人脂肪组织源性间充质干细胞分离与体外培养

各种疾病所导致的器官衰竭严重地危害着人类的健康,降低了患者的生活质量.干细胞所具有的自我复制和多向分化能力使它成为挽救器官衰竭、进行组织修复的理想种子细胞.在特定的条件下它可以分化为中胚层起源的多种组织细胞,如成骨细胞、软骨细胞、肌腱、脂肪细胞、血管内皮细胞、肌细胞及神经星状细胞等.目前干细胞主要来源于骨骼肌卫星细胞、骨髓干细胞、胚胎干细胞等,近几年国外有研究显示脂肪组织中也含有大量具有多向分化潜能的干细胞(adipose tissue-derived mesenchymal stem cells, ADMSCs),而目前国内应用脂肪组织分离及培养干细胞的报道极少.本研究拟将对ADMSCs进行分离和体外培养,并对其生长方式进行观察.

诱导多能干细胞在脊髓与周围神经疾病中的研究进展与前景

诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPS细胞)技术是于细胞领域的一门新兴技术,是通过向体细胞中导入特定转录因子,从而诱导体细胞重编程获得未分化的多能细胞的技术,通过这种技术获得的多能细胞有与胚胎干细胞类似的性能和多向分化能力.该技术在2008年被Science杂志评为十大科学突破之首[1].

脂肪干细胞的基础研究及在泌尿外科的应用进展

脂肪源性干细胞（adipose-derived stem cells，ADSCs）是从脂肪组织中分离出的具有多方向分化能力的成体干细胞。在以往的医学研究领域中，骨髓基质干细胞（ bone marrow derived stem cells，BMSCs）一直是成体干细胞中热门的一个研究热点，但由于其具有来源较少，提取困难，提取过程对患者痛苦较大等诸多缺点，极大地限制了其在临床的应用。直到2001年，Zuk等［1］通过吸脂手术第一次从人体的脂肪中提取分离并获得了可在一定条件下分化为肌肉、软骨、脂肪、表皮，造血、神经等多种组织的ADSCs。而De Ugarte等［2］发现ADSCs与BMSCs在细胞形态、生长动力学、细胞衰减、多向分化能力及基因转导能力等方面基本相似。而ADSCs相对BMSCs具有取材方便，难度较小，对患者创伤痛苦较低的优点。因此， ADSCs已成为新的成体干细胞的研究热点。

间充质干细胞治疗自身免疫性疾病机制的研究进展

近年来,间充质干细胞(MSC)具有治疗自身免疫性疾病的发现已逐步引起研究者的浓厚兴趣.在MSC研究领域大部分研究者主要专注于研究控制这些细胞多向分化能力的潜在性治疗价值.但是,对于这种细胞具有免疫调节特性的关注程度相对较少.目前已有研究者正在对MSC在免疫调节方面的作用进行较为深入的研究.本文中,我们将就使用成人组织来源的MSC作为一种可能的调节工具治疗自身免疫性疾病的新概念进行一些讨论,同时讨论它们转化成临床应用的可能性.

骨髓间充质干细胞在心血管疾病治疗中的应用

间充质干细胞(mesenchymal stem cell, MSCs)是中胚层来源的具有多向分化能力的干细胞,主要存在于全身结缔组织和器官间质中,以骨髓组织中含量为丰富,在一定的诱导条件下能分化为成骨细胞、成软骨细胞、肌腱细胞、脂肪细胞、成纤维细胞、内皮细胞、神经细胞、骨骼肌细胞及心肌细胞[1-8].由于不同的文献对其有不同的命名,即集落形成单位成纤维细胞(CFU-F)、骨髓基质成纤维细胞(MSF)、骨髓基质细胞(MSC)、间充质干细胞(MSC)或间充质祖细胞(MPC).由于骨髓是其主要来源,因此统称为骨髓MSCs,并仅就其生物学特征、多向分化潜能及在心血管疾病治疗中的研究进展作一综述.

CD133:脑胶质瘤干细胞标志物?

过去十五年,癌症研究中的重大进展之一为"肿瘤干细胞"模式的提出.该模式认为,恶性肿瘤的发生类似于正常组织发生,初起源于与"正常干细胞"具有相类似的自我更新和多向分化潜能特性的"肿瘤干细胞"[1].细胞表面分子CD133在各类肿瘤干细胞的分选及鉴定中广泛应用[2].然而近,CD133分子在脑胶质瘤、结直肠癌、肺癌等恶性肿瘤组织中作为肿瘤干细胞标志物的作用受到了质疑,例如,在脑胶质瘤中的研究表明,CD133阴性的肿瘤细胞在体外实验中也可具备自我更新及多向分化能力,在免疫缺陷鼠中亦可有效导致肿瘤发生;而且CD133阴性肿瘤细胞在免疫缺陷鼠中所诱发的肿瘤可包含CD133阳性肿瘤细胞[3].因此,CD133分子作为肿瘤于细胞,尤其是脑胶质瘤干细胞标志物的特异性成为当前研究的热点.

比格犬牙髓干细胞的培养与鉴定

目的 应用经典的人牙髓干细胞分离培养方法证明比格( Beagle)犬牙髓干细胞的存在,以期为大型动物的牙源性干细胞性质及其应用研究提供基础.方法 获取比格犬健康恒牙牙髓组织,应用分散酶进行消化培养获得细胞,并通过观察其生物学特性、多向分化能力及干细胞相关表面标志物的表达等方法进行鉴定.结果 经酶消化法获得的比格犬牙髓干细胞形态与人牙髓干细胞形态相似,呈典型的成纤维细胞形态；比格犬牙髓干细胞的牙龈成纤维细胞集落形成率为150个集落/104个细胞,显著高于人牙髓干细胞的牙龈成纤维细胞集落形成率(60个集落/104个细胞),差异有统计学意义(P＜0.001)；比格犬牙髓干细胞具有多向分化能力,在体外经诱导可以形成矿化结节、脂滴和成软骨细胞,同时比格犬牙髓干细胞表达间充质干细胞相关表面标志物基质细胞抗原( STRO-1)、CD146、碱性磷酸酶、波形蛋白、细胞角蛋白18及神经上皮干细胞蛋白(nestin).结论 本项研究证实了比格犬牙髓组织中存在牙髓干细胞,并具有增殖活跃的特件和多向分化的潜能.

获得组织再生需要细胞类型的多种途径

创伤与一些慢性疾病均可导致组织器官的功能障碍,组织再生存在极大的社会需求[1～4].组织再生的核心问题是如何获取充足的目的细胞.基于现实的研究基础,从获得的策略上讲,可以分为3个层面:①具有多向分化能力的干细胞分化为特定组织细胞类型;②诱导已分化细胞发生去分化,使其再次进入细胞周期,满足组织再生的需求;③使机体易于获得、扩增的细胞重编程为目的细胞类型.

骨髓基质干细胞多向分化及临床应用

骨髓基质干细胞（ bone marrow stromal cells，BM-SCs）与胚胎干细胞（ embryonic stem cell，ES细胞）相比较，因具有取材方便、来源丰富、扩增迅速、较强的多向分化能力以及没有伦理问题等优点而受到极大关注［1～3］。 BMSCs分化能力的研究，对于各种疑难疾病的治疗具有重大意义。笔者现就BMSCs的多向分化和临床应用现状做一综述。

干细胞移植治疗心肌损伤

一、干细胞概况干细胞是一族具有自我复制和具有多向分化能力的细胞.干细胞可以保持静止状态,可以发生自我复制,也可以发生分化.这些行为被认为是由它们邻近的体细胞决定的,后者组成的微环境调节干细胞的生长和分化.这个微环境能够提供一些因子维持干细胞的未分化状态,并能把诱导干细胞发生分化的因子排斥在外.但这个微环境的容纳能力是有限的,如果干细胞的数量超过这个微环境的容纳能力,干细胞就会从这个微环境中分离出来并发生分化.干细胞内也存在一些因子维持干细胞的未分化状态,这些因子可抑制与干细胞分化有关基因的表达.在组织受到损伤时,健康细胞产生的干细胞分化抑制因子减少及坏死细胞释放的有丝分裂原能诱导干细胞分化来修复组织损伤.干细胞也可以横向分化.骨髓干细胞可分化成肌肉、血管、神经组织和肝细胞[1-4].中枢神经系统的干细胞也可转化为血细胞[5].以前认为心肌细胞是终分化组织,心肌细胞不能再发生有丝分裂,心肌受到损伤后只能形成瘢痕组织来修复.但近的研究显示心肌梗死后在心肌梗死灶边缘及正常心肌组织中也有少量心肌细胞发生有丝分裂[6].由于心肌梗死部位血供断绝,如果只依赖于心肌细胞的分裂增生不可能形成新的心肌组织.慢性心功能不全时,由于不断有心肌细胞凋亡或坏死,能够发生有丝分裂的心肌细胞分裂增生修补受损心肌组织.但这些细胞的分裂能力是有限的,结果是这些细胞被逐渐消耗完,造成慢性心功能不全时心肌细胞数量减少和功能低下.血管紧张素转化酶抑制剂和β受体阻滞剂的应用提高了慢性心功能不全病人的存活率,但终末期心衰的治疗效果还是很差.缺乏捐献者,免疫抑制后产生的副作用及移植心脏的不存活,使心脏移植受到限制.基因治疗可以增强心肌细胞的收缩,但由于有功能的心肌细胞数目减少,使基因治疗的作用受到限制.目前迫切需要新的方法治疗心衰,移植干细胞代替移植整个心脏成为研究的热点.

干细胞研究与耳鼻咽喉头颈外科

干细胞是一种具有自我无限复制和多向分化能力的细胞,包括胚胎干细胞和成体干细胞.近年来,由于细胞分离培养技术的提高以及对干细胞特征认识的加深,干细胞研究发展非常迅速,展示出很好的临床应用前景.耳鼻咽喉头颈外科在这一领域也进行了相关研究.

骨髓间充质干细胞的研究及进展

间充质干细胞(MSCs)是中胚层来源具有多向分化能力的干细胞,主要存在于结缔组织和器官间质中,以骨髓组织中含量为丰富,在一定的诱导条件下能分化为成骨细胞、成软骨细胞、神经细胞、骨骼肌细胞及心肌细胞.因其比较容易贴壁和形成成纤维样的克隆,也称为贴壁细胞或者成纤维细胞集落形成单位(CFU-F)、骨髓基质细胞(MSC)或间充质干细胞或间充质祖细胞(MPC).由于骨髓是其主要来源,因此统称为骨髓MSCs.

系统性红斑狼疮患者骨髓间充质干细胞多向分化能力异常/脐带间充质干细胞移植治疗MRL/lpr狼疮鼠的效果/脐带间质干细胞移植治疗对MRL/lpr狼疮鼠单核细胞趋化因子-1的影响

骨髓间充质干细胞在肾脏疾病中的应用进展

干细胞是人体内具有自我更新和定向分化潜能的原始细胞,它具有较强的多种分化能力.而间充质干细胞是中胚层来源的具有自我更新和多向分化能力的干细胞,主要存在于全身结缔组织和器官间质中,目前已从骨髓、脐血、脐带和胎盘、脂肪、肌肉中分离得到.

神经干细胞的生物学特性和体外培养鉴定

神经干细胞(NSCs)是具有自我更新和多向分化能力的细胞,存在于胚胎、胎儿和成人的脑室下区、齿状回、纹状体、室管膜下区等部位.通过机械分离或酶消化法能从其存在部位分离出NSCs.当培养基中表皮生长因子(EGF)和成纤维生长因子(bFGF)浓度均为20 ng·mL-1时,NSCs能通过对称分裂和不对称分裂在体外增殖,当培养基中bFGF浓度为1～10ng·mL-1时,NSCs可向神经元和胶质细胞分化.目前,表达Nestin、自我增殖和多潜能分化能力是鉴定NSCs的三大条件,但还没有NSCs特异性的鉴定方法.

建立永生化的中枢神经干细胞系

神经干细胞是中枢神经系统中具有自我更新和多向分化能力的细胞.体外培养的神经干细胞系具有无限增殖及可分化的特点,建立的神经干细胞系可用于对神经系统发育及中枢神经系统疾病治疗的研究.本文对目前已建的细胞系、永生化方法及其用于治疗各种神经损伤的动物模型的进展做了回顾.在治疗研究中,通过观察其移植后迁移、存活、整和、迁移及分化情况,可以认为神经干细胞的确具有应用前景,但仍需进行大量基础研究方可用于临床.

炎症牙髓干细胞：起步研究与未来发展

背景：炎症牙髓干细胞是近年来新发现的一类牙髓干细胞，目前尚无对其研究进展的系统评价。目的：系统评价炎症牙髓干细胞的研究进展。方法：以“(Pulptis OR Inflam* Dental Pulp* OR Human Dental Pulp with Irreversible Pulpitis)AND Stem Cel*/(牙髓炎OR炎症牙髓OR不可逆性牙髓炎)AND干细胞”为检索词检索PubMed、Web of Science、CNKI、WanFang及VIP数据库(时间：建库至2014年2月)，同时手检纳入研究的参考文献。对研究结果进行定性分析，进行炎症牙髓干细胞研究进展的全面总结。结果与结论：共纳入11篇文献进行研究，全面阐述炎症牙髓干细胞的研究历史、材料来源、细胞培养、表面标志、扩增能力、多向分化能力、动物模型及临床应用前景的研究进展。炎症牙髓干细胞研究尚处于起步，培养条件和动物模型的建立正处于探究阶段，扩增能力和多向分化能力研究结果尚有争议，而在免疫特性、亚群研究和临床应用方面研究较少。

现代医学200词131.神经干细胞(Neural stem cells)

神经干细胞是具有自我复制能力和多向分化能力的未分化神经系统细胞.从神经干细胞生成神经前体细胞和神经胶质前体细胞,再由这些细胞向神经细胞、星形细胞以及少突细胞分化.神经干细胞不仅存在于胎儿期,在成年哺乳动物的脑部(嗅球、侧脑室周围、海马齿状回)也可发现,并于近从人脑也成功分离、培养了神经干细胞.神经干细胞作为研究热点,其理由是①可以应用于阐明神经系统的分化机制;②可作为移植的供体细胞应用于功能再生和重建等.

成体神经干细胞和微环境

神经干细胞(neural stem cells,NSCs)是一种终身具有自我更新能力和多向分化能力的细胞,能分化产生神经系统的各类细胞.它具有以下特征:(1)可生成神经组织或来源于神经系统;(2)具有自我更新能力;(3)可通过不对称细胞分裂产生新的细胞[1].目前已从胚胎及成年脑组织中分离、纯化出NSCs[2].NSCs移植治疗能促进神经元的再生及脑组织的修复,重建神经网络,恢复已丧失的功能.然而,NSCs移植后,只有1%～3%的细胞长期存活.如果将这种现象简单归因于免疫排斥是不全面的,因为即使采用各种免疫移植药物,也不能显著延长细胞移植物的存活.同时,移植后干细胞很难继续保持自我更新的能力.这些现象可能导致移植的失败,严重制约了NSCs移植治疗在临床的应用.近研究发现,干细胞的自我更新、激活、增殖分化主要依赖于周围特殊的微环境,即niche(小生境).在哺乳动物脑内的某些区域也存在由内皮细胞、神经胶质细胞、细胞外基质构成的神经干细胞微环境.神经干细胞增殖、分化在其中进行,通过细胞间直接接触和间接联系(旁分泌、细胞因子等),维持神经干细胞正常的生理状态.如果将神经干细胞分离后,微环境不复存在,自我更新、增殖分化能力就可能降低[3～6].

去分化脂肪细胞的多向分化潜能及其应用

细胞治疗和组织工程是再生医学的核心内容,寻找理想的种子细胞又是细胞治疗和组织工程共同的关键问题.鉴于干细胞具有较强的增殖能力及潜在的多向分化能力等,目前已被作为细胞治疗和组织工程构建种子细胞的主要来源.相比胚胎干细胞存在伦理学、致瘤性问题,成体干细胞在再生医学中可能更具应用前景.脂肪组织广泛分布,容易获取,成熟脂肪细胞在一定条件下发生去分化,成为去分化脂肪(dedifferentiated fat,DFAT)细胞,不仅与脂肪来源的间充质干细胞(adipose-derived stem cells,ASCs)一样具有多向分化能力,而且DFAT细胞得率高,具有高度的同质性,表型稳定[1],其他细胞污染的机会少.所以,DFAT细胞有可能成为细胞治疗和组织工程种子细胞的新来源,在再生医学的应用中发挥重要的作用.