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全球脊髓灰质炎实验室建议(2003年)--在接种细胞时对病毒污染调查的准则
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来源于人胎肝干细胞的肝癌细胞系建立及初步研究
目的:研究肝癌细胞发生发展及变化规律,探讨胎肝干细胞体外长期培养的变异归宿问题.方法:原代分离培养人胎肝干细胞,从中筛选出一生长旺盛之集落,体外长期培养,并对其生物学特性进行初步鉴定.进行了细胞倍体分析;应用流式细胞仪分析了细胞周期;在Scid鼠体内接种细胞进行成瘤性验证.结果:从人胎肝组织中成功分离出一胎肝干细胞集落,在体外长期培养下可分化为肝癌细胞.其细胞增值核抗原指数高达100%;倍体分析常见多倍体细胞;流式细胞仪分析细胞周期,结果G1期细胞约占48%,G2期细胞约占18%,S期细胞约占34%.Scid鼠体内成瘤实验显示,接种细胞后2-3 wk成瘤,具有100%的成瘤性.显微镜下所见细胞大小不一,异型性明显,核仁大,核分裂活跃.结论:人胎肝中存在具有干细胞特性的原始细胞,确实可分化为肝癌细胞.从人胎肝干细胞中分离培养出肝癌细胞对于肝癌发生发展及其变化规律的深入研究奠定了基础.
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从临床送检的脑炎病人血液和脑脊液中分离出10株乙脑病毒
[目的] 从脑炎病人的血液和脑脊液中分离乙脑病毒. [方法] 对发病5日内的血液24份和脑脊液2份标本接种C6/36细胞,再做免疫荧光试验、乳鼠接种、血凝试验和血凝抑制试验. [结果] 证实有10株乙脑病毒,其中9株从血液分离,1株从脑脊液分离.6月份分离到7株、7月份2株、8月份1株. [结论] 说明我省6月、7月和8月有乙脑流行.
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组织块HE染色法观察脱细胞真皮基质上接种细胞的生长情况
在组织工程皮肤的体外构建中,及时观察脱细胞真皮基质(acellular dermal matrix,ADM)表面接种的表皮细胞或成纤维细胞的形态和密度,对判断细胞存活情况、生长速度及融合程度具有重要意义.但由于真皮组织不透明,在相差显微镜下无法直接观察接种细胞的生长情况[1].笔者拟利用组织块HE染色技术进行相应改进.
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SD大鼠体外神经元培养的探讨
目的 在不同时间加入阿糖胞苷,并分别采用两种不同培养基对神经元进行体外培养,通过观察新生SD大鼠神经元细胞的生长情况和神经元纯度,建立更合理的神经元体外培养方法. 方法 采用出生24h以内的SD大鼠脑组织,采用传统的神经元体外培养方法,于不同时间加入阿糖胞苷,之后每48h半量换培养基一次,于10天后观察神经元细胞的生长情况.结果表明采用neurolbasal培养基,并与接种细胞后24h加入阿糖胞苷,可以获得更高纯度,更高活性的大脑皮质神经元.
