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单磷酸类脂A预处理对内毒素血症小鼠丙二醛生成的影响
迄今,脓毒症休克仍旧是威胁人类生命的重要原因之一.脓毒症休克的发病原因多是由革兰氏阴性菌内毒素引起的,其发病机制非常复杂,尚无有效的治疗措施.单磷酸类脂A(Monophosphoryl Lipid A, MPLA)为脂质A的无毒衍生物,它不仅毒性小,且保留了脂多糖(Lipopolysaccharide, LPS)的免疫调节性[1~3].本实验旨在探讨MPLA预防性保护内毒素血症小鼠的可能机制.
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生物传感器技术在分离赤芍抗内毒素单体成分中的研究
目的:利用生物传感技术从赤芍中分离抗内毒素单体成分.方法:以 Lipid A包被生物传感器样品池表面,建立筛选靶点,并以传感器上回收物的紫外扫描结果为参照,通过跟踪测定硅胶柱层析、高效液相色谱( HPLC)流出组分与 Lipid A的结合能力,分离抗内毒素的单体成分,并应用鲎试剂法测定单体成分与体外脂多糖( LPS)的中和作用.结果:从生物传感器回收到可与 Lipid A结合的组分,其紫外吸收峰分别为 194、 215、 275nm波长.通过 HPLC分离出与 Lipid A具有较高结合活性的单体成分为 1, 2, 3, 4, 6- O-五没食子酰-β- D-葡萄糖( PGG),浓度为 8、 4、 2μ g/ml的 PGG分别能够中和 0. 1EU/ml LPS活性的 68. 8%、 43. 7%、 31. 4%.结论:利用生物传感器技术,以 Lipid A为靶点分离赤芍抗内毒素单体成分是可行的,且具有高效、快速、准确等优点,适合于大规模地从中草药中分离抗内毒素的单体成分.
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以lipid A为靶点应用生物传感器技术筛选抗炎中药
目的 应用生物传感器跟踪检测技术从传统抗炎中药中筛选具有拮抗内毒素作用的中药,并对其进行活性物质含量排序.方法 将lipid A包被于生物传感器的非衍生板,建立靶点,测定22种去鞣质后的中药水煎液与lipid A的亲和力;选择具有较高亲和力的药物与定量脂多糖(5 ng/mL)于37℃混合孵育30 min,再测定其与lipid A的亲和力,以评价药物水提液中活性物质的含量.结果 22种中药均具有与lipid A较高的亲和力(大于100RU);侧柏叶、地骨皮、石榴皮等16种中药中与lipid A特异性结合的活性物质含量较高.结论 应用生物传感器技术建立的筛选平台快速而客观,筛选出的16种中药均含有能与lipid A发生特异性结合作用的非鞣质类活性物质.