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CXCR4基因修饰骨髓间充质干细胞对照射损伤小鼠造血重建的影响
本研究旨在探讨过表达CXCR4基因的骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)移植对照射损伤小鼠造血重建的影响.采用293FT细胞包装共表达EGFP和Cxcr4慢病毒载体,转导MSC建立稳定共表达EGFP和CXCR4基因MSC(CXCR4-MSC),同时建立稳定表达EGFP的MSC(EGFP-MSC)作为对照,经尾静脉输注接受亚致死剂量(总剂量3.5Gy)照射的BALB/c小鼠.MSC的输注量5×105,设立单纯照射组为单纯对照组.观察小鼠的一般生存状态,统计小鼠生存率.分别于第3、7、14、21、28 d外周血计数白细胞(WBC)和红细胞(RBC),流式细胞术(FCM)检测网织红细胞与网织血小板比例及血小板(Plt)数量.病理观察移植后各组骨髓、脾脏恢复情况.PCR检测MSC在受鼠体内植入情况.结果表明,各组小鼠移植后血象呈先下降、继而上升的一般趋势,其中WBC在1周后开始恢复,且CXCR4-MSC组恢复速度明显快于其他两组,差异具有统计学意义(P＜0.05).病理结果显示,CXCR4-MSC组造血器官照射损伤后修复较快.PCR检测发现,移植后7、14、21、28 d均可在受亚致死剂量照射的受鼠体内检测到供体MSC.结论:输注过表达CXCR4基因的MSC可增加MSC植入,并促进照射损伤小鼠造血功能的恢复.
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HIF-1α在照射损伤铁过载疾病红系造血中的表达及意义
目的:研究铁过载状态下缺氧诱导因子(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)在照射损伤小鼠体内的表达及其对红系造血的影响和机制.方法:20只小鼠随机分成Ctrl(对照)、IR(单纯照射损伤)、IO(照射损伤+铁过载)和RAPA(雷帕霉素给药)共4组,验证铁过载模型;培养红系集落:CFU-E(红系集落形成单位)和BFU-E(爆式红系集落形成单位);流式细胞术检测骨髓原始红细胞:早期Ter119+ CD71+和晚期Ter119+ CD71-的比例;RT-PCR检测骨髓细胞HIF-1α及相关信号分子表达.结果:IR和IO组的HIF-1α的表达均较Ctrl组明显升高,且IO组明显高于IR组(P＜0.05).IR和IO组的晚期红细胞比例、BFU-E和CFU-E数目均较Ctrl组明显降低,且在IO组明显低于IR组(P＜0.05).IR和IO组HIF-1α相关信号分子表达明显高于Ctrl组(P＜0.05).应用mTOR抑制剂RAPA时HIF-1α及相关信号分子的表达明显降低,BFU-E明显升高(P＜0.05).结论:照射使HIF-1α表达升高,红系造血集落和晚期原始红细胞比例下降,铁过载更加重了损伤.雷帕霉素可缓解部分损伤,提示铁过载可通过HIF-1α介导损伤红系造血.
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胡桃楸树皮乙醇提取物的抗氧化研究
目的 探讨胡桃楸树皮乙醇提取物(AEBJ)对X线照射损伤小鼠的抗氧化活性.方法 将60只雄性健康昆明小鼠随机分为假照射组,照射对照组,高、低剂量照射给药组和高、低剂量单纯给药组共六个试验组,测定小鼠肝组织匀浆中H2O2与MDA的含量.结果 高、低剂量AEBJ照射给药组均能抑制照射所致的H2O2的含量增高,高剂量 AEBJ照射给药组能抑制照射所致的MDA含量增高,低剂量AEBJ照射给药组对照射所致的MDA含量无影响.结论 胡桃楸树皮乙醇提取物对X线照射损伤小鼠具有一定的抗氧化活性.
