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狂犬病病毒抗原、抗体的实验室诊断研究进展
狂犬病是由狂犬病病毒引起的人兽共患烈性传染病,发病后死亡率几乎为100%.近年来,我国狂犬病的发病率呈上升趋势.当前急需一种快速、准确、经济、简便、易于推广的实验室诊断方法.本文从抗原诊断、抗体诊断对目前国内外狂犬病病毒的实验室诊断作一综述,并分析各种方法的优点和缺点,为狂犬病的快速实验室诊断提供参考依据,以更有效地预防和控制狂犬病.
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应用重组抗原诊断弓形虫病的研究进展
随着分子生物学的发展,对弓形虫重组抗原的研究取得了一系列的进展,多种弓形虫抗原基因通过基因工程手段得以表达并应用于弓形虫防治研究,这些抗原包括膜表面抗原(surface antigen,SAGs)、致密颗粒蛋白(dense granule proteins, GRAs)、棒状颗粒蛋白(rhoptry proteins,ROPs)、微线体蛋白(microneme proteins,MICs)以及基质抗原等[1]。重组抗原在弓形虫病诊断方面的研究一直存在两个方面,一方面是针对每一种抗原进行单独研究以确定其免疫特性,是筛选高效诊断抗原的主要途径,同时对于弓形虫感染机制等方面的研究也有重要意义;另一方面是针对复合抗原的研究以期望克服单一抗原在免疫诊断中的不足,优化得到佳的抗原组合,达到佳的诊断结果。当前人们对于弓形虫重组抗原的研究主要集中于两个方向,一是利用抗原性进行弓形虫免疫学检测,二是利用免疫原性用作疫苗进行免疫保护,本文就弓形虫重组抗原在弓形虫免疫诊断中的新研究进展做一综述。
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标记人血清抗体IgG胶体金免疫法对不同标本幽门螺杆菌抗原的测定
目的 探讨胶体金免疫法检测患者不同体液中幽门螺杆菌(H.pylori,HP)抗原的可行性.方法 (1)筛选高效价人抗-H.pylori免疫血清,依次应用盐析和层析技术分离纯化获得抗-HP血清IgG;(2)采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,标记纯化的抗-HP抗体,制成金标抗体;(3)将纯化的特异性人抗-HP抗体同定于硝酸纤维素膜上,制成胶体金标免疫反应模板.分别取粪便、胃液、血清与反应模板结合,然后与金标记的人抗-HP抗体下37℃进行反应,阳性结果呈现肉眼可见的红斑.结果 分别以金免疫HP抗原检测、尿素酶实验、血清学抗体检测3种方法对60例患者进行检测对比.HP抗原金免疫检测以胃液准确性高,为69.04%,粪便检测次之,为57.14%,血清检测准确性低,为40.48%;检测胃液与传统的尿素酶实验的符合率为61.67%,与血清HP抗体检测的符合率为65%.结论 胶体金免疫法测定HP抗原诊断HP感染是可行的,本方法具有操作简便、快速的特点,尤其以胃液和粪便检测效果更好,但该项实验的敏感性和特异性有待进一步提高.
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超声联合血清前列腺特异抗原诊断前列腺癌的临床价值
前列腺癌的早期诊断和筛检主要依靠前列腺特异抗原(PSA)的检测和超声检查,而后确诊则依赖于活检组织病理结果.本文回顾性分析了经病理诊断的前列腺癌、前列腺增生患者及健康男性体检者血清PSA、超声声像图及前列腺特异抗原密度(PSAD)的变化,并应用工作特征曲线(ROC曲线)评价超声联合PSA对前列腺癌的诊断价值.
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感染性疾病与化学疗法
一、细菌感染性疾病1.军团菌感染诊断近年以检测尿中抗原诊断军团菌感染颇为盛行,现时已有Binax公司与Biotest公司生产的EIA诊断试剂盒,以及Binax公司出品的免疫层析法快速诊断试剂盒等3种.Binax公司产品独对L.pneumophila血清1型的特异性强,而Biotest公司药盒则可用以广泛检出军团菌属菌.
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014 脂多糖抗原诊断钩端螺旋体病相关性葡萄膜炎
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058免疫层析试验检测尿抗原诊断儿童肺炎链球菌肺炎
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152利什曼原虫抗原诊断美洲皮肤利什曼病患者的活动性病变和陈旧性疤痕
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血吸虫病与其他寄生虫病网络精选Ⅵ(2004.09.01~2004.12.31)
1血吸虫病1.1试纸条测试阴极循环抗原诊断血吸虫病本研究评价了一种新的试纸条测试感染者尿液中的血吸虫抗原以诊断血吸虫病.试验的原理是在硝化纤维条上吸附胶状的针对血吸虫阴极循环抗原(CCA)的抗体,检测时将尿样与之反应.在坦桑尼亚Mwanza用该试纸条诊断一组高感染度的学校儿童,结果表明具有很高的敏感性,并且其结果与用测定虫卵数确定的感染度有关,也与用ELISA检测的阳极循环抗原与阴极循环抗原的结果相符.在血吸虫病非流行区学童中进行的研究表明该试纸条的特异性为90%.该试纸条诊断血吸虫病方法简便,不需要专门设备或特别的培训,且性能稳定,如果不受潮在常温下可保质3个月,为密封包装,便于运往需要应用的血吸虫病疫区.此外,该试验也易于规范化[1].
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四型分枝杆菌培养液抗原诊断结核病的比较
鉴于各型分枝杆菌对人的致病性不同,但它们作为血清学诊断抗原是否有区别?此方面的报道尚不太多,为此我们以人毒型结核杆菌、牛型减毒结核杆菌(卡介苗)及鸟型结核杆菌为研究对象,用非典型的堪萨斯分枝杆菌做为另一参照,比较研究上述四型分枝杆菌培养液抗原诊断人类活动性肺结核的免疫反应性,籍以筛选特异性强,敏感性高的血清学诊断结核病的抗原.现予以报道.
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粪便抗原检测诊断幽门螺杆菌现症感染
目的评价应用免疫酶联吸附试验(ELISA)检测粪便中幽门螺杆菌(Helicobacter pylori)抗原诊断H.pylori现症感染的敏感性和特异性.方法应用14C呼气试验以及幽门螺杆菌粪便抗原(HpSA)试验,对100例因上消化道不适就诊,怀疑有H.pylori感染的患者进行检测,观察两种检查的符合率.结果14C呼气试验和HpSA同时阳性者38例,14C呼气试验阳性而HpSA阴性者4例;14C呼气试验和HpSA同时阴性者57例,14C呼气试验阴性而HpSA阳性1例.以14C呼气试验作为金标准计算,HpSA检测方法的敏感性为90.48%,特异性为98.28%.结论幽门螺杆菌抗粪便原检测与14C呼气试验有较高的符合率,而且简便易行,不需特殊设备,解决了无法进行呼气试验的婴幼儿和有肺部疾患者的非侵入性幽门螺杆菌现症感染诊断问题,是一种非侵入性幽门螺杆菌现症感染诊断的新方法.
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抗肺炎衣原体蛋白酶样活性因子单克隆抗体在冠状动脉硬化患者肺炎衣原体感染诊断中的初步应用
目的 制备抗肺炎衣原体蛋白酶样活性因子重组蛋白的单克隆抗体,检测冠状动脉硬化患者的外周血单核细胞和冠状动脉瘤斑块中肺炎衣原体特异性抗原.方法 以肺炎衣原体蛋白酶样活性因子重组蛋白免疫小鼠,与SP2/0细胞融合后,采用间接ELISA和Western blot筛选阳性杂交瘤细胞,经亚克隆建株;小鼠体内诱生腹水法制备单克隆抗体,用硫酸铵沉淀法对腹水中的单克隆抗体进行纯化,测定其亚类和效价;检测肺炎衣原体标准株以鉴定其特异性.建立间接ELISA方法检测冠状动脉硬化患者外周血单核细胞和冠状动脉瘤斑块标本中的肺炎衣原体抗原.结果 获得4株稳定分泌抗蛋白酶样活性因子重组蛋白的杂交瘤细胞株,分别命名为3F8、7B9、8C4和11B5,其效价分别为1∶28000、1∶16000、1∶38000和1∶12000;经亚类鉴定,3F8和7B9杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体为IgG2b,其它2株均为IgG1.以制备的单克隆抗体建立间接ELISA检测肺炎衣原体抗原,与经典PCR方法的检测结果比较,检出率具有较高的一致性.结论 成功获得了抗肺炎衣原体蛋白酶样活性因子重组蛋白的特异性单克隆抗体,能特异地识别天然肺炎衣原体蛋白酶样活性因子抗原,有望应用于冠状动脉硬化患者肺炎衣原体感染的抗原诊断.
关键词: 肺炎衣原体 冠状动脉硬化 衣原体蛋白酶样活性因子重组蛋白 单克隆抗体 抗原诊断 -
半乳糖氧化酶在临床大肠癌筛检的应用价值
大肠癌是常见的消化道恶性肿瘤,我国每年约4万人死于该病[1].近年来,发病率有逐步上升趋势[2].大量病例表明,改善大肠癌预后的重要因素是早期诊断与早期治疗.而大肠癌开始可没有症状或症状不明显,一旦临床确诊,多已进入中晚期[3,4].因此寻找早期诊断大肠癌的方法尤为重要.近年来有作者利用大肠癌和癌前病变粘膜所产生的粘液其T抗原暴露的特点,用半乳糖氧化酶-雪夫氏法(Galactose oxidase-Schiff sequence,简称Go-S)检测直肠粘液T抗原诊断早期大肠癌,引起了国内外学者的重视,现综述如下.
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检测RhE抗原诊断新生儿溶血病1例体会
Rh抗原缺失是非常罕见的由RhD基因删除、RhCE基因突变失去活性所致疾病,现在报道的有D--、Dc-、DCW-、---[1].本院收治1例由于母亲Rh血型系统中E抗原缺失导致的新生儿溶血病(hemolytic disease of newborn,HDN)患儿,现报告如下.
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胶体金标记技术在法医物证检验中的应用进展
胶体金标记技术广泛应用于临床早早孕诊断、便隐血检验、前列腺癌早期诊断及溶组织内阿米巴抗原诊断等.近几年,在法医物证检验中也采用了该类技术[1].本文将回顾展望胶体金技术检验原理及其在法医物证检验上的具体应用.