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PRDX6过表达增强肺癌细胞系A549的迁移和侵袭
目的 探讨PRDX6过表达对肺癌细胞系A549迁移性及侵袭性的影响.方法 1)体外培养人肺癌细胞系A549,分为空白组、转染PRDX6组、转染空质粒组. 2) Western blot检测细胞PRDX6蛋白表达;3) Transwell小室法检测细胞的迁移性及侵袭性.结果 1)转染PRDX6组PRDX6蛋白表达较空白组及转染空的质粒组明显增高(均P<0. 05);2)转染PRDX6组迁移性及侵袭性较空白组及转染空质粒组显著增高( P<0. 05).结论 PRDX6的高表达增强肺癌细胞系A549的迁移性及侵袭性.
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BRAF基因突变对结肠癌伴随胃癌发生的影响
目的 研究BRAF基因突变与结肠癌伴随胃癌,以及PRDX1和PRDX6基因表达量的关联,分析PRDX1和PRDX6基因在结肠癌伴随其它原发癌症中的作用.方法 收集47例患有结肠癌与伴随胃癌病人的样本,通过PNAClampTM突变检测试剂盒检测样本中BRAF和MLH1基因的突变情况,利用卡方检验比较突变与相关特征的关系.通过qPCR和蛋白质印迹检测BRAF突变样本中的PRDX1和PRDX6的表达量变化.通过人类HCT-116结肠癌细胞中转入带有BRAF突变的质粒,研究细胞系水平BRAF突变对PRDX 1和PRDX6表达量的影响.结果 BRAF的突变在不同年龄、癌症位置、多发癌时间间距、癌症数量或者家庭癌症史之间差异无显著性(P＞0.05);而MLH1的突变在不同多发癌时间间距、癌症数量和家庭癌症史之间,差异有显著性(P＜0.05).PRDX1和PRDX6表达水平与BRAF突变程度及不同结肠癌伴随的原发癌数量之间差异有显著性(P＜0.05),PRDX1和PRDX6基因可能是BRAF突变抑制的目标.结论 结肠癌伴随胃癌的多种原发性癌症中BRAF突变率比较低.使用BRAF突变作为鉴定标记,仍需要其他基因如MLH1基因突变情况的辅助.BRAF突变可以抑制PRDX1和PRDX6基因的表达,而且PRDX1和PRDX6基因的表达量与结肠癌伴随的原发癌的数量有关.
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人Peroxiredoxin 6基因的克隆与鉴定
目的 构建pEGFP-N 1-Prdx6真核表达载体,为进一步研究Peroxiredoxin6(Prdx6)在急性肺损伤中的作用奠定基础.方法 利用RT-PCR方法扩增人Prdx6基因全长,测序证实后,将其定向亚克隆到真核表达载体pEGFP-N 1中,提取质粒作双酶切和测序鉴定.结果 人全长Prdx6基因序列正确插入pEGFP-N 1载体,测序结果经BLAST分析与GenBank中报道的编码区cDNA序列完全一致.结论 通过构建pEGFP-N 1-Prdx6真核表达载体可以克隆人Prdx6基因.
