髓过氧化物酶胶乳增强免疫比浊检测法的建立

目的 建立一种可用全自动生化分析仪定量检测血浆中髓过氧化物酶浓度的胶乳增强免疫比浊法,用于心脑血管疾病的预测和辅助急性冠脉综合症诊断.方法 针对三个厂家的7株单克隆抗体,采用每株抗体单独与胶乳颗粒交联,逐一配对的方法,筛选出佳的两株单克隆抗体组合.进一步对胶乳颗粒的粒选、反应体系进行筛选和优化.评价本方法的重复性,线性,灵敏度,抗干扰能力和回收率,并进行了大量的样本检测.结果 筛选到两株适单克隆抗体,使单克隆抗体与胶乳颗粒通过化学交联的模式连接,建立了用于髓过氧化物酶检测的胶乳增强免疫比浊法.该方法的灵敏度:LoB＝4ng/mL,LoD=6ng/mL,LoQ=12ng/mL;批内变异系数(CV):2.85％;批间变异系数(CV):3.45％;平均回收率:100.0％±1.2％;参考值范围:54～266ng/ml.结论 本法可用全自动生化分析仪定量检测髓过氧化物酶,具有较高的灵敏度和稳定性,操作简单,在心脑血管疾病的预测和辅助诊断中有很好的应用前景.

1例头面部污染橡胶乳患者术前头部备皮方法

天然橡胶乳为乳白色黏稠样胶体,主要成分为聚异戊二烯,凝固后具有高弹性、不透水等特点.2007年11月我科收治了1例头面部污染橡胶乳颅脑挫伤并脑疝形成患者,我们根据橡胶乳的特性,成功、快速地完成了手术前的头部备皮工作.

417 大戟属植物Euphorbia characias胶乳对酮康唑抗白念珠菌的增效作用

金刚綦胶乳中的三萜类成分及其对爱-巴病毒活性的抑制

胶体金标记技术在免疫检测中的应用与发展

胶体金标记技术是以胶体金作为示踪标志物或显色剂,应用于抗原抗体反应的一种新型免疫标记技术[1].由于它不存在内源酶干扰及放射性同位素污染等问题,且利用不同颗粒大小的胶体金还可以作双重甚至多重标记,使定位更加精确[2].因此已成为继荧光素、酶、同位素及胶乳标记技术之后的一种新型标记技术.现已广泛应用于电镜、流式细胞仪、免疫印迹、蛋白染色、体外诊断试剂的制造等领域.

夏日漂流小贴士

夏季是漂流的季节,当酷暑难消,空调的凉气也难以冰镇心中的闷热时,到水中去,去亲身体验“到中流击水,浪遏飞舟”的豪迈诗意,那满目的青山,那悠悠的绿水,那来自大地深处的凉凉的清新的气息……本刊在这里为大家介绍漂流前应作的准备,一起来看看吧:防水上衣:漂流者如遇又湿又冷的情况,运动衣是穿不住的.有了一件好的防水上衣,就可以不受从河里溅入的冷水的侵扰.这种上衣使用粗纤维和坚固的胶乳帆布来御寒.

免疫比浊法与高效液相色谱法检测糖化血红蛋白结果的对比分析

糖化血红蛋白（HbA1 c）是糖尿病的重要检测指标，对糖尿病患者血糖控制方案及血糖控制水平的评价具有重要的临床意义［1］。目前检测HbA1 c 方法有很多，一般为色谱法、电泳法、免疫法和化学法。色谱法主要包括离子交换层析法、高效液相色谱法（HPLC）和亲和法、免疫比浊法、胶乳免疫凝集法（LIAA）等［2］。目前，临床采用较多的是免疫比浊法和 HPLC 法，本研究对两法的结果进行对比分析，探讨2种方法的准确性和精密度，报告如下。

79例血清类风湿免疫胶乳试验测定启示

我院检验科1997年11月检测就诊患者新鲜血清79例,6例RF阳性.这6份阳性血清放置1h后再次测定,有2例转阴(所用试剂盒为上海伊华公司试剂盒).同时,将11份血清65℃5min灭活后进行重复测定,结果复测符合率100%,确证结果的可靠性.

气囊巩膜外顶压治疗近后极部大裂孔性视网膜脱离

对近后极部大裂孔性视网膜脱离,进行缝线固定性巩膜外垫压,手术操作非常困难.我们采用胶乳气囊导尿管,插管法进行球外非固定性巩膜外顶压治疗这类视网膜脱离病例,取得了满意疗效.报道如下:

基于胶乳增强免疫比浊法的食物过敏原检测试剂盒方法学的建立及临床应用评价

目的：建立基于胶乳增强免疫比浊法的食物过敏原检测试剂的方法并应用于临床。方法：采用胶乳增强免疫比浊法，对检测体系的标准曲线、低检测量、稳定性、精密度、干扰实验等相关性能指标进行评价，通过检测健康体检人员及临床过敏人群血液标本并与目前应用于临床的较成熟的ELISA方法进行比对，评价胶乳增强免疫比浊法的食物过敏原检测试剂的临床应用可行性。结果：该方法的标准曲线 Y＝837．1 x2－125．2 x＋10．036，线性范围：0～400 U／ml，相关系数为0．996，低检测限为19．600 U／ml。批内、批间精密度均＜10％。该方法的正常参考范围为＜33．5 U／ml，敏感度89．61％，特异性65．22％，准确度84．00％，阳性预示值89．61％，阴性预示值65．22％，ROC的曲线下面积（ AUC）为0．957，该方法与目前应用较广泛的ELISA法具有很强的相关性（ r＝0．8902）。结论：胶乳增强免疫比浊法的食物过敏原检测试剂符合临床诊断的相关要求，可应用于临床食物过敏性患者的诊断及疾病监测。

尿妊娠胶乳试验肉眼与镜下结果观察

尿妊娠胶乳试验，具有操作简单、时间短、结果判断明显、敏感度较高、特异性较强等优点，在怀孕早期作出诊断。 尿妊娠胶乳试验要求在较强的光线下用肉眼观察结果，所以受光线的影响，在试验中有时可产生一种非均匀一致的漂浮状白色颗粒。如果光线较弱遇此非特异性凝集，或抗血清与胶乳抗原结合，产生凝集不明显时，就会造成假阴性或假阳性结果，但在显微镜下观察就很容易鉴别，非特异性凝……

固相膜免疫测定

固相膜免疫测定(solid phase membrane-based immunoassay)与固相酶免疫测定(ELISA)相类似,其特点是以微孔膜作为固相.标记物可用酶和各种有色微粒子,如彩色胶乳、胶体金、胶体硒等,以红色的胶体金为常用.固相膜的特点在于其多孔性,像滤纸一样.固相膜可被液体穿过流出,液体也可以通过毛细管作用在膜上向前移行.利用这种性能建立了两种不同类型的快速检验方法.常用的固相膜为硝酸纤维素(nitrocellulose, NC)膜.

麻醉手术期间的胶乳过敏反应

胶乳是麻醉手术期间发生过敏反应的常见原因之一.本文对胶乳过敏反应的发生机制、临床特征、易患因素和预防综述如下.

育龄妇女256例尿绒毛膜促性腺激素早早孕与立知孕检测结果比较

我们通过对早早孕金标法、立知孕胶乳直接凝集法的比较,探讨采用立知孕胶乳直接凝集试剂筛查疑为早孕妇女的可行性,结果报告如下.

TRUST法和ELISA法检测梅毒结果比较

梅毒是由梅毒螺旋体(TP)感染引起的一种性传播疾病,也是血液传播性疾病之一.目前检测梅毒螺旋体的试验方法主要有:快速血浆反应素试验(RPR)、甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)和梅毒螺旋体血球凝集试验(TPHA)、梅毒螺旋体胶乳颗粒凝集试验(TPPA)、梅毒螺旋体抗体酶联免疫吸附试验(TP-ELISA).

胶乳颗粒凝集法D-二聚体检测在脑血管疾病中的临床应用

D-二聚体(D-dimer)是机体发生凝血时,凝血酶作用于纤维蛋白,使其转变为交联纤维蛋白,同时纤溶系统被激活,降解交联纤维蛋白,形成各种fdp碎片,由γ链将两个D片段相连便形成D-二聚体.正常人血浆中含量甚微(＜200μg/l),仅在继发纤溶亢进时,血浆中才会出现大量的D-dimer.由于D-二聚体是纤溶酶作用于交联后的纤维蛋白的特异性分子标志物,所以它是一项鉴别原发性纤溶与继发性纤溶及监测溶栓治疗的高价值的指标.

乙基纤维素水分散体包衣技术

包衣技术作为制备口服缓、控释制剂的常用和有效方法,其中以50年代应用到制药工业中的薄膜包衣技术为常用.薄膜包衣早期一般采用有机溶剂包衣,但存在一些缺点,如安全性差,毒性大,溶剂回收设备昂贵,包衣液中聚合物固含量低,粘度高,包衣时间长,能耗高等.到了70年代,人们开发出一种新兴的包衣技术——水分散体包衣,它是将不溶于水的聚合物,用水作分散剂,加入辅料制成胶乳或伪胶乳,进行包衣,具有安全性好、无环境污染、包衣液固含量高、粘度低、易操作、包衣时间短、能耗低等优点,已成为目前缓、控释制剂薄膜包衣的主要技术[1].常用的水分散体有乙基纤维素水分散体、丙烯酸树脂类水分散体、醋酸纤维素水分散体,以下主要介绍一下乙基纤维素水分散体包衣技术.

乳胶过敏原Hev b 3的克隆表达和纯化及其过敏原性检测

目的:克隆乳胶主要过敏原Hev b 3基因,构建其原核表达载体并表达和纯化重组蛋白,了解重组的Hev b 3是否具有和相应IgE特异结合的过敏原特性.方法:用RT-PCR方法从新鲜海南橡胶树叶提取的总RNA中扩增出Hev b 3的cDNA,将其克隆于原核表达载体pQE30质粒,转化大肠杆菌XL1-Blue,酶切和测序验证构建的载体,利用Ni-NTA柱层析纯化重组蛋白并用SDS-PAGE和Western Blot验证.结果:酶切和测序结果证实克隆了正确的Hev b 3序列,重组表达并纯化的蛋白具有和特异IgE抗体结合的过敏原特性.结论:成功构建了乳胶主要过敏原的原核表达载体,并纯化了具有过敏原特性的重组蛋白,为过敏原的标准化创造了条件.

乳胶凝集试验与脂多糖-被动血凝试验在小儿伤寒诊断中的比较

2001年本地区流行副伤寒,我们采用乳胶凝集试验(LAT)和LPS-PHA对今年4月至8月112份发热待查患儿的血清标本进行测定,现报告如下.1 材料与方法1.1 材料血清标本:采集112例热程2～7天患儿的血清,同时做LAT及LPS-PHA检测.其中76例做了血液细菌培养,伤寒杆菌培养阳性2例,甲型副伤寒杆菌培养阳性11例.检测试剂:伤寒、副伤寒胶乳试剂由四川迈克科技有限公司提供,伤寒杆菌LPS-PHA试剂及对照血清由浙江省卫生防疫站提供.

免疫比浊法测定尿液游离血红蛋白的方法学研究

目的 在全自动生化分析仪上建立胶乳增强免疫比浊法测定尿液游离血红蛋白的方法学,并进行方法性能评价.方法 使用抗人血红蛋白HBA0抗体(8.5 mg/ml),80 nm聚苯乙烯羧基胶乳微球(estapor,纳米微球)等材料制备检测试剂;在东芝TBA120全自动生化仪上设置项目参数并进行校准;方法学性能评价包括准确度、精密度、线性范围、灵敏度、特异度等性能指标;建立该地区健康人群尿液游离血红蛋白的生物参考区间并验证.结果 项目参数建立后定标通过,各测定点与拟合的校准曲线未呈现明显偏离,定标液浓度值与吸光度值经相关性分析,r=0.980 7,r2=0.961 8;回收试验中低值样本S低加入浓度为100 mg/L和500 mg/L的标准液后回收率分别为95.3％和102.7％,高值样本S高加入浓度为100mg/L和500mg/L的标准液后回收率分别为104.2％和103.5％;精密度试验中低值样本S低和高值样本S高的总不精密度CV分别的6.52％和4.18％;线性范围为0～1 100 mg/L;分析灵敏度为2.8 mg/L;干扰试验显示当样本中游离胆红素、结合胆红素、维生素C、动物血红蛋白分别小于342 μmol/L,342 μmol/L,0.03 g/L和500mg/L时对该试验结果无明显干扰,当乳糜浓度＞870 FTU时对该试验结果有显著干扰;该研究建立的健康人群生物参考区间男性为0～13.3 mg/L、女性为0～17.1 mg/L,两组参考区间经t检验无显著性差异(P＞0.05).结论 研究表明该方法学性能具备检测临床尿液标本,解决了化学法潜血试验特异性不够的问题,并实现了数值化检测,该研究也为其他类型临床标本的检测提供了思路.