周期分布及细胞凋亡率.结果 (1)单纯125I粒子近距离低剂量率持续照射后将MCF-7细胞阻滞于G2～M期.125I联合ADM将 MCF-7细胞周期主要集中在G0～G1期,同时伴有较大比例的细胞凋亡.(2)各组细胞的早期凋亡率分别为:A组(0.99±0.05)%、B组(19.22±4.92)%、C组(16.57±4.73)%、D组(3.16±1.08)%;各组晚期凋亡及坏死率为:A组(0.32±0.18)%、B组(3.16±1.39)%、C组(3.24±0.75)%、D组(28.99±7.96)%,D组晚期凋亡及死亡率明显提高.结论 125I放射性粒子能有效诱导乳腺癌细胞凋亡,与化疗药物ADM联合作用除诱导细胞凋亡,还可导致大量细胞死亡,具有协同、增效的作用.
-
奈达铂联合顺铂对人食管癌细胞株(Eca-109)抑制作用机制的研究
目的 研究奈达铂(NDP)联合顺铂(DDP)对人食管癌细胞株Eca-109的增殖及凋亡的影响,并探讨其机制.方法 采用MTT法检测NDP联合DDP对Eca-109细胞的增殖抑制率,中效原理法判断联合用药的相互作用;采用RT-PCR和蛋白印迹法分析Ki-67及Bax表达的变化.结果 NDP、DDP均明显抑制Eca-109细胞的生长,且呈剂量依赖性;两者联合使用低浓度时呈拮抗效应,高浓度时呈协同效应;IC50浓度的NDP、DDP和1/2 IC50(NDP)+1/2 IC50(DDP)对Eca-109细胞的抑制率分别为(41.9±4.1)%、(47.4±2.9)%和(52.5±0.9)%;与单独用药组比较,联合用药组Ki-67基因(蛋白)表达显著降低,而Bax基因(蛋白)表达显著增高.结论 1/2 IC50浓度NDP和DDP联合应用与两药IC50浓度单独应用相比,对Eca-109细胞增殖的抑制作用和诱导凋亡能力均有明显增强.
-
BDNF AS对肝癌细胞增殖和迁移能力的影响
目的 探讨脑源性神经营养因子反义长链非编码RNA(brain-derived neurotrophic factor antisense long noncoding RNA,BDNF AS)对人肝癌细胞增殖和迁移能力的影响.方法 采用BDNF AS过表达质粒及空载体瞬时转染肝癌细胞株HepG2和MHCC 97-H,采用实时PCR方法检测BDNF AS在肝癌细胞中的表达水平,采用3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulfophenyl)-2H-tetrazolium (MTS)方法检测细胞增殖情况,采用碘化丙啶(propidium iodide,PI)染色流式细胞术检测细胞周期变化,采用划痕实验和transwell小室评价细胞迁移能力的变化.结果 HepG2和MHCC 97-H细胞转染BDNF AS过表达质粒后BDNF AS和mRNA表达均上调(均P＜0.01).转染第4天,细胞增殖均受到抑制(均P＜0.05).转染48 h后,HepG2和MHCC 97-H细胞均出现S期阻滞(均P＜0.01),细胞的迁移能力均下降(均P＜0.01).结论 BDNF AS过表达抑制肝癌细胞的增殖和迁移,可能对肝癌细胞的生长运动具有重要的负性调控作用.
-
多西环素对小细胞肺癌H446细胞增殖及HIF表达的影响
目的 探讨多西环素对小细胞肺癌H446细胞增殖及HIF-1α和HIF-2α表达的影响.方法 采用MTT法检测多西环素对H446细胞增殖抑制作用.采用倒置相差光学显微镜观察多西环素对细胞凋亡形态的影响.通过流式细胞仪合并CellFit软件对细胞周期分布进行分析,采用Annexin Ⅴ-FITC荧光染色检测细胞凋亡率.采用细胞健康分析软件检测细胞内线粒体膜电位.实时荧光定量PCR检测HIF-1α和HIF-2α表达.Western blot法检测凋亡相关蛋白表达.结果 多西环素(2.5、5、10、20、40、80 mg/L作用24或48小时)呈剂量-时间依赖性抑制H446细胞增殖.经光学显微镜可明显观察到多西环素能导致H446细胞凋亡,呈时间-剂量依赖性.流式细胞仪结果显示,10、20、40 mg/L多西环素作用48小时能阻滞H446细胞周期S期,并且随着细胞凋亡率增加,呈剂量依赖性.浓度为10、20、40 mg/L多西环素作用48小时的细胞线粒体膜电位低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);经10、20、40 mg/L多西环素作用48小时的细胞HIF-1 α、HIF-2α mRNA表达均低于对照组(均P＜0.05),HIF-1α 、HIF-2d蛋白表达量低于对照组,且HIF-1 α和HIF-2α变化趋势均相同,随着多西环素浓度增加、表达量降低(P＜0.05).结论 多西环素对小细胞肺癌H446细胞具有增殖抑制作用,且呈剂量-时间依赖性,可阻滞细胞于S期,降低线粒体膜电位,下调HIF-1α、和HIF-2d蛋白表达,且伴随有H446细胞凋亡的现象.
-
半枝莲不同极性提取物对人胚肾细胞体外活性的影响
目的 观察抗肿瘤中药半枝莲不同极性提取物对人胚胎肾脏细胞体外活性的影响.方法 分别提取半枝莲的水、乙醇、甲醇、乙酸乙酯和正丁醇等5种提取物,用高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)检测不同极性提取物的成分差异,用MTT法测定半枝莲不同极性提取物对人胚胎肾脏细胞HEK293增殖的影响.结果 半枝莲不同极性提取物组成呈现明显差异,乙醇提取物与甲醇提取物的组成较为相似,而正丁醇提取物与乙酸乙酯提取物较为相似,水提取物则与其他提取物均存在较大差异.细胞活性试验表明,水、乙酸乙酯和正丁醇提取物(0.01、0.1、1、20 g/L)培养48小时后对HEK293的体外增殖无明显影响,而用浓度为0.01、0.1、1、20g/L的甲醇提取物和0.1、1、20 g/L的乙醇提取物培养48小时后对细胞增殖则呈现一定程度的抑制(均P＜0.05).结论 本研究提示,抗肿瘤中药半枝莲的水、乙酸乙酯和正丁醇提取物对肾细胞活性无影响,而甲醇和乙醇提取物存在细胞活性抑制现象.
-
外源性白介素24促进C6细胞凋亡的体外研究
目的 探讨外源性白细胞介素24(interleukin 24,IL-24)体外抑制胶质瘤细胞增殖及促凋亡的相关机制.方法 应用MTT体外观察转染IL-24对胶质瘤C6细胞增殖的抑制作用.应用Hoechst 33258荧光染色体外观察IL-24对C6细胞的促凋亡作用.Western blot法检测c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)和caspase-3蛋白的表达变化情况.结果 IL-24能使C6细胞的体外增殖能力降低,转入IL-24的C6细胞(C6/IL-24)增殖能力下降.经Hochest 33258染色,转入IL-24的C6细胞凋亡后出现核固缩、染色质凝集呈块或碎裂状改变.与转入空载体的C6细胞(C6/pLXSN)及C6细胞比较,C6/IL-24细胞的JNK和caspase-3蛋白表达均增高(均P＜0.05).C6/pLXSN与C6细胞比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 外源性IL-24基因可抑制C6胶质瘤细胞的增殖并诱导其凋亡,该诱导凋亡的作用可能与其上调并激活JNK及caspase-3表达有关.
-
雷帕霉素对兔晶状体上皮细胞增殖的影响
目的 研究雷帕霉素(rapamycin)对培养的兔晶状体上皮细胞增殖的作用及其对细胞周期的影响.方法 将传代的兔晶状体上皮细胞用含不同雷帕霉素浓度的培养液培养24 h后,用MTT法测定5 ng/ml、10 ng/ml、20 ng/ml、40 ng/ml、80 ng/ml雷帕霉素浓度组及对照组细胞的增殖情况;用流式细胞仪测定20 ng/ml雷帕霉素浓度组及对照组细胞周期的变化情况.结果 用5 ng/ml的培养液培养细胞时,细胞增殖受到抑制(P＜0.05),随药物浓度增加,细胞增殖受抑制越明显;用10 ng/ml的培养液培养细胞时,细胞增殖明显受到抑制(P＜0.01).细胞周期分析显示,雷帕霉素(20 ng/ml)作用后,G0/G1期细胞较对照组增多(由51.72%增加到61.63%),S期细胞较对照组减少(由34.92%减少至10.85%).结论 雷帕霉素具有抑制兔晶状体上皮细胞增殖的作用,且随浓度增加抑制作用增强.雷帕霉素将细胞抑制在G1期的限制点内.
-
Evn-50对人乳腺癌MCF-7耐三苯氧胺细胞株生长和凋亡的影响
目的:通过研究黄荆子的乙酸乙酯提取物Evn-50在体外对人乳腺癌MCF-7和耐三苯氧胺细胞株(MCF-7/TAM-R)的生长和凋亡的影响,探索Evn-50在逆转乳腺癌耐药中的作用及其可能机制.方法:构建MCF-7/TAM-R细胞系,分别用DMSO、5μmol/L TAM、5μmol/L TAM+50μg/ml Evn-50和50 μg/ml Evn-50处理细胞.然后,采用MTT法测定细胞存活率,PI单染流式细胞术检测细胞凋亡率及细胞周期分布情况,免疫蛋白印记法观察Evn-50和TAM单独或联合作用时的机制.结果:Evn-50单药或与TAM联合均可以降低人乳腺癌MCF-7和三苯氧胺耐药细胞株MCF-7/TAM-R的存活率,两药联合作用更为明显,同单用TAM组相比差异有统计学意义(P＜0.01).Evn-50单药或与TAM联合应用对两株细胞的凋亡均有明显影响,且随着作用时间的延长细胞凋亡逐渐增多,其中以72 h时细胞凋亡率和G2期细胞比例为明显(P＜0.01).TAM和Evn-50联合处理无论是对MCF-7细胞还是对三苯氧胺耐药细胞MCF-7/TAM-R,均能明显下调p-AKT( Ser473)和p-MAPK44/42( Thr202/Tyr204)蛋白水平.结论:Evn-50能够抑制MCF-7和MCF-7/TAM-R细胞株的生长并诱导细胞凋亡,尤其在Evn-50与TAM联合处理时更为明显.其作用机制可能与AKT和MAPK信号通路的下调相关,但需要进一步研究证实.
-
二氢青蒿素抑制大鼠胶质瘤C6细胞增殖和诱导凋亡
目的:研究二氢青蒿素(dihydroartemisinin,DHA)对大鼠胶质瘤细胞(C6细胞)增殖和凋亡的影响.方法:在培养的C6细胞,加入DHA 1～125 μmol/L作用24、48、72 h.以台盼蓝染色计数和噻唑蓝(MTT)还原反应,观察细胞增殖和活性;以Hoechst 33342染色,观察细胞凋亡;以H2DCFDA氧化试验检测细胞内活性氧自由基(reactiVe oxygen species,ROS)变化.结果:DHA 5～125 μmol/L浓度及时间依赖性抑制C6细胞的增殖,作用48 h后的IC50是23.4μmol/L;5～25 μmol/L能诱导细胞凋亡(P＜0.05);5～125 μmol/L DHA可增高细胞内的ROS(P＜0.01).结论:DHA能够抑制C6细胞增殖,并诱导其凋亡,其细胞毒作用与细胞内ROS增加相关.
-
霉酚酸对人骨髓来源间充质干细胞的作用
目的:研究霉酚酸( mycophenolic acid,MPA)对人骨髓来源的间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)的作用及其机制.方法:在MSCs生长和分化过程中加入不同浓度的MPA,用CCK-8方法分析MSCs增殖的情况,用Annexin V/PI双染色法检测MPA各浓度组的细胞凋亡,RT-PCR方法分析MSCs次黄嘌呤核苷酸脱氢酶(IMPDH)的表达；应用von Kossa染色、钙定量和real-time PCR方法分析MPA对MSCs成骨分化的影响.结果:1～100 μmol/L的MPA呈时间浓度依赖性地抑制间充质干细胞的生长,添加鸟嘌呤核苷可以解除该抑制效应,且该抑制效应与细胞凋亡无关；RT-PCR结果显示,MSCs表达IMPDH I和IMPDH Ⅱ两种亚型；yon Kossa染色和钙定量显示,MPA抑制MSCs的成骨分化,Osteopontin和BMP-2的表达相应减低；进一步研究发现,MPA可能通过影响转录因子Runx2、Osterix的表达而影响MSCs的成骨分化.结论:MPA通过耗竭鸟嘌呤核苷的方式呈时间浓度依赖性抑制人骨髓来源的间充质干细胞的增殖；同时,MPA通过抑制Runx2和Osterix蛋白的表达,抑制MSCs的成骨分化.
