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核酸适配体在肿瘤学中的应用研究进展
核酸适配体是一类通过指数级富集的配体进化技术(SELEX)获得的能以较高的亲和力与各类生物靶标特异性相结合的单链DNA或RNA.利用细胞-SELEX (Cell-SELEX)技术筛选出来的核酸适配体越来越多的作为靶向分子应用在肿瘤细胞检测、靶向药物载体和siRNA的研究中.体内外研究证明,核酸适配体作为靶向分子能用于肿瘤细胞的体外检测和肿瘤组织的体内成像,并能显著提高药物或siRNA对肿瘤细胞的杀伤作用.
关键词： 核酸适配体 Cell-SELEX 肿瘤细胞检测 靶向药物载体 siRNA -
Cell-SELEX技术在肿瘤诊治中的应用进展
核酸适配体是运用指数富集的配体系统进化(systematic evolution of ligand by exponential enrichment,SELEX)技术从人工体外合成的随机寡核苷酸序列库中,经过多轮筛选后得到的单链DNA或单链RNA,具有靶标广泛、制备方便、稳定性好、无免疫原性等优点.细胞SELEX(cell-SELEX)是指将整个细胞作为靶标筛选特异性DNA适配体的技术,尤其适用于肿瘤细胞的核酸适配体筛选.本文简要介绍cell-SELEX技术获得的核酸适配体在肿瘤标记发现、肿瘤成像、肿瘤治疗及与纳米材料结合后用于肿瘤靶向研究的应用进展.
关键词： 核酸适配体 Cell-SELEX 肿瘤 纳米材料 -
Cell-SELEX筛选人骨肉瘤细胞MG-63核酸适配体的实验研究
目的 获取人骨肉瘤细胞MG-63的核酸适配体,并对核酸适配体克隆进行测序.方法 通过细胞指数富集的配基系统进化(Cell-SELEX)技术建立人骨肉瘤细胞核酸适配体筛选平台,对筛选过程中的文库PCR退火温度、PCR循环扩增次数进行优化和改进,获取人骨肉瘤细胞MG-63的核酸适配体,并对核酸适配体克隆进行测序.结果 在其他条件不变的情况下,文库PCR退火温度56.2℃、循环扩增15次能获得足量的扩增产物,挑选20个克隆进行测序,得到5条核酸适配体序列.结论 应用Cell-SELEX技术可成功筛选人骨肉瘤细胞MG-63核酸适配体,为后期骨肉瘤循环肿瘤细胞的分离检测奠定实验基础.
关键词： 核酸适配体 Cell-SELEX 人骨肉瘤细胞 -
结直肠癌细胞靶向适配体的Cell-SELEX筛选研究
目的:筛选特异性靶向早期结肠癌高亲和力的适配体,为结肠癌的诊断和治疗提供新的手段.方法:利用结肠癌细胞HCT116作为正筛细胞,非瘤细胞系作为反筛细胞,通过Cell-SELEX的方法筛选一组靶向结肠癌的适配体,并通过confocal和ELONA法验证特异性和亲和力.结果:得到100个靶向结肠癌细胞的适配体序列,能特异性靶向结肠癌细胞HCT116,其结合亲和力在8～22 nmol/L,其中适配体AptH8与HCT116细胞的结合Kd值为(8.81±0.36)nmol/L.结论:筛选得到的适配体能特异性靶向HCT116细胞并具有很高的亲和力,可作为进一步研究的靶分子.
关键词： 结直肠肿瘤 适配体 Cell-SELEX -
适配子在肿瘤研究中的应用进展
在20世纪90年代初，美国的 Tuerk等［1-2］在实验室中发明了一种叫做指数富集配基的系统进化（systematic evolution of ligands by exponential enrichment，SELEX）技术，由此技术筛选出来的寡核苷酸命名为适配子（aptamers）。适配子可以和抗体媲美，甚至优于抗体。具有以下特点［3］：（1）可以保持蛋白的天然结构属性，性能稳定，可以常温运输、长期保存；（2）筛选适配子过程简单，周期短（一般2个月左右）；（3）相对分子质量比抗体分子小，具有快速的血浆清除率、高组织穿透力、免疫原性低、变性可逆（数分钟内可以再生，因此可以反复使用）；（4）可在适配子中插入基因组或化学合成修饰（镜像异构适配子、糖基化、连接在大分子载体等方法）实现多层面调控，可直接用于生物检测、诊断及肿瘤靶向治疗。现结合肿瘤方面阐述细胞 SELEX（Cell-SELEX）及其适配子在肿瘤研究中的应用及意义。
关键词： 适配子 Cell-SELEX 肿瘤 应用
