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小鼠脊髓发育与神经细胞凋亡
目的：通过观察小鼠脊髓发育过程中神经元的增殖、分化与凋亡，探讨小鼠脊髓的发育过程及其调控机制。方法取妊娠第18天（E18）至生后第90天（P90）小鼠173只，用5’-溴脱氧尿嘧啶核苷（BrdU）技术标记增殖的神经干细胞，免疫荧光法（DCX，NeuN和Caspase8）标记脊髓中的新生神经元，成熟神经元和凋亡细胞。结果在胚胎与出生早期，BrdU阳性细胞均匀分布于小鼠脊髓各部位。随着小鼠日龄的增加，脊髓神经干细胞可以分化为神经胶质细胞与神经元。其后，位于神经管侧脑室的新生神经元向中间层（未来的灰质）迁移，逐渐分化为成熟神经元。后，神经元向脊髓中央聚集，灰质呈现典型的“H”型。随着神经元的分化，一些凋亡神经细胞出现在新生神经元与成熟神经元中。荧光双标显示，大部分的凋亡神经细胞都是新生神经元，说明神经元凋亡常常发生在新生神经元中。统计学分析表明，DCX、NeuN、Caspase-8标记的阳性细胞数均随小鼠日龄的增加而减少，说明神经元的分化和凋亡在脊髓的发育过程中逐渐减少。结论在脊髓的发育过程中存在着神经元的增殖、分化与凋亡。三者相互协同，共同调节脊髓的形成与发育。
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成年哺乳动物脑内神经元的增殖
成年哺乳动物的齿状回中仍保有一群具有增生能力并能分化成神经元的前体细胞,增生后分化成的神经元移入颗粒细胞层并发出轴突到苔藓纤维通路组成突触连接.在正常生理条件下这些细胞的再生能力很低,但在特殊环境或某些病理条件下增殖水平急剧升高,产生大量新生神经元.本文综述迄今为止有关这一类神经元前体细胞的研究结果.
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短时间睡眠剥夺对全脑缺血/再灌注大鼠海马神经元损伤的影响
目的 观察短时间睡眠剥夺对全脑缺血/再灌注大鼠海马神经元损伤的影响.方法 将实验大鼠随机分为3组,假手术组、全脑缺血/再灌注组、全脑缺血/再灌注+睡眠剥夺组.双侧颈总动脉夹闭合并低血压建立全脑缺血/再灌注模型,小平台水环境法进行睡眠剥夺干预(每天12 h,连续3 d),Morris水迷宫检测空间学习能力,HE染色观察大鼠海马神经元形态结构变化,TUNEL免疫组化检测海马神经元细胞凋亡,BrdU标记海马神经细胞增殖变化.结果 与假手术组相比较,全脑缺血/再灌注组大鼠的寻台潜伏期明显延长、海马神经元核固缩、数目减少、细胞凋亡和BrdU阳性细胞数明显增多;短时间睡眠剥夺干预能明显缩短全脑缺血/再灌注大鼠的寻台潜伏期(P<0.05),减轻全脑缺血/再灌注大鼠海马神经元核固缩和细胞凋亡,并能明显增加BrdU阳性细胞数(P<0.05).结论 短时间睡眠剥夺能促进海马神经元增殖、明显改善全脑缺血/再灌注大鼠海马神经元损伤.
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碱性成纤维细胞生长因子与宫内窘迫胎鼠神经元增殖
目的观察碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)干预窘迫胎鼠后脑神经元增殖情况.方法将32只怀孕15 d Wistar大鼠随机分为A正常对照、B窘迫对照、C窘迫干预及D预防组(窘迫前3 d预防)4组,采用神经营养因子bFGF干预.用免疫双标记法标记增殖的脑神经元细胞.结果A、B、C、D各组增殖神经元计数每高倍视野分别为4.50±2.49个,5.82±3.17个,17.25±5.48个,18.18±5.83个,F=128.18 P＜0.001.均有显著统计学意义.结论bFGF能够促进受损脑组织神经元增殖.
关键词： 碱性成纤维细胞生长因子 宫内窘迫 神经元增殖 -
快速眼动期睡眠剥夺对大鼠海马齿状回神经元增殖与凋亡的影响
目的 探讨快速眼动期(rapid eye movement,REM)睡眠剥夺(sleep deprivation,SD)对大鼠海马齿状回神经元增殖与凋亡的影响.方法 45只Sprague-Dawley大鼠按随机数字表法分为3组:①普通鼠笼对照组(cc,n=15)；②睡眠剥夺组(SD,n=15)；③睡眠恢复组(RS,n=15).采用改良多平台睡眠剥夺法连续72 h剥夺大鼠REM睡眠后,利用BrdU标记增殖细胞,运用免疫组织化学方法观察大鼠海马齿状回神经元增殖情况,并利用免疫荧光染色检测大鼠海马齿状回新生神经元标记物微管相关蛋白(doublecortin,DCX)和星形胶质细胞标记物胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidicprotein,GFAP)的表达情况.采用TUNEL法观察大鼠海马神经元凋亡情况.结果 免疫组化结果显示SD组及RS组每张切片BrdU阳性细胞平均数均明显少于CC组(P＜0.01),但是RS组与SD组相比无显著性差异(P＞0.05).免疫荧光染色结果显示,DCX阳性细胞在BrdU阳性细胞中所占比例大,各组间BrdU/DCX、BrdU/GFAP双阳性细胞的百分比相差不显著(P＞0.05).CC组、SD组及RS组各组海马区均未见TUNEL阳性细胞.结论 REM睡眠剥夺抑制海马齿状回神经元增殖,短期睡眠恢复后无显著改善.REM睡眠剥夺对海马齿状回神经元的分化和凋亡无影响.
