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小热休克蛋白、细胞骨架和包涵体的形成
(small heat shock protein, cytoskeleton and information of the body inclusion)Head MW, Goldman JE∥ Neuropathology and applied neurobiology, 2000,26: 304 - 312本文主要论述了小热休克蛋白(HSP),特别是αB-crystallin(αB-晶体蛋白)和中枢神经系统疾病的关系,和细胞骨架元素的相互作用,以及它在包涵体形成中的作用.
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磷酸化蛋白质组学揭示小热休克蛋白27是胶质细胞源性神经营养因子引起神经突触生长的新信号分子
胶质细胞源性神经营养因子(GNDF)是胶质细胞分泌的一种神经营养因子,是胶质细胞对神经元发挥保护作用主要的途径.GNDF对多巴胺能神经元的保护及促生长作用明显,是神经保护治疗帕金森病(PD)首选神经营养因子.而对GDNF信号转导的机制尚不清楚,因此,我们用蛋白质组学的方法寻找参与GDNF信号转导通路的可能信号分子.
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小分子热休克蛋白22研究进展
小分子热休克蛋白是一组理化性质相对保守的蛋白质,在应激反应中发挥重要作用.作为小热休克蛋白(small heat shock protein,sHSP)亚家族成员之一的热休克蛋白22(heat shock proteins,HSP22),在细胞的生长,增殖和凋亡的调节过程中发挥着分子伴侣、激酶活性等多种生物学作用.现阶段,HSP22被发现与肿瘤、心血管疾病、神经系统疾病,细胞骨架疾病以及某些免疫性疾病的发生与发展紧密相关.HSP22由于其在生物学和医学领域的特殊作用和功能,已经成为众多科学家追捧的对象之一.本文将总结近期有关HSP22的结构、功能及在生物医学上的新研究进展.
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热休克蛋白22研究进展
热休克蛋白22(HSP22)属于小热休克蛋白(sHSP)亚家族成员,它与sHSP家族C-末端的α-晶体蛋白有同源性,分子量为22 kD.HSP22具有丝/苏氨酸激酶活性,广泛分布于哺乳动物的各种组织中,如肌肉、心肌、胎盘等.初步的研究发现HSP22在肿瘤细胞凋亡、心肌细胞肥大和凋亡中可能发挥着一定的作用,同时它还具有促进细胞生长和转化及分子伴侣的作用.
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日本血吸虫小热休克蛋白Sjp40的RNA干扰效应
目的 研究日本血吸虫小热休克蛋白(sHSP)Sjp40基因的RNA干扰效应及其干扰后日本血吸虫HSP60、HSP70、HSP90基因在mRNA水平出现的协同效应,观察各期虫体Sjp40、SjHSP60、SjHSP70、SjHSP90基因mRNA表达水平.方法 以双链RNA(dsRNA)实现RNA干扰.体外转录合成dsRNA,将Sjp40的dsRNA(dsSjp40)及阴性对照GFP的dsRNA(dsGFP)通过浸泡法转染到日本血吸虫成虫中,体外培养7d后用TRIZOL法提取其总RNA及总蛋白,实时荧光定量PCR(qPCR)检测Sjp40基因及SjHSP60、SjHSP70、SjHSP90基因mRNA的表达,Western blot检测Sjp40蛋白表达产物.提取各期虫体总RNA,qPCR检测Sjp40、SjHSP60、SjHSP70、SjHSP90基因的mRNA表达.结果 转染后Sjp40 dsRNA转染组目的基因的转录水平较阴性对照GFP dsRNA转染组下降了80％左右；蛋白质水平较空白对照及阴性对照组(dsGFP)出现明显降低,qPCR结果显示在Sjp40基因RNA干扰后SjHSP60、SjHSP70、SjHSP90基因的mRNA表达水平未发现明显变化.此四种HSPs在日本血吸虫生活史不同时期mRNA表达存在明显差异,Sjp40基因在虫卵期mRAN水平表达相对其他HSPs基因高.结论 dsSjp40 RNAi可特异性抑制Sjp40的表达,但对SjHSP60、SjHSP70、SjHSP90基因mRNA的表达没有明显的影响.
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家蝇Hsp20.6基因原核表达及其在高温胁迫下的表达分析
目的 对家蝇小热休克蛋白Hsp20.6基因进行原核表达,并研究高温胁迫下该基因在家蝇各生长发育阶段及成虫不同部位的表达变化情况,为终阐明其生物学功能奠定基础.方法 利用pET28a(+)原核表达载体构建家蝇Hsp20.6基因的重组表达载体,酶切、测序鉴定后,诱导蛋白的表达.采用半定量RT-PCR和实时荧光定量PCR研究Hsp20.6在家蝇卵、3日龄幼虫、蛹、成虫4个生长发育阶段及成虫头部、胸部、腹部的表达情况.结果 成功构建pET28a (+)-Hsp20.6重组表达载体,IPTG诱导表达产物大小约为Mr 21 000,与生物信息学预测结果相符.RT-PCR与实时荧光定量PCR表明Hsp20.6基因大在家蝇各个发育时期和成虫各部位有不同程度的表达,热激能上调该基因的表达(P＜ 0.05),以幼虫和成虫头部组织上调量高.结论 Hsp20.6基因属于热诱导型基因,参与了家蝇适应热胁迫的调控,可能在其中具有某种重要功能.
