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上转换荧光材料的化学修饰及在免疫检测的应用
上转换纳米材料是近年来发展起来的新兴稀土荧光材料。在近红外光的激发下可将其转变成可见光这一光学特性,使其具有抗光漂白能力强、宽的反斯托克斯位移、低毒性以及无自体荧光干扰等优点,在免疫检测中可提高灵敏度和信噪比。上转换稀土纳米颗粒水溶性和分散性较差,因此要通过化学修饰成水溶性和分散性较好的上转换稀土颗粒,以进一步与生物分子偶联。本文主要在合成上转换纳米颗粒的基础上,对化学修饰的方法及荧光共振能量传递机制、基于磁分离富集的免疫检测技术、固相微孔板荧光标记技术、免疫传感技术和免疫层析技术的应用研究做一综述。上转换技术的成功应用解决了传统的纳米材料应用中低灵敏度的问题,在医学检测领域具有很大的应用潜力。
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双色上转换纳米荧光探针在套细胞淋巴瘤细胞靶向成像中的应用
目的 构建上转换纳米靶向探针,并探究其在特异性标记套细胞淋巴瘤细胞株中的应用价值,为体内套细胞淋巴瘤的靶向诊断提供理论依据和指导.方法 采用H2O2对NaYF4:Er3+和NaYF4:Yb3+,Tm3+上转换纳米粒子表面进行氧化处理,使该粒子由初的疏水性转变为亲水性;在NHS、EDC的作用下,亲水性的NaYF4:Er3+上转换纳米粒子与CD20单克隆抗体共价结合,NaYF4:Yb3+,Tm3+上转换纳米粒子与CD5单克隆抗体共价结合;CD20抗体-NaYF4:Er3+纳米粒子轭合物和CD5抗体-NaYF4:Yb3+,Tm3+纳米粒子轭合物的混合悬液与套细胞淋巴瘤细胞株室温下孵育2 h;CD20抗体-NaYF4:Er3+纳米粒子轭合物和NaYF4:Yb3+,Tm3+纳米粒子的混合悬液与套细胞淋巴瘤细胞株室温下孵育2 h;NaYF4:Er3+纳米粒子和CD5抗体-NaYF4:Yb3+,Tm3+纳米粒子轭合物的混合悬液与套细胞淋巴瘤细胞株室温下孵育2 h;未偶联有任何抗体的NaYF4:Er3+和NaYF4:Yb3+,Tm3+上转换纳米粒子的混合液与套细胞淋巴瘤细胞株室温下孵育2 h;使用配备有980 nm近红外激光的尼康Eclipse Ti-S倒置荧光显微镜对各组细胞进行上转换成像,观察细胞表面上转换荧光的强度.结果 实验组细胞表面释放出蓝、绿双色的上转换纳米荧光,但通过观察3组对照实验,细胞表面却仅分别释放出单一的绿色荧光、蓝色荧光以及未见任何荧光.结论 上转换纳米粒子与CD20或CD5抗体成功共价偶联,可以对套细胞淋巴瘤细胞株进行特异性标记、成像.