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细粒棘球绦虫CamKⅡ及Cavβ1基因在虫体发育过程中的表达
目的 研究钙信号通路成员EgCamKⅡ基因及EgCavβ1基因在细粒棘球绦虫各发育阶段(棘球蚴生发层、原头蚴、成虫)差异表达.方法 分别从细粒棘球绦虫的成虫、原头蚴以及棘球蚴生发层中提取总RNA,用RevertAidFirst Strand cDNA Synthesis kit反转录成cDNA,根据CamKⅡ基因序列及Cavβ1基因序列设计跨越内含子的基因特异性引物,用SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR(Real-time PCR)技术,通过由质粒DNA建立的标准曲线分别对CamKⅡ基因及Cavβ1基因进行定量分析,选用的内参基因为β-actin.结果 Real time PCR显示CamKⅡ基因及Gavβi基因均在成虫阶段高表达,CamKⅡ基因在成虫中的表达量是包囊生发层的20 295倍,在原头蚴的表达量是包囊生发层的1152倍;Cavβ1在成虫的表达量是包囊生发层的5 526倍,在原头蚴的表达量是包囊生发层的636倍.两基因的相对表达量SQ/Actin分别为13.4和1.9.通过组间单因素方差分析,两基因在成虫阶段的表达与其他两个发育阶段相比具有显著的差异(P＜0.05).结论 吡喹酮的靶蛋白CamKⅡ基因及Cavβ1基因在细粒棘球绦虫各发育阶段的表达具有显著的差异,表达可能与虫体发育不同阶段特有的生物学功能有关.
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有氧运动对C57BL/6小鼠骨骼肌肌浆网钙释放相关基因表达的影响
目的:运用基因芯片技术研究6周有氧跑台运动对C57BL/6小鼠骨骼肌基因表达的影响,探究长期有氧运动引起小鼠骨骼肌组织的适应性改变.方法:本研究采用雄性C57BL/6小鼠20只,随机分为安静对照组(C)和有氧运动组(E),每组10只.运动组采用75%大摄氧量强度的有氧跑台运动,1次/天,60分/次,5次/周,为期6周.实验后各组随机选取4只小鼠骨骼肌进行基因芯片分析.分离小鼠股四头肌,提取总RNA,经荧光标记后进行芯片杂交,利用芯片扫描仪记录荧光信号,并利用相关软件对所得数据进行分析,以发现组间差异表达具有显著性的基因.结果:6周有氧运动后,与对照组相比,有氧运动组共筛选出差异表达基因723个,其中,表达上调基因510个,表达下调基因213个;钙信号通路相关差异表达基因6个,其中Gnall和Pdgfra表达上调,Phka1、Plcd4、RYR1和Ppid表达下调.
关键词： 有氧运动 肌浆网 钙信号通路 Ryanodine受体1 磷脂酶C-84 -
灯盏乙素乙酯的体外脑缺血神经保护活性及其作用机制
目的 考察灯盏乙素结构修饰物灯盏乙素乙酯的透血脑屏障性能,对脑神经细胞的保护作用,并探讨其作用机制.方法 采用体外血脑屏障模型,结合HPLC技术评价药物的透血脑屏障能力,采用体外原代培养大鼠大脑皮层神经细胞,结合噻唑蓝法测定细胞存活率,采用激光共聚焦技术评价药物对谷氨酸、氯化钾诱导细胞内钙超载的影响.结果 与对照组比较,灯盏乙素乙酯对血脑屏障的透过率可达86.9％,能明显提高细胞存活率(P＜0.01),且对谷氨酸致神经细胞内钙超载有拮抗作用(P＜0.01).结论 灯盏乙素乙酯能有效穿透血脑屏障,且能通过对抗细胞内钙离子超载发挥脑缺血神经保护作用.
