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  • 人外周血单个核细胞与肝细胞HBV受体蛋白的表达

    作者:田景惠;林少为;唐丽华;李冬;陈强;李宝华;徐希柱;田兆菊;焦凤萍

    目的 检测乙型肝炎病毒 (HBV) 受体蛋白在人外周血单个核细胞 (PBMC) 与肝细胞的表达情况, 探讨HBV进入PBMC的可能途径, 以期了解HBV感染PBMC的可能机制.方法 用淋巴细胞分离液分离人PBMC.用RIPA提取人PBMC和肝细胞 (肝脏肿瘤癌旁组织) 总蛋白, 采用Western blot以检测HBV受体蛋白在两种细胞的表达情况.结果 Western blot检测肝细胞HBV受体蛋白阳性, 与hNTCP抗体反应条带位于 (35~40) ×103之间, 与预期一致;人PBMC蛋白无此反应条带, 即hNTCP检测阴性.结论 PBMC不表达肝细胞表面的HBV受体蛋白, 病毒可能循非受体途径进入PBMC, 或PBMC表面的HBV受体与肝细胞表面的HBV蛋白受体蛋白不同.关于HBV感染PBMC的具体机制尚需进一步研究.

  • 人外周血单个核细胞与肝细胞Na+-牛磺胆酸共转运蛋白(NTCP)基因的表达

    作者:田景惠;卢冰如;董竞;赵跃然

    目的 检测人外周血单个核细胞(PBMC)与肝细胞Na+-牛磺胆酸共转运蛋白(NTCP)基因的表达情况,探讨HBV感染PBMC的可能途径,研究乙型肝炎病毒(HBV)感染PBMC机制. 方法 用淋巴细胞分离液分离人外周血单个核细胞,用TRIzol提取人外周血单个核细胞与肝细胞总RNA,经逆转录合成cDNA.设计合成一对针对NTCP-mRNA的特异性引物,对人外周血单个核细胞及肝细胞的cDNA进行PCR扩增,扩增产物用1.5%琼脂糖凝胶电泳鉴定,以检测NTCP基因在两种细胞的表达情况. 结果 RT-PCR电泳显示,用NTCP基因特异性引物对肝细胞cDNA扩增,扩增产物大小在200~300 bp之间,与NTCP基因理论值(246 bp)相符,即肝细胞NTCP基因表达阳性;人外周血单个核细胞的cDNA扩增后进行电泳鉴定,未出现特异性条带,即NTCP基因表达阴性. 结论 人外周血单个核细胞不表达NTCP基因,提示其表面的HBV受体可能并非NTCP,或HBV循非受体途径进入PBMC,关于HBV感染PBMC的具体机制尚需进一步研究.

  • HBV受体研究新进展

    作者:林少唯;李冬;唐丽华;李宝华;徐希柱;陈强;田兆菊;田景惠

    HBV流行久远、传播广泛.HBV感染所致的乙型肝炎一直是全球性公共卫生问题.HBV通过与靶细胞表面的受体结合从而启动感染.HBV被发现后的四十余年中,人们一直致力于寻找其受体,虽有诸多报导但均未被认可,直到Na+-牛磺胆酸共转运蛋白(NTCP)被鉴定为HBV的功能性受体并得到了公认.这一发现使得人们对HBV的感染机制有了进一步认识,并为HBV的基础研究与临床治疗提供了新的方向.

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