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中华大蟾蜍小肠黏膜上皮斯钙素-1基因表达与质膜Ca2+-ATP酶活性分析
目的 探讨小肠黏膜上皮斯钙素-1(STC1)基因表达与质膜Ca2+-ATP酶活性的关系.方法 基于耐受实验结果,将72只成体中华大蟾蜍随机分为高钙环境组(加0.1 mol/L CaCl2的自来水)、低钙环境组[加0.03mol/L 乙二胺四乙酸(EDTA)的自来水]及正常对照组(自来水),分别于暴露前及暴露后12h、24h、48h、72h、96h、120h、144h取血浆和小肠黏膜,利用比色法和半定量RT-PCR法分别检测血浆钙水平、质膜Ca2+-ATP酶活性和STC1 mRNA表达水平.结果 0.1mol/L氯化钙暴露致中华大蟾蜍血浆钙水平在12h和24h时显著高于对照组水平(1.9mmol/L)(P<0.05),48h时回复至正常,72h后持续升高;而12 ~ 48h内小肠黏膜上皮质膜Ca2+-ATP酶活性增强和STC1 mRNA水平上调,72h后回复至正常水平.0.03mol/L EDTA暴露则使中华大蟾蜍血浆钙水平下降,但质膜Ca2+-ATP酶活性和STC1 mRNA水平与对照组相比未出现明显变化.结论 血浆钙水平升高致小肠黏膜上皮质膜Ca2+-ATP酶活性升高,进而增强STC1表达,而STC1表达上调又以负反馈方式抑制质膜Ca2+-ATP酶的活性.
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环境钙对中华大蟾蜍肾脏斯钙素-1基因表达与质膜Ca2+-ATP酶活性的影响
目的 探讨血浆钙水平对肾组织斯钙素-1( STC1)基因表达与质膜Ca2+ -ATP酶(PMCA)活性的影响. 方法 将72只成体中华大蟾蜍随机分为3组,分别暴露于添加0.1 moL/L CaCI2的自来水、添加0.03mol/L乙二胺四乙酸(EDTA)的自来水及自来水中,于暴露前及暴露后12、24、48、72、96、120和144h取血浆和肾脏,利用比色法和半定量RT-PCR法分别检测血浆钙水平、PMCA活性和STCl mRNA水平,利用免疫组织化学染色确定STC1免疫反应. 结果 0.1mol/L CaCl2暴露致中华大蟾蜍血浆钙水平在12和24h时升高,48h时降至正常水平,48h后持续升高;12 ~ 48h内肾组织PMCA活性增强,STC1 mRNA水平上调,72h后回复至正常水平.而0.03mol/L EDTA暴露则引起血浆钙水平下降,但肾组织PMCA活性和STC1 mRNA水平与对照组相比未出现明显变化.免疫组织化学技术显示,肾脏远曲小管和集合管上皮细胞出现STC1免疫反应,且0.1mol/L CaCl2暴露可致STC1免疫反应增强. 结论 血浆钙水平升高致肾小管和集合管上皮细胞PMCA活性增强,STC1表达上调,而STC1表达上调又使血浆钙水平下降;但血浆钙水平持续升高则使PMCA活性下降,STC1基因表达下调.
关键词: 肾脏 斯钙素 质膜Ca2+-ATP酶 反转录-聚合酶链反应 免疫组织化学 中华大蟾蜍 -
人和哺乳动物斯钙素研究概况
斯钙素(stanniocalcin,STC)是近年来在人和哺乳动物中新发现的一种参与矿质代谢的调节蛋白.人和哺乳动物的STC基因定位于染色体的8p11.2~p21带上.STC为同型二聚体糖蛋白分子,由cDNA推测,其单体肽链由247个氨基酸残基组成.STC存在于多种组织细胞,但主要集中于肾脏的肾小管与集合管的主细胞和α-闰细胞中,以旁分泌或自分泌方式分泌.其生理作用在于抑制肠对Ca2+的吸收,促进肠对磷酸盐的吸收,抑制肾脏对磷酸盐的排泄及促进肾脏对磷酸盐的重吸收等.此外,还发现了另一种STC(STC2)的存在,且两者的生理作用不同.
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斯钙素与哺乳动物生殖的研究进展
斯钙素(stanniocalcin, STC)是一类首先在硬骨鱼类发现的糖蛋白激素,其生理作用在于调节钙磷稳态.近年来在人和哺乳动物组织中也发现存在有STC,并且以旁分泌方式参与机体的多种生理功能.本文综述了近年来哺乳动物胚胎发育、妊娠及哺乳期间STC基因在卵巢内的表达,早期胚胎植入过程中STC基因在子宫内膜的表达,以及人绒毛膜促性腺激素(hCG)对STC分泌的调节作用及其作用机制.研究表明,新生个体的STC基因表达首先出现在卵巢的膜细胞内, 随后出现于卵巢基质的间质细胞和内膜细胞; 但STC基因的表达产物STC却聚积于卵母细胞和黄体细胞内,提示STC参与卵母细胞的成熟过程.胚胎植入、妊娠、分娩与哺乳期间卵巢内STC基因表达量的动态变化行为,提示STC在哺乳动物生殖过程的各个环节均发挥一定的作用.
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斯钙素的研究进展
斯钙素(stanniocalcin,STC)是一种糖蛋白激素,早在硬骨鱼中发现,起着调节钙/磷平衡的作用.近年来在人和其它哺乳动物中发现也存在STC,先后分别命名为STC1和STC2.STC1基因可以产生两种形式的STC:一个是分子量为50kD的多肽,被称作STC50;另一种是一组分子量较大的不同形式的STC,被统称为big STC.STC1和STC2均可广泛表达于各种组织.STC成为一种新的肿瘤标志物,并且在心血管疾病、炎症细胞迁移、胚泡着床和子宫的蜕膜化等多方面都起重要作用.
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消化道恶性肿瘤患者外周血人类斯钙素1基因表达的检测
一、材料与方法1.材料:69例消化道恶性肿瘤患者均为东南大学附属中大医院普外科和胸心外科2002年9月~2003年7月住院病人,所有病例均经病理确诊.取术前外周血.以消化道恶性肿瘤组织标本为阳性对照,以非肿瘤患者(14例消化道炎症疾病人群)及健康捐献者(15例健康人群和5例妊娠期妇女)外周血为阴性对照.Trizon试剂为加拿大Sangon公司产品;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)试剂盒及Taq酶等为日本TAKARA公司产品.
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老年人甲状腺乳头状癌组织中斯钙素1表达及其临床意义
目的 探讨斯钙素1 (stanniocalcin 1,STC1)蛋白在老年人甲状腺乳头状癌中的表达及其与临床病理特征的关系,分析老年患者与非老年患者斯钙素表达的差异. 方法 采用免疫组织化学二步法检测老年患者甲状腺乳头状癌、结节性甲状腺肿和正常甲状腺组织以及非老年患者甲状腺乳头状癌中STC1的表达水平,应用蛋白免疫印迹(Western blot)检测不同甲状腺组织中STC1蛋白的表达. 结果 STC1在老年人甲状腺乳头状癌组的表达(60.9%),显著高于结节性甲状腺肿组(30.0%,P<0.05)和正常甲状腺组(15.0%,P<0.01).甲状腺乳头状癌组织中STC1蛋白的相对表达量为0.647±0.076,也显著高于结节性甲状腺肿组(0.280±0.039,F=9.965,P<0.01)和正常甲状腺组(0.248±0.065,F=1.143,P<0.01).甲状腺乳头状癌中STC1蛋白表达与患者的年龄、性别、肿瘤大径和部位无关(P>0.05),与肿瘤淋巴结转移以及临床分期相关(P<0.05).老年患者与非老年患者甲状腺乳头状癌组织中STC1表达比较,差异无统计学意义(F=0.007,P=0.934).结论 STC1蛋白与甲状腺乳头状癌发生发展相关,可能对甲状腺良恶性肿瘤的鉴别诊断、预后有一定参考意义.
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斯钙素1在卵巢上皮性肿瘤组织中的表达及其意义
卵巢上皮性癌(卵巢癌)是常见的妇科恶件肿瘤,具有不易早期发现、易转移、预后差的特点,病死率居妇科恶性肿瘤的首位,其病因至今仍不是很清楚,且缺乏早期诊断方法.
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鲤鱼斯氏小体匀浆液对小鼠血浆钙和磷含量的影响
斯氏小体(corpuscles of Stannius,CS)是硬骨鱼类独有的内分泌腺,其分泌的斯钙素(st anniocalcin,STC)具有抑制鱼类鳃、肠的钙转运和促进肾小管对磷酸盐的重吸收以调节钙、磷代谢的作用.现已证实,人和哺乳动物中也存在有STC,其生理作用表现在抑制肠对钙的吸收、促进肠对磷酸盐的吸收及促进肾小管对磷酸盐的重吸收以调节钙、磷代谢,并且对鱼的鳃钙转运也有抑制作用.那么鱼类CS分泌物能否对哺乳动物的钙、磷代谢产生影响呢?鱼类CS匀浆液对大鼠血清钙、磷含量的影响已有报道,而鱼类CS匀浆液能否也对小鼠血清钙、磷代谢产生影响,国内外未见报道.为此,我们观察了鲤鱼CS匀浆液对小鼠血浆钙、磷代谢的影响.
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外周血STC-1mRNA测定及其在结直肠癌诊断中的价值
目的 比较斯钙素(STC-1)mRNA在结直肠癌患者和健康人外周血中表达水平的差异,初步探讨STC-1 mRNA作为循环肿瘤标志物的临床意义.方法 采用荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测37例结直肠癌患者、18名健康人外周血STC-1 mRNA的表达水平,并对其中30例患者的癌胚抗原(CEA)和糖链抗原199(CA199)等血清肿瘤标志物进行比较分析.结果 结直肠癌患者与健康人的外周血STC-1 mRNA表达水平差异有统计学意义,患者组高于健康组;以受试者工作特征(ROC)曲线分析,发现STC-1 mRNA作为结直肠癌诊断指标具有较高的敏感性和特异性,其曲线下面积为0.730;以0.5为表达阳性界值,STC-1 mRNA检出结直肠癌的效能优于血清肿瘤标志物CEA和CA199的联合应用.结论 应用荧光定量RT-PCR检测结直肠癌患者外周血STC-1 mRNA 表达水平具有较高的诊断价值,其可能成为新的用于结直肠癌诊断的循环肿瘤标志物.
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斯钙素的生物学特征及其与人体肿瘤关系研究进展
斯钙素(stanniocalcin,STC)是一种糖蛋白激素,由鱼类独有的内分泌腺斯坦尼小体所分泌。在哺乳动物中,也存在STC样蛋白,分别命名为STC-1和STC-2,通过肾脏和胃肠道来调节钙和磷酸盐的代谢, STC-1与鱼类STC氨基酸序列显示高度同源性(约50%),STC-2则较低,有35%左右的氨基酸呈同源性。一些研究已发现它们的细胞定位、基因结构在不同的生理和病理情况下的表达,为阐明哺乳动物的STC功能提供线索。此外,STC-1和STC-2在众多肿瘤细胞系中有表达,提示哺乳动物STC具有除矿物质代谢外的多种生物学功能。
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斯钙素在肾细胞癌发病机制中的作用研究进展
肾细胞癌( renal cell carcinoma, RCC)是泌尿系统致命的恶性肿瘤之一,其发病机制尚不清楚。斯钙素( stan-niocalcin,STC)是一类具有多种生物学功能的糖蛋白激素。近年来,STC在肿瘤发病中作用日益受到重视,其中STC在肾细胞癌发病机制中作用研究已成为当前该领域研究的热点之一。文中从STC诱导肿瘤细胞适应低氧环境、促进肿瘤新生血管形成、促进肿瘤细胞增殖与凋亡、侵袭与转移以及抑制免疫反应几个方面,阐述STC在肾细胞癌发病机制中的作用,并对其相关研究进展作一综述,旨在为STC成为肾细胞癌诊断的标记物和靶点提供依据。
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人类斯钙素1的生物学特性研究进展
斯钙素(stanniocalcin,STC)是一类首先在硬骨鱼类,近年来又在人和哺乳动物中发现其功能与结构相似的糖蛋白激素,人类STC家族由STC1和STC2组成.
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人类斯钙素与肿瘤相关性研究进展
斯钙素(stanniocalcin,STC)是一种首先在硬骨鱼类中发现,并已被充分阐明的糖蛋白激素,近年来在人和哺乳动物中发现也存在类似的蛋白.根据其蛋白分子中氨基酸序列的差异可以分为STC-1和STC-2,在生物体内发挥着相辅相成的作用.STC以旁分泌和自分泌的方式参与机体的多种生理功能,它不但可以通过肾脏和胃肠道来调节钙和磷酸盐的代谢,而且在促进脑神经元的终末分化[1]、防止因大脑局部缺血造成脑神经元损害[2]以及影响骨骼和肌肉的结构和功能[3]等方面也有重要作用.随着对STC研究的不断深入,越来越多的研究表明STC的表达与人类癌症的发展过程相关,现将相关研究进展综述如下.
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高表达HIF-1α对肾癌细胞增殖及细胞内STC-1、Ca2+水平的影响
目的:研究高表达缺氧诱导因子(HIF-1α)对肾癌(GRC-1)细胞增殖和细胞内斯钙素-1(STC-1)、Ca2+水平的影响.方法:构建HIF-1α重组质粒,转染GRC-1细胞,MTT法检测GRC-1细胞的增殖,RT-PCR法检测GRC-1细胞内HIF-1α及STC-1的表达,荧光探针检测细胞内Ca2水平,同时设正常GRC-1细胞作为对照组.结果:与对照组相比,转染了HIF-1α的GRC-1细胞增殖率和STC-1表达水平显著增高(P<0.05),Ca2+水平明显降低(P<0.05).结论:HIF-1α可能参与了肾癌细胞的恶性增殖,其机制可能与STC-1下调肿瘤细胞内Ca2+水平有关.