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介绍一种改良伊红染液的配制法
病理常规制片HE染色中应用染胞质的染料多是伊红Y,使胞质的各种成分呈现深、浅不同的粉红色,将各种组织或细胞成分与病变的一般形态结构特点显示出来.但在实际应用当中,我们发现常规配制成的水溶性伊红或沉淀酸化伊红进行胞质染色时,伊红着色往往很难控制,出现过淡或核浆共染的现象.经过摸索,我们发现一种改良的伊红染液,着色效果较好,现介绍如下.
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浅谈组织病理学实验室的标准化(二)
1.2.4切片染色所有用于染色的液体每天过滤、定时更换.每天正式染色之前好用对照组织试染,检查液体是否有效,如苏木精染液有无结晶和沉渣、伊红染液色彩是否鲜艳等.
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商品化HE染色试剂的高效利用
高质量的HE染色切片是病理医师做出准确诊断的重要条件1,2.HE染色的主要材料为苏木精、伊红,目前多数医院病理科采用人工配制,其缺点是费时,染液质量不稳定[3].而商品化的苏木精、伊红染料质量稳定,可省去配制的时间,使用起来非常方便,但却因价格贵而应用较少.我们在保证染色质量的同时,通过调整染色时间,对商品化废弃BASO苏木精和伊红染液进行二次利用,增加了染色的切片数量,节约了使用成本,达到了对商品化试剂的高效利用.
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浅谈三种苏木素的配制及比较
在我们日常病理制片中,常用的亦是经典的方法是苏木素-伊红染色法.伊红染液配方比较固定,而在染色中起着至关重要作用的是苏木素染液的配制.其配制方法有多种,我们选用了其中三种配方进行染色比较.根据我院实际工作情况,认为Harris苏木素染液比较适合工作量大的病理科常规染色.
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Mayer和伊红染色液的改良及改良后染色效果
组织切片染色传统常用的方法是石蜡包埋、苏木精-伊红染色法(简称HE染色法),染色是制片中关键步骤.苏木精-伊红是组织切片制作常用细胞核和细胞质染料,而Mayer苏木精染液、Harris苏木精染液是为常用的细胞核染液.
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三种苏木精液的比较
在病理制片中,经典的方法是苏木精-伊红染色发.伊红染液的配方不多,而在染色中起至关重要作用的苏木精染液,其配方及配制方法就有多种,我们选用了其中3种配方进行染色比较,认为Mayer苏木精液比较适合一般病理科的常规染色.
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石蜡切片H-E染色法的经验和体会
随着科学技术的飞速发展,各种新尖仪器的不断涌现,组织学切片方法也日益增多,而且技术水平不断提高,质量要求更加完美和精确,但迄今为止石蜡包埋、H-E染色技术仍是形态学科及其它有关学科教学、科研广泛应用的一种技术.要制作出高质量的切片,只依靠完备的仪器和药品是不够的,更重要的必须具备熟练优良的技术.结合本人三十多年的工作经验和体会,就石蜡切片、H-E染色技术应用过程中经常遇到的某些问题,总结以下,以供初学者参考.1.取材:以人的材料为好,但人的材料较难得,因此须把握机会,大量取材,常规处理 ,分批石蜡包埋保存,以便随时切片,满足教学需要.1.1 取材,提前配好各种固定液,并备有大量原液备用,取材后立即整修组织块,换固定液后继续固定.1.2 取消化管时应注意的问题:因为消化管的粘膜上皮容易破坏和自溶,以往取材多为小片块,而且在外力(手压、刀切)作用下易造成粘膜损坏和肌层收缩.因此我们采用取大片及长段组织固定,将剖开的消化管贴在滤纸上.因消化管管壁薄,大片及长段固定不影响固定液的渗透,固定效果理想,然后再取未受损部位组织脱水,包埋,保存.1.3 消化管部位以空腹取材为理想,尽量避免冲洗,特别是胃的壁细胞在空腹时胞质着色非常鲜亮.2.载玻片和盖玻片的处理:载玻片好在无水乙醇中浸泡12～24hr,以达到彻底脱脂的目的,用前再用的确良白布擦净;盖玻片必须在清洗液中浸泡24hr后清水冲洗,浸无水乙醇数小时后用尼龙绸布擦净.3.伊红染液的浓度:以往常用0.5%～1%的伊红染液,此浓度脱色时间长,可以采用 95%乙醇450ml+1%复制伊红乙醇溶液50ml的稀释液染色.4.封片:将切片从二甲苯中取出后,用尼龙绸布将组织周围的二甲苯擦净,组织片避免干燥,滴少许中性树胶,将盖片在酒精灯上烤一下,以达到蒸发空气中水份及将盖片上肉眼不易观察到的污物烧掉,并有利于中性树胶的均匀扩散.5.磨刀:在自动磨刀机上加机油磨刀,磨后擦净刀上的污垢即可切片.免去鐾刀这一工序 ,因经过鐾刀皮鐾刀有时使刀口损坏,(鐾刀皮用时间长后,刀皮二边上翅或鐾刀角度稍有不当,用力不匀等均能造成刀口损坏).
