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应用转基因小鼠研究心力衰竭的肾上腺素能机制
目前已有20多种与交感神经肾上腺素能信息系统有关的小鼠品系问世(表1)[1～17],这些品系已形成系统,为心力衰竭(heart failure,HF)的研究提供了有力的工具.多数小鼠品系采用a-肌凝蛋白重链(a-myosin heavy chain, a-MHC)的启动基因来实现转入基因在心脏中的超表达,从而提高肾上腺素能信息系统中某种成分的含量.其他小鼠品系包括非特异性基因删除(disruption)和心脏特异性表达某种抑制肽.目前应用这一类小鼠品系的研究已经积累了大量的信息,许多发现已使我们对HF中肾上腺素能机制有了全新的认识.现阶段采用的研究手段主要有三种:(1)探索小鼠品系的心脏表现型;(2)品系间杂交(crossbreed)来实现基因互补(genetic complementation) ;(3)在小鼠品系上复制实验性 HF.
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表皮葡萄球菌基因删除突变株构建方法的研究
目的 探讨高效的表皮葡萄球菌基因删除突变株构建方法.方法 分别应用2种不同的穿梭质粒pMAD和pBT2,连接目的基因表皮葡萄球菌双组分信号转导系统arlS、saeRS和lytS的上下游片段,构建重组质粒,电转入金黄色葡萄球菌RN4220后转入表皮葡萄球菌1457,利用抗性和生物标志筛选出针对特定目的基因的突变株SE1457-△arlS、SE1457-△saeRS和SE1457-△lytS,比较2种方法的优、缺点.结果 利用pMAD和pBT2分别构建基因删除同源重组质粒pMAD-△saeRS、pBT2-△arlrlS和pBT2-AlytS,并均获得相应的表皮葡萄球菌基因删除突变株.在筛选过程中,以pMAD为载体构建基因删除突变株,仅需1轮抗性/蓝白斑筛选过程即获突变株;而以pBT2为载体构建基因删除突变株筛选方法,需经过5～10轮的筛选才可获得突变株.基因删除突变株经聚合酶链反应(PCR)和测序等鉴定确认.与野生株相比,SE1457-△arlS突变株的生物膜形成能力降低90.96%,而SE1457-△saeRS和SE1457-△lytS株的生物膜形成能力略有增加.结论 以pMAD载体构建表皮葡萄球菌突变株比较快速和简便.
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检测RhE抗原诊断新生儿溶血病1例体会
Rh抗原缺失是非常罕见的由RhD基因删除、RhCE基因突变失去活性所致疾病,现在报道的有D--、Dc-、DCW-、---[1].本院收治1例由于母亲Rh血型系统中E抗原缺失导致的新生儿溶血病(hemolytic disease of newborn,HDN)患儿,现报告如下.
