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血红素氧合酶1修饰骨髓间充质干细胞多点注射梗死灶周围对梗死后心肌结构重塑的影响
背景:研究表明血红素氧合酶1的过表达有抗炎症反应的作用,将血红素氧合酶1修饰的骨髓间充质干细胞(HO-1-BMSCs)移植入梗死心脏周围是否可调节基质金属蛋白酶/组织金属蛋白酶抑制剂的比例而明显改善梗死心肌重构呢?目的:观察血红素氧合酶1修饰的骨髓间充质干细胞移植对心肌梗死后心肌胶原的调节及心肌重塑的逆转作用.方法:利用血红素氧合酶1腺病毒转染体外培养扩增的骨髓间充质干细胞.结扎大鼠左前降支动脉制造心肌梗死模型,1 h后,分别将HO-1-BMSCs、BMSCs多点注射到大鼠心脏梗死区四周,对照组注射等量磷酸盐缓冲液.结果与结论:Adv-hHO-1转染BMSCs后获稳定表达;hHO-1-mRNA仅在HO-1-BMSCs移植组表达;与对照组相比,HO-1-BMSCs移植组基质金属蛋白酶2/9的表达显著减少(P < 0.05),Null-BMSCs组基质金属蛋白酶2/9的表达虽然减少,但差异无显著性意义(P > 0.05);与对照组相比,细胞移植组金属蛋白酶组织抑制剂2/3的表达显著增加,尤以HO-1-BMSCs组明显(P < 0.05);但金属蛋白酶组织抑制剂1无明显变化(P > 0.05).金属蛋白酶组织抑制剂2/基质金属蛋白酶2和金属蛋白酶组织抑制剂3/基质金属蛋白酶9的比例在细胞移植的心脏中明显上升.与对照组比较,细胞移植组心室中的胶原蛋白沉积减少,心室腔内径显著缩小.结果表明血红素氧合酶1修饰的骨髓间充质干细胞移植可使基质金属蛋白酶/组织金属蛋白酶抑制剂的比例正常化,并逆转心肌细胞外基质的重构.
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二氧化碳气腹对大鼠肝脏造成的缺血再灌注损伤及异丙酚促进HO-1表达的保护作用
目的：探讨实验室二氧化碳( CO2)模拟腹腔镜高气腹压力对大鼠肝脏造成的缺血再灌注损伤以及异丙酚的保护作用和机制。方法选用280~320 g的Wistar成年雄性大鼠,实验前各组大鼠禁食12 h,可自由饮水。选取雄性大鼠48只,随机分成4组,每组12只：对照组( A组)、缺血组( B组)、再灌注组( C组)、异丙酚组( D组),观察各组天冬氨酸氨基转移酶( AST)、丙氨酸氨基转移酶( ALT)、超氧化物歧化酶( SOD)、丙二醛(MDA)以及血红素氧合酶1(HO-1)表达的变化。结果 B组、C组与A组比较,MDA逐渐增高,而SOD逐渐降低,HO-1表达反应性逐渐增加,HE染色和免疫组化提示损伤逐渐加重；D组与B组、C组比较,MDA指标明显降低,SOD明显增高,HO-1表达继续增加,HE染色和免疫组化可见损伤明显减轻。结论 CO2气腹可以造成大鼠肝脏缺血再灌注损伤；缺血和再灌注是不同的损伤过程,即：缺血状态解除后,对大鼠肝脏损伤并未停止,反而由于再灌注过程而进一步加重；异丙酚可通过促进HO-1的表达机制而发挥其保护性作用。
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银杏叶提取物通过激活Nrf2-ARE信号通路对帕金森病大鼠发挥脑保护作用
目的 观察银杏叶提取物对帕金森病(Parkinson's disease,PD)大鼠模型黑质多巴胺能神经元中氧化应激参数及抗氧化通路转录因子NF-E2相关因子-抗氧化反应元件(transcription factor NF-E2-related factor-antioxident response element,Nrf2-ARE)的表达调控.方法 3月龄雄性SD大鼠75只随机分为对照组、模型组、阳性药组、受试药低剂量组和高剂量组,背部皮下注射鱼藤酮制备PD大鼠模型,低剂量组和高剂量组同时给予银杏叶提取物灌胃共30 d,同时设置美多芭灌胃为阳性药组.免疫组化观察中脑黑质多巴胺能神经元的数量,判断模型的制备效果;分光光度法检测大鼠脑内纹状体中氧化应激参数——丙二醛(MDA)和还原型谷胱甘肽(GSH)含量变化,采用Western blot免疫印迹法检测大鼠中脑黑质中酪氨酸羟化酶(Tyrosine hydroxylase,TH)、转录因子NF-E2相关因子(transcription factor NF-E2-related factor,Nrf2)和血红素氧合酶1(HO-1)的表达改变.结果 与对照组相比,实验组大鼠纹状体中MDA增高了64.09％(P<0.01),GSH降低了40.69％(P<0.01),银杏叶提取物治疗后明显逆转了上述氧化应激状态.模型组大鼠中脑多巴胺能神经元中TH、Nrf2和HO-1蛋白表达比对照组明显降低(P<0.05);银杏叶提取物治疗后与实验组相比T1H、Nrf2和HO-1蛋白表达明显增加(P<0.05).同时我们发现上述改变有随着银杏叶提取物剂量增加而增强的趋势.结论 银杏叶提取物能通过激活脑内的内源性Nrf2-ARE通路,改善氧化应激状态,保护脑内黑质多巴胺能神经元,为PD的临床治疗提供新的靶点.
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丙泊酚对大鼠肝缺血再灌注致急性肺损伤时Nrf2和HO-1表达的影响
目的 探讨丙泊酚对大鼠肝缺血再灌注所致急性肺损伤时核因子E2相关因子(Nrf2)和血红素氧合酶1(HO-1)表达的影响.方法 健康SD大鼠24只,雌雄不限,体重220～ 250 g,随机分成三组:假手术组(SH组)、缺血再灌注组(IR组)和丙泊酚组(P组).SH组暴露肝门,但不阻断；IR组用无创血管夹阻断肝门30 min,开放再灌注180 min,制备肝缺血再灌注肺损伤模型；P组于阻断肝门前经尾静脉注射丙泊酚20 mg/kg,20 mg·kg-1 ·h-1静脉维持至大鼠死亡,余同IR组.各组于再灌注180 min后处死大鼠取肺组织,称重后计算肺湿干重比,免疫组织化学和Western印迹测定Nrf2和HO-1蛋白表达,光镜下观察肺组织病理结果.结果 与SH组比较,IR组和P组Nrf2和HO-1蛋白表达水平及肺湿干重比升高(P＜0.05)；与IR组比较,P组Nrf2、HO-1表达水平升高(P＜0.05),肺湿干重比降低(P＜0.05).P组肺组织病理学损伤程度较IR组减轻.结论 丙泊酚预先给药可通过上调Nrf2和HO-1的表达水平,从而减轻肝缺血再灌注损伤所致的急性肺损伤.
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血红素氧合酶1的结构和基因调控的研究进展
血红素氧合酶 1(HO-1)为诱导型,生理状态下,在网状内皮细胞系统和骨髓表达,在肝脏、脾脏中以高浓度存在,而又以脾脏组织活动高,约为肝脏的10倍.可以被多种物质或刺激因素诱导表达,如热休克、缺血、辐射、低氧、高氧、重金属盐等.HO-1基因内含有HSE元件,是一种热休克蛋白,又称HSP32.目前研究证实HO系统有三种同工酶:HO-1、HO-2和HO-3.HO-2为结构型,除了化学诱生剂肾上腺皮质激素有诱导作用外,一般处于稳定状态不能被其他因素诱导,主要分布在脑组织、睾丸组织中,由CO发挥神经递质的功能,也与精子的产生和成熟有关.
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高浓度葡萄糖下调INS-1细胞血红素氧合酶1表达水平的研究
目的:观察高糖毒性对大鼠胰岛细胞系INS-1细胞中血红素氧合酶1蛋白表达的损害作用,并研究信号分子刺激下细胞损伤的自我保护机制.方法:分别采用不同葡萄糖浓度孵育或葡萄糖代谢物葡萄糖胺持续孵育培养INS-1细胞,造成高糖毒性损伤,进而采用胰岛素以及核转录因子Nrf2激动剂莱芜硫烷刺激细胞保护信号机制改善损伤,蛋白印迹法检测细胞中血红素氧合酶1的表达情况.结果:高浓度葡萄糖溶液中(25 mM)孵育INS-1细胞48小时,血红素氧合酶1的表达水平较正常情况显著下降(P＜0.05).高浓度葡萄糖与葡萄糖胺共刺激对实验细胞中血红素氧合酶1的表达下调具有协同作用.胰岛素对实验细胞中血红素氧合酶1表达具有上调作用,但上调作用强度随培养环境中葡萄糖浓度的增高而降低.核转录因子Nrf2激动剂莱芜硫烷孵育处理实验细胞后,胞内血红素氧合酶1表达水平在葡萄糖胺刺激下上调,且与培养环境中葡萄糖浓度水平无关(P＜0.05).结论:高糖毒性可损害胰岛β细胞内抗氧化酶-血红素氧合酶Ⅰ的表达,而胰岛素可激活下游通路尤其是Nrf2信号通路,对抗高糖诱导的氧化应激损伤,从而保护胰岛细胞.
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慢性氟中毒大鼠脑组织中依赖还原型辅酶/醌氧化还原酶1及血红素氧合酶1的表达
目的 观察慢性氟中毒大鼠脑组织中依赖还原型辅酶/醌氧化还原酶1 (quinone oxidoreductase-1,NQO1)和血红素氧合酶1(heme oxygenase-1,HO1)mRNA和蛋白表达水平的改变,以及对转录因子NF_E2相关因子2/抗氧化反应元件(Nrf2/ARE)信号通路的影响,探讨氟中毒性脑损伤的机制.方法 SD大鼠60只,采用随机数字表法,按照体质量分为对照组(饮水氟含量＜ 0.5 mg/L)、染氟组(饮水氟含量为50.0 mg/L),每组30只,雌雄各半;实验期为10个月,观察氟斑牙情况,并收集大鼠24 h尿液;心脏灌流处死大鼠后,取后肢股骨和大脑组织.用氟离子选择电极法测定大鼠尿氟及骨氟;用蛋白印迹方法和实时荧光定量PCR分别检测脑组织中NQO1、HO1蛋白和mRNA表达水平.结果 染氟组大鼠出现不同程度的氟斑牙,对照组大鼠牙齿无异常改变;染氟组大鼠尿氟[(2.16±0.39)mg/L]及骨氟[(211.07±40.52)mg/kg]均高于对照组[(1.70±0.24)mg/L,(34.67±11.15)mg/kg,t=2.11、3.23,P均＜0.05].染氟组大鼠脑组织中NQO1、HO1蛋白表达[(255.2±14.3)％、(187.2±11.1)％]高于对照组[(100.0±12.2)％、(100.0±8.9)％,t=2.14、2.05,P均＜0.05].染氟组脑组织中NQO1、HO1 mRNA表达[(210.2±9.8)％、(154.5±7.4)％]高于对照组[(100.0±10.4)％、(100.0±9.7)％,t=2.33、2.75,P均＜0.05].结论 慢性氟中毒导致脑组织中NQO1及HO1表达水平升高,可能与Nrf2/ARE信号通路的开启有关,对代偿性增强细胞抗氧化能力有一定作用.
关键词： 氟中毒 大鼠 脑 依赖还原型辅酶/醌氧化还原酶1 血红素氧合酶1 -
醌烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸脱氢酶1和血红素氧合酶1 mRNA及蛋白表达与燃煤型砷中毒肝损伤关系探讨
目的 了解贵州省燃煤型砷中毒病区砷暴露者外周血中核因子E2相关因子2(Nrf2)诱导的下游醌烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADH)脱氢酶1(NQO1)和血红素氧合酶1(HO-1)mRNA及蛋白表达情况,探讨其在燃煤型砷中毒肝损伤发生发展中的作用.方法 以贵州省兴仁县燃煤型砷中毒病区交乐村和长庆村为调查点,在健康体检基础上选择161例砷暴露者为砷暴露组,按照《地方性砷中毒诊断标准》(WS/T 211-2001)分为病区非病例组(21例)和病例组(140例).病例组参照《职业性中毒性肝病诊断标准》(GBZ 59-2010)进一步分为轻度肝病组(52例)、中重度肝病组(36例),其余病例为无明显肝病组(52例);同时以相邻的非病区村45例居民作为对照组;采集研究对象外周血,实时荧光定量PCR检测NQO1和HO-1 mRNA相对表达量,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测NQO1和HO-1蛋白表达水平.结果 ①NQO1和HO-1mRNA表达结果:随砷暴露人群肝损伤程度的加重,外周血NQO1和HO-1 mRNA相对表达量逐渐升高(F=5.548、10.961,P均＜0.05).其中,轻度肝病组NQO1 mRNA相对表达量(中位数,0.918)高于对照组(0.576,P＜ 0.05),中重度肝病组NQO1 mRNA相对表达量(1.243)高于对照组、病区非病例组(0.653)、无明显肝病组(0.636)、轻度肝病组(P均＜0.05);病区非病例组、无明显肝病组、轻度肝病组及中重度肝病组HO-1 mRNA相对表达量(1.059、1.225、1.553、1.604)均高于对照组(0.767,P均＜0.05);轻度肝病组HO-1 mRNA相对表达量高于病区非病例组(P＜0.05);中重度肝病组HO-1 mRNA相对表达量高于病区非病例组、无明显肝病组(P均＜0.05).②NQO1和HO-1蛋白表达结果:随砷暴露人群肝损伤程度的加重,血清中NQO1和HO-1蛋白表达水平逐渐升高(F=19.685、17.725,P均＜0.05).其中,无明显肝病组、轻度肝病组及中重度肝病组NQO1和HO-1蛋白表达[NQO1:(6.272±0.744)、(6.336±0.628)、(6.714±0.540)U/L;HO-1:(45.150±4.813)、(45.283±5.049)、(48.610±5.365)U/L]显著高于对照组和病区非病例组[NQO1:(5.550±0.730)、(5.750±0.427)U/L;HO-1:(39.856±5.249)、(42.375±3.014)U/L,P均＜0.05],中重度肝病组NQO1和HO-1蛋白表达显著高于无明显肝病组和轻度肝病组(P均＜ 0.05).结论 砷暴露后NQO1和HO-1mRNA表达及蛋白表达增强,二者与燃煤型砷中毒肝损伤的发生发展密切相关.
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核因子相关因子2及血红素氧合酶-1在兔海水及淡水淹溺型急性肺损伤中的表达
目的 观察核因子相关因子2(nuclear factor-erytkrorid 2-related factor,Nrf2)及血红素氧合酶-1(HO-1)在兔海水及淡水淹溺型急性肺损伤中的表达.方法 18只新西兰兔按数字法随机分为海水组(经气管内注射3 ml/kg配方海水,n=6)、淡水组(经气管内注射18 ml/kg淡水,n=6)和对照组(n=6).模型建立成功后于0、0.5、1、3及6h抽取动脉血行血气分析.模型建立成功后6h处死兔,留取肺组织标本.检测兔肺湿干质量比值,肺通透指数,支气管肺泡灌洗液中TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-10水平,观察兔肺组织病理变化.检测兔肺组织中MDA含量、SOD水平和caspase-3蛋白水平.检测兔肺组织中Nrf2、HO-1 mRNA及蛋白水平.结果 海水组和淡水组兔肺湿干质量比值和肺通透指数较对照组明显增加(P＜0.05).海水组和淡水组兔支气管肺泡灌洗液中促炎细胞因子和抑炎细胞因子水平均较对照组明显增高(P＜0.05).海水组和淡水组兔TNF-α分别为(121.8±22.7) mg/L和(113.5±23.0) mg/L,对照组为(82.8± 16.5) mg/L.海水组和淡水组IL-1β分别为(76.4±15.5)mg/L和(62.2±12.8) mg/L,对照组为(32.2±7.4) mg/L.海水组和淡水组IL-6分别为(34.1 ±7.6)mg/L和(35.0 ±7.4) mg/L,对照组为(16.5±3.8) mg/L.海水组和淡水组IL-10分别为(22.1±3.9)mg/L和(19.0 ±2.8)mg/L,对照组为(13.4 ±2.8)mg/L.海水组和淡水组肺损伤较对照组明显加重,海水组和淡水组肺组织中MDA含量及SOD水平较对照组升高(P＜0.05).海水组和淡水组肺组织中caspase-3蛋白水平较对照组升高(P＜0.05).海水组和淡水组肺组织中Nrf2及HO-1 mRNA及蛋白水平较对照组升高(P＜0.05).海水组与淡水组之间各项指标差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 海水淹溺型肺损伤与淡水淹溺型肺损伤程度相近,均存在氧化应激损伤和细胞凋亡,Nrf2/HO-1通路可能参与淹溺后肺损伤的保护.
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实验性变态反应性脑脊髓炎大鼠脑组织HO-1 mRNA表达
目的:探讨脑组织血红素氧合酶1(HO-1)在实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)发病中的作用及可能的信号转导机制.方法:健康成年雌性Wistar大鼠78只,随机分为3组(n=26):对照组,不做任何处理EAE组,应用豚鼠脊髓匀浆-完全弗氏佐剂诱导大鼠EAE模型;吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)组,EAE模型诱导前1 h腹腔注射NF-κB特异性抑制剂PDTC 100 mg/kg,以后1次/d,连续7 d.诱导后1、7、14、21 d以RT-PCR法测定EAE大鼠脑组织中HO-1 mRNA表达的动态变化,并观察其与症状之间的关系.结果:对照组大鼠脑组织仅有少量HO-1 mRNA表达(0.27±0.05);诱导EAE后,随着大鼠EAE症状的出现和加重,脑组织HO-1 mRNA水平逐渐升高;在发病潜伏期(免疫后7 d)达高峰(1.11±0.12);发病期(免疫后14 d)保持较高水平(1.06±0.18);恢复期(免疫后21 d)逐渐下降(0.37±0.10),大鼠EAE症状也逐渐恢复.应用NF-κB特异性抑制剂PDTC后,大鼠EAE症状明显减轻,脑组织HO-1 mRNA水平显著下降,显示脑组织HO-1 mRNA的动态变化与EAE病情密切相关;NF-κB特异性抑制剂可以调节HO-1 mRNA表达水平.结论:脑组织HO-1 mRNA表达在EAE发病中起着重要的作用,应用NF-κB特异性抑制剂可能是防治该病的有效方法之一.
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不同时间心肺复苏脑组织损伤变化规律
目的 观察大鼠在心脏骤停后不同时间实施心肺复苏(CPR)脑组织的损伤程度,为临床CPR提供参考.方法 选用健康雄性Wistar大鼠30只,随机分为对照组(6只)和实验组(24只).对照组不予窒息和心肺复苏;实验组按复苏时间分为甲、乙、丙、丁四个亚组(每组6只),均以2％ KCl快速静脉注射诱发心脏骤停,并分别于呼吸停止后2、4、6、8 min实施CPR.6h后处死全部大鼠,取脑组织做切片,显微镜下观察海马区神经元的变化并统计存活神经元数目.应用考马斯亮蓝法(Bradford)检测血红素氧合酶1(HO-1)蛋白及转录因子核因子E2(NF-E2)相关因子2(Nrf2)核蛋白相对表达量.采用干湿重法计算脑组织水含量.结果 复苏后,实验组均见海马区神经元有明显的损伤,神经元存活数量显著减少,其中丙组(22.33±5.92)个、丁组(20.00±5.53)个与对照组(47.44±5.76)个,甲组(28.00±5.01)个、乙组(29.03±5.03)个比较,存活神经元数量均明显降低,差异有统计学意义(P均＜0.05).对照组Nrf2核蛋白、HO-1蛋白均呈低表达,与对照组比较,甲乙丙丁各组Nrf2核蛋白、HO-1蛋白相对表达量均有升高,其中丁组又明显高于其余各组(P＜0.05,P＜0.01).与对照组比较,各实验组脑组织含水量均明显增加(P均＜0.05),其中丙、丁组较甲、乙组脑组织含水量明显增加(P均＜0.05),而甲、乙组之间及丙、丁组之间比较均无明显差异(P均＞0.05).结论 在心脏骤停后,及时有效的CPR能改善脑缺血,从而减轻脑水肿,有助于改善预后.
关键词： 心脏骤停 心肺复苏 脑缺血损伤 血红素氧合酶1 转录因子核因子E2相关因子2 -
富氢液对糖尿病大鼠周围神经病变血红素氧合酶1表达的影响
目的 探讨富氢液对糖尿病大鼠周围神经病变血红素氧合酶1(HO-1)表达的影响.方法 健康雄性SD大鼠36只,体重180～200 g,采用随机数字表法将其均分为三组:健康对照组(C组)、糖尿病神经病变组(DPN组)和富氢液组(HRS组).DPN组与HRS组大鼠采用腹腔注射1％链脲佐菌素(STZ) 65 mg/kg的方法制备糖尿病模型.HRS组于注射STZ 14 d后腹腔注射富氢液5ml·kg-1·d-1,连续14d,C组和DPN组注射等容量生理盐水.分别于STZ注射前2 d(To,C组注射生理盐水)、注射后7 d(T1)、14 d(T2)、21 d(T3)和28 d(T4)测定机械刺激缩足阈值(PWT)和热刺激缩足阈值(PWL),观察三组大鼠疼痛行为学变化;在T4时测定右后肢运动神经传导速度(MNCV)和神经传导潜伏期.测定结束后,采用HE染色观察三组大鼠坐骨神经损伤情况,采用免疫组化法与Western blot法检测HO-1在坐骨神经中的表达,同时检测丙二醛(MDA)含量和过氧化氢酶(CTA)活性.结果 与C组比较,DPN组和HRS组T1～T4时PWT明显降低,T2～T4时PWL明显缩短,T4时MNCV明显减慢,神经传导潜伏期明显延长,DPN组和HRS组坐骨神经中HO-1阳性细胞率与HO-1表达明显升高,MDA含量明显增加,CAT活性明显降低(P＜0.05).与DPN组比较,HRS组T3、T4时PWT明显增高,PWL明显延长,T4时MNCV明显增快,神经传导潜伏期明显缩短,坐骨神经中HO-1阳性细胞率与HO-1表达明显增高,MDA含量明显降低,CAT活性明显升高(P＜0.05).结论 富氢液可能通过上调HO-1表达,产生抗氧化作用对糖尿病大鼠周围神经损伤发挥保护作用.
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血红素氧合酶1和血红素氧合酶2在雌性去势大鼠阴道平滑肌中的表达
目的:研究血红素氧合酶1(HO-1)、血红素氧合酶2(HO-2)在雌性去势大鼠阴道平滑肌中的表达,探讨雌激素对阴道平滑肌HO-1、HO-2表达的影响. 方法:雌性8周龄SD大鼠随机分为A(去卵巢2周组)、B(去卵巢4周组)、C(假手术2周组)、D(假手术4周组)4组,每组6只,放免法测定各组雌性大鼠血清雌二醇水平,运用免疫组化和RT-PCR对HO-1、HO-2在阴道平滑肌进行定位和半定鼍分析. 结果:术后A与C、B与D组血清雌二醇比较有显著差异(P<0.05);HO-1、HO-2免疫组化定位在阴道平滑肌细胞胞质内,A组表达显著低于C组;阴道平滑肌组织中HO-1、HO-2 mRNA表达在A、B组均显著低于C、D组,阴道中HO-1 mRNA、HO-2 mRNA下降与血清雌二醇F降相关. 结论:HO-1、HO-2在雌性大鼠阴道平滑肌中有表达,低水平的雌激素与HO-1、HO-2表达降低有关,雌激素可能经HO/CO途径在阴道平滑肌中发挥生理作用.
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蓝藻素通过诱导血红素氧化酶-1表达发挥对急性脓毒性肺损伤的保护作用
目的：观察藻蓝素（C-phycocyanin，CPC）对脓毒症急性肺损伤（acute lung injury，ALI）大鼠的保护作用及分子机制。方法75只SD大鼠随机分为对照组、模型组和3个CPC干预组。其中模型组采用盲肠结扎穿刺建立脓毒症急性肺损伤大鼠模型。CPC干预组在模型组基础上腹腔注射浓度为20、40、60 mg/kg 的CPC。术后72 h获取血液及肺组织标本，检测肺湿干重比（wet-to-dry weight ratio，W/D）、支气管肺泡灌洗液中TNF-α，IL-1β和IL-6水平，以及肺组织中髓过氧化物酶（myeloperoxidase，MPO）活性；Western blot检测血红素氧合酶（heme oxygenase，HO）-1的表达以及Nrf2和NF-κB的激活。化学发光法检测超氧化物的产生，还原法检测肺组织中亚硝酸盐/硝酸盐的含量。结果 CPC处理可显著抑制脓毒症急性肺损伤大鼠肺组织的炎症反应（P＜0.05），如过氧化物形成、MPO活性、白细胞渗出以及蛋白含量，以及支气管肺泡灌洗液中促炎症细胞因子和亚硝酸盐/硝酸盐的水平。同时，CPC能显著促进ALI肺组织中核转录因子Nrf2的活化和HO-1表达(P＜0.05)，同时也能抑制NF-κB的激活。HO-1抑制剂锡原卟啉Ⅸ（tin protoporphyrin IX，SnPP）能减轻CPC在肺损伤大鼠中的保护效应。结论 CPC对ALI大鼠的保护作用可能与诱导HO-1表达、NF-κB的激活，进而抑制炎症反应有关。
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积雪草酸对糖尿病大鼠肾脏Nrf2-ARE信号通路的影响
目的 探讨积雪草酸(AA)对糖尿病大鼠肾脏氧化应激及核因子NF-E2相关因子(Nrf2)-抗氧化反应元件(ARE)信号通路的影响.方法 18只雄性SD大鼠随机均分为糖尿病模型组(DM组)、AA 60 mg·kg-1·d-1干预组(AA组)和正常对照组(NC组).干预8周后,检测各组血糖、肾脏指数(KI)、血尿素氮(BUN)、血清肌酐(SCr)、尿白蛋白排泄率(UAER)、丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性,光镜下观察肾脏的病理形态改变,Western blot法检测Nrf-2、血红素氧合酶1(HO-1)蛋白表达.结果 与NC组相比,DM组肾脏病理形态改变明显,血糖、KI、BUN、SCr及UAER、MDA和Nrf-2均明显增加(P＜0.05),SOD活性、HO-1蛋白表达降低(P＜0.05);而AA组能明显改善上述指标的变化(P＜o.05).结论 AA可能通过激活Nrf2-ARE信号通路发挥对糖尿病大鼠肾脏的保护作用.
关键词： 糖尿病肾病 氧化应激 积雪草酸 核因子NF-E2相关因子 血红素氧合酶1 -
慢病毒介导HO-1基因转染猪骨髓间充质干细胞的表达
目的 探讨重组血红素氧合酶1(HO-1)基因体外转染猪骨髓间充质干细胞(MSCs)应用于基因治疗的可行性.方法 体外分离、培养并鉴定MSCs.采用具有高效转染非分裂期细胞的慢病毒载体系统将HO-1基因导入MSCs中;采用RT-PCR和绿色荧光蛋白(GFP)荧光技术检测目的基因的表达,台盼蓝染色及MTT法检测转染后细胞的增殖能力.结果 慢病毒感染MSCs的感染复数为20,佳感染率可达80％;MSCs表面高表达CD44和CD105;GFP荧光表达自96h开始逐渐增强;转染细胞中显示目的基因mRNA的表达;转染对MSCs存活及增殖几乎无影响.结论 慢病毒载体可成功转染猪MSCs,并使其HO-1表达增高,转染对MSCs存活及增殖基本无影响.
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HO-1对大鼠AMI后重塑过程左心室功能和TNF-α的影响
目的 观察血红素氧合酶1(HO-1)对SD大鼠急性心肌梗死(AMI)后重塑过程中左心室功能和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的影响.方法 成年雄性SD大鼠40只,结扎冠状动脉前降支制作AMI模型,随机分组并于术前3d～术后8周隔日一次分别腹腔注射,假手术(Sham)和AMI组均0.9%氯化钠溶液(NS)1 ml/只、氯血红素(Heroin)组Hemin 4 mg/kg、原卟啉锌(ZnPP)组ZnPP50μg/kg;术后第8周末行血流动力学测定、获取心脏标本,免疫印迹法测定HO-1和肿瘤坏死因子α(TNF-α).结果 ZnPP组死亡率高于其他各组(P<0.05);心脏相对重量和心率(HR)由低至高依次均为Sham组、Hemin组、AMI组和ZnPP组;左室压大上升/下降速度(±dp/dt_(max))Hemin组低于Sham组,高于AMI组和ZnPP组(P<0.05).Hemin组HO-1含量高于其他各组,ZnPP组HO-1含量低于其他各组(P<0.05).TNF-α的组间差异与HO-1的差异一致.结论 HO-1高表达可改善大鼠AMI后重塑过程中左心室功能和抑制TNF-α的产生.
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生酮饮食在创伤性颅脑损伤中神经保护作用研究
目的 生酮饮食主要用于治疗癫痫,已证实它对多种神经系统疾病具有神经保护作用,但对创伤性颅脑损伤相关作用研究甚少.文中旨在探讨生酮饮食在创伤性颅脑损伤后的抗氧化神经保护作用.方法 采用出生35d的SD大鼠,建立自由落体创伤性颅脑损伤模型,分别给予生酮饮食、正常饮食1周,然后处死测脑组织干湿重比,用Western blot和RT-PCR测血红素氧合酶1(Hemeoxygenase 1,HO-1)蛋白及基因水平.结果 给予生酮饮食后,脑水肿减轻,HO-1 mRNA的表达及蛋白含量均增高.结论 生酮饮食对颅脑损伤患者具有抗氧化神经保护作用.
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褪黑素对蛛网膜下腔出血后皮层Nrf2-ARE传导通路的影响
目的 探讨褪黑素对蛛网膜下腔出血(sAH)所致的早期脑损伤(EBI)后大脑皮层Nrf2-ARE传导通路的调控作用.方法 40只成年健康雄性SD大鼠,随机分为对照组、SAH组、安慰剂组、褪黑素组,经大鼠自体尾动脉(或股动脉)非肝素化动脉血注入视交叉池致蛛网膜下腔出血模型.褪黑素注射剂量为5m/kg,1次/12h,在蛛网膜下腔出血后48h处死大鼠,取血凝块周围的皮层脑组织(额颞底)做标本,western blot及免疫组化测定Nrf2、HO-1.结果 与对照组相比,SAH及安慰剂组较对照组Nrf2、HO-1水平明显上调(P<0.01),且在sAH组及安慰剂组差异无统计学意义(P>0-05).褪黑素组Nrf2、HO-1水平较对照组、SAH组和安慰剂组进一步显著上调(P<0.01).结论 褪黑素可能通过Nrf2-ARE实现SAH所致的早期脑损伤神经保护作用的机制之一.
关键词： 褪黑素 蛛网膜下腔出血 早期脑损伤 核因子E2相关因子2 血红素氧合酶1 -
类风湿关节炎患者血清HO-1水平变化及其临床意义
目的 探讨类风湿关节炎(RA)患者血清血红素氧合酶1(HO-1)水平变化及其与骨代谢因子、炎症因子和疾病活动度的关系.方法 选择RA患者100例(观察组),28个关节疾病活动度评分(DAS28)为(4.56±1.86)分,其中疾病活动度轻度29例、中度44例、重度27例,另选体检健康者100例作为对照组,检测两组血清HO-1、骨代谢因子[Ⅰ型胶原C-末端交联顶端肽(CTX)、Ⅰ型前胶原N-末端前肽(PINP)、抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRAP5b)]和炎症因子(IL-1β、IL-6、IL-17),并分析RA患者血清HO-1水平与骨代谢因子、炎症因子和DAS28的关系.结果 观察组血清HO-1、CTX、TRAP5b、IL-1β、IL-6、IL-17水平均明显高于对照组,血清PINP水平明显低于对照组(P均<0.05).随着RA病情程度加重,上述指标变化越来越明显(P均<0.05).RA患者血清HO-1水平与血清CTX、PINP水平无明显相关性(P均>0.05),与血清TRAP5b、IL-1β、IL-6、IL-17、DAS28均呈正相关关系(P均<0.05).结论 RA患者血清HO-1水平明显升高,且其水平变化与骨代谢、炎症反应和疾病活动度有关.
