热休克蛋白40和热休克蛋白70抑制N2a细胞内突变亨廷顿蛋白聚积和毒性

目的 研究热休克蛋白40(HSP40)和热休克蛋白70(HSP70)对N2a细胞内突变亨廷顿蛋白(htt) 聚集物形成和毒性的影响. 方法 应用荧光显微镜术和免疫印迹技术检测单独或共同过表达HSP40和HSP70对N2a细胞内转染的突变htt(含有150个谷氨酰胺重复数,150Q)聚集物形成的影响;应用四甲基偶氮唑盐(MTT)法分析细胞活力和比色法检测细胞内活性氧(ROS)含量. 结果 单独过表达HSP40或HSP70,尤其是共同过表达HSP40和HSP70显著减少150Q htt在N2a细胞内的聚积,各组含有聚集物的细胞为(n=1 000):仅表达150Q htt 组约50%,过表达HSP40组约12%,过表达HSP70组约15%,共同过表达HSP40和HSP70组约5%.MTT分析结果显示,单独尤其是共同过表达HSP40和HSP70能显著增加150Q细胞的活力( P<0.01, n =3),同时减少ROS产生( P<0.01, n =3). 结论 HSP40和HSP70通过抑制细胞内突变htt聚积以及减少氧化应激而增加150Q N2a细胞活力.

靶向自噬途径作为亨廷顿舞蹈病的潜在治疗策略

亨廷顿舞蹈病的病理特征是神经元内存在突变亨廷顿蛋白聚集体,自噬是清除突变亨廷顿蛋白的重要途径之一.深入研究自噬形成分子调控机制对于治疗亨廷顿舞蹈病有重要意义.自噬可通过抑制哺乳动物西罗莫司(雷帕霉素)靶蛋白(mTOR)活性来调节,同时,自噬也受非mTOR依赖途径的调控.通过调节这两条途径可加速突变亨廷顿蛋白的清除,进而降低突变亨廷顿蛋白毒性作用.本文综述了5条能够调节自噬作用的途径的研究进展.

突变亨廷顿蛋白的突触囊泡毒性

胞浆内非聚集型突变亨廷顿蛋白影响神经细胞的分化

目的:探讨胞浆内非聚集型突变亨廷顿蛋白(huntingtin, Htt)对神经细胞分化的影响.方法:利用磷酸钙沉淀法在培养的小鼠成神经瘤细胞(N2a细胞)瞬时或稳定转染编码正常或突变Htt的氨基末端片段的cDNA,观察突变Htt对视黄酸(retinoic acid ,RA)和无血清培养刺激N2a细胞突起生长的影响.结果:在瞬时转染的N2a细胞中,20Q的正常Htt氨基末端片段弥散分布在胞浆内,150Q的突变Htt氨基末端片段在多数细胞胞浆内形成聚集物.在稳定表达150Q的N2a细胞部分克隆中,150Q弥散分布在胞浆内.无论是含突变Htt聚集物的瞬时转染细胞还是仅在胞浆中表达非聚集型突变Htt的稳定转染细胞,其突起生长能力均较表达正常Htt的瞬时转染细胞和稳定转染细胞差.结论:胞浆内非聚集型突变Htt也能影响神经细胞的分化.

Caspase和calpain在神经元凋亡和亨廷顿舞蹈病发病机制中的作用

亨廷顿舞蹈病(Huntington disease,HD)是由亨廷顿蛋白(huntingtin,Htt)N端多聚谷氨酰胺序列延长引起的神经退行性疾病.一组半胱氨酸蛋白酶(caspase)和钙蛋白酶(calpain)可剪切突变Htt,产生毒性较大的N端Htt片段.近年的研究表明,该剪切作用导致N端片段的产生是舞蹈病发病机制中的重要一步,阻断这一过程可能为这种目前无法治愈的疾病提供潜在的治疗方案.

亨廷顿蛋白相关蛋白1（HAP1）的研究进展

亨廷顿病（huntington’s disease，HD）是一种遗传性神经退化性疾病，其发生癌症的危险性明显低于其一级亲属及一般人群，预示着HD患者体内应该存在某些可以抑制肿瘤发生发展的生物活性物质。近些年来亨廷顿相关蛋白1（huntingtin-associated protein 1，HAP1）因与亨廷顿蛋白相互作用并直接或间接影响了HD的发病机制从而倍受关注，论文就HAP1近些年的研究进展作一概括阐述，以期为预测肿瘤发生发展提供一种功能性分子标志物。

亨廷顿舞蹈病的分子病理研究进展

亨廷顿舞蹈病(Huntington's disease, HD)是一种常染色体显性遗传性神经退行性疾病.该病的发生是由一个编码亨廷顿蛋白(Huntingtin, Htt)的基因突变引起的.Htt氨基端有一段重复的谷氨酰胺序列,它的长度在正常人少于35个,而在HD患者则超过37个.突变后Htt的致病机制是当今神经退行性病变中研究的热门课题之一.笔者综述Htt致病机制中的几种主要学说.

关联物连锁反应致亨廷顿舞蹈病发病机制

目的 找出亨廷顿舞蹈病(Huntington's disease,HD)的致病机制,为临床治疗提供指导和参考.方法 综合运用HD研究的新成果,研究HD患者的宏观(临床)表现和分子病理特征.结果 找到了IT15基因CAG系列重复、亨廷顿蛋白聚集和神经元衰弱三者之间的内在联系,揭示了HD发病的根源及启动的关键开关.结论 HD发病的关键是神经元衰弱而引发的连锁反应；起病的根源在于突变型IT15基因致其调控和表达物功能失衡,使性激素和和生育细胞大增,同时又干扰破坏了线粒体正常工作和细胞自噬功能,让神经元长期过度兴奋而衰弱,得不到保护,终致HD发病.

亨廷顿病转基因动物模型研究进展

HD亨廷顿蛋白(htt)的发现使得建立与人类亨廷顿病(HD)有相似遗传基础的动物模型成为可能[1]。随机插入人类htt基因(包含聚谷氨酰胺重复序列)部分片段而构建的转基因动物模型[1],能模拟人类HD发病时的病因和病理特征且能被用来研究HD的治疗策略,现综述目前HD转基因动物模型的研究进展。

胰岛素抑制突变亨廷顿蛋白的聚积和毒性

目的:探讨胰岛素对细胞内突变亨廷顿蛋白(Huntingtin,htt)聚集物形成及其细胞毒性的影响.方法:利用脂质体转染法在培养的Hela细胞和HEK293细胞瞬时或稳定转染编码正常或突变htt的氨基末端片段的cDNA,检测不同浓度胰岛素刺激对细胞内突变htt聚集物形成以及细胞活力的影响.结果:在瞬时转染的Hela细胞和稳定转染的HEK293细胞中,含20个谷氨酰胺重复序列(20Q)的正常htt氨基末端片段弥散分布在胞浆内,而含150个谷氨酰胺重复序列(150Q)的突变htt氨基末端片段在多数细胞胞浆或核内形成聚集物.150Q的Hela和HEK293细胞经一定浓度的胰岛素刺激后聚集物的形成显著减少,细胞活力也明显提高.而胰岛素的刺激对20Q的细胞内正常htt的表达以及细胞活力无明显影响.结论:胰岛素能有效抑制细胞内突变htt聚集物的形成及其细胞毒性.

细胞凋亡在亨廷顿病发病机制中的研究进展

亨廷顿病(HD)患者及模型动物脑内均发现细胞凋亡的上调,导致选择性纹状体神经元丢失.突变型亨廷顿蛋白(Htt)引起凋亡前体蛋白的活化、包括半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)在内的caspases诱导内在凋亡途径、线粒体复合体Ⅱ的功能改变、钙离子信号的紊乱等在细胞凋亡中发挥重要作用,与HD的发病有关.凋亡抑制剂的应用可提高HD模型动物生存率,为HD的治疗开辟新途径.