首页 > 文献资料
-
1例Aα链Arg16突变所致遗传性异常纤维蛋白原血症家系研究
目的:1例遗传性异常纤维蛋白原血症家系的表型及基因型分析.方法:用血凝仪检测凝血指标,Clauss法检测纤维蛋白原活性,血浆蛋白电泳检测纤维蛋白原含量,Native-PAGE检测血浆纤维蛋白原及其片段分布,应用PCR扩增纤维蛋白原基因FGA、FGB和FGC所有外显子及其侧翼序列,PCR产物纯化后直接测序并进行基因分析.结果:先证者APTr正常,PT、TT明显延长;纤维蛋白原含量正常而活性降低,先证者姊妹及其女儿的检测结果与之相似,患者配偶所有指标均正常.基因分析显示,先证者纤维蛋白原FGA基因2号外显子g1233-a杂合碱基改变(密码子CGT→CAT),导致了Arg16His错义突变,该突变来源于父系.结论:该错义突变是导致遗传性异常纤维蛋白原血症的原因.
关键词： 遗传性异常纤维蛋白原血症 Aα链Arg16突变 凝血酶时间 纤维蛋白原 -
遗传性异常纤维蛋白原血症一家系的发病机制分析
目的 对1个遗传性异常纤维蛋白原血症家系进行表型和基因型分析及相关功能结构研究,探讨其发病机制.方法 采集2012年11月浙江大学医学院附属第二医院诊断的遗传性异常纤维蛋白原血症1家系4代共19人外周静脉血,检测凝血指标,用免疫比浊法检测纤维蛋白原抗原含量.通过血栓弹力图检测血小板功能和纤维蛋白原功能；用PCR方法对纤维蛋白原基因FGA、FGB和FGG所有外显子及其侧翼序列进行基因扩增,通过正反向测序明确突变位点；用还原性十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)免疫印迹法检测纤维蛋白原突变体；采用分子结构模拟图分析预测突变氨基酸对纤维蛋白原的结构和功能的影响.结果 先证者(Ⅱ-1)及其母亲(Ⅰ-2)、妹妹(Ⅱ-2)、弟弟(Ⅱ-3)、女儿(Ⅲ-1)纤维蛋白原活性明显下降,凝血酶时间(TT)明显延长,但纤维蛋白原抗原含量、活化部分凝血酶原时间(APTT)和D-二聚体(D-dimer)均在正常范围内.血栓弹力图显示Ⅰ-2、Ⅱ-2、Ⅲ-1血小板功能正常,纤维蛋白原功能减低,而先证者及Ⅱ-3纤维蛋白原功能严重降低.基因检测结果显示先证者及Ⅱ-3存在纤维蛋白原FGG c.1001 A＞C纯合突变,导致γ链第308位天冬酰胺(Ash)突变为苏氨酸(Thr)(p.Asn308Thr),而Ⅰ-2、Ⅱ-2及Ⅲ-1存在纤维蛋白原FGG c.1001 A＞C(p.Asn308Thr)杂合突变,家系其他成员均未检测到此突变位点.还原性SDS-PAGE免疫印迹未检测到纤维蛋白原突变体.分子结构模拟图显示突变位点Asn308位于纤维蛋白原二聚体结合的接触面,此位置氨基酸突变会对纤维蛋白的正常形成及功能产生影响.结论 该家系成员异常纤维蛋白原血症系显性遗传,纤维蛋白原FGG c.1001 A＞C突变是引起该家系异常纤维蛋白原血症的发病原因.
-
纤维蛋白原α链Arg16His突变导致遗传性异常纤维蛋白原血症
目的 对1例遗传性异常纤维蛋白原血症家系进行表型和基因型分析.方法 用血凝仪检测先证者家系3代6人外周血活化部分凝血酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)和凝血酶时间(TT).纤维蛋白原活性和抗原分别用Clauss法和免疫比浊法检测,Western blot检测血浆纤维蛋白原及其片段分布.PCR扩增纤维蛋白原基因FGA、FGB和FGG所有外显子及其侧翼序列,PCR产物纯化后直接测序进行基因分析.结果 先证者APTT、PT正常,而TT明显延长;纤维蛋白原抗原正常,而纤维蛋白原活性降低,先证者母亲和胞姐表型与之相似.基因分析显示先证者纤维蛋白原FGA基因2号外显子g1233→a杂合碱基改变(密码子GGT→CAT),导致Arg16His错义突变,该突变来源于母系.结论 纤维蛋白原α链Arg16His杂合错义突变是遗传性异常纤维蛋白原血症的分子基础之一.
关键词： 遗传性异常纤维蛋白原血症 凝血酶时间 纤维蛋白原 基因突变 -
纤维蛋白原γ链9511/9512delG缺失突变导致的遗传性异常纤维蛋白原血症家系研究
目的 对1例遗传性异常纤维蛋白原血症家系进行表型和基因型分析.方法 检测凝血指标以明确诊断;用DNA直接测序法对患者纤维蛋白原(Fg)基因FGA、FGB和FGG的所有外显子及其侧翼序列进行测序寻找基因突变,对有突变的序列进行反向测序和TA克隆测序证实.结果 先证者活化部分凝血酶原时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)正常,凝血酶时间(TT)为27.2 s,Fg活性明显下降,抗原在正常范围内,活性显著低于抗原;先证者母亲、姐姐、女儿检测结果与之相似.基因分析发现,先证者及其母亲、姐姐、女儿呈Fg FGG基因9511/9512delG杂合突变,该突变来源于母系.结论 Fg FGG基因9511/9512delG突变为引起家系异常纤维蛋白原血症的原因.
关键词： 遗传性异常纤维蛋白原血症 纤维蛋白原 基因突变 -
7个纤维蛋白原γ链Arg275位点突变导致的遗传性异常纤维蛋白原血症家系的基因型与临床特征分析
目的 探讨7个纤维蛋白原(Fg)γ链275位点突变导致的遗传性异常纤维蛋白原血症家系的基因型与临床特征的关系.方法 根据先证者常规凝血功能实验、Fg活性(Fg:C)及Fg抗原(Fg:Ag)等指标诊断遗传性异常纤维蛋白原血症;PCR法扩增Fg基因的全部外显子及侧翼序列,扩增产物经纯化后直接测序,明确突变位点进一步分析基因型与临床特征的关系.结果 7个家系15例患者存在Fgγ链275位点突变.其中4个家系为Arg275Cys突变,其余为Arg275His突变.15例患者有7例无症状,8例有出血相关症状:包括牙龈出血、损伤后出血难止、月经量过多等.同一突变类型(Arg275Cys或Arg275 His)的家系成员间,其临床表现从无症状到重型不等.结论 γ链Arg275是本地区的突变热点,其临床表型以无症状或出血表现为主,未见血栓表现.纤维蛋白原基因突变的类型与临床表型无绝对相关性.
关键词： 遗传性异常纤维蛋白原血症 纤维蛋白原 基因突变 临床表型 -
一个纤维蛋白原α链Arg 19 Gly突变导致的遗传性异常纤维蛋白原血症家系
目的 对一个遗传性异常纤维蛋白原血症家系进行表型和基因型分析.方法 采集先证者及其父母外周血进行常规出凝血检查,用Clauss法和免疫比浊法分别检测纤维蛋白原(Fbg)活性和抗原.抽提DNA,PCR扩增纤维蛋白原基因FGA、FGB和FGG所有外显子及其侧翼序列,DNA测序并与基因文库比对确定基因异常.结果 先证者活化部分凝血酶原时间(aPTT)、凝血酶原时间(PT)正常,凝血酶时间(TT)为28.10 s,Fbg活性明显下降,抗原在正常范围内,活性显著低于抗原;其父表型检测结果与之相似.基因分析发现,先证者及其父亲Fbg、FGA基因第2外显子均存在A1211G杂合碱基置换,导致Arg19Gly错义突变.结论 鉴定该病例为遗传性异常纤维蛋白原血症,Fbg α链Arg19Gly杂合错义突变是致病原因.
关键词： 遗传性异常纤维蛋白原血症 纤维蛋白原 基因突变 -
遗传性异常纤维蛋白原血症的实验室诊断现状分析
纤维蛋白原（fibrinogen，Fbg）是血浆中含量高的一种凝血因子，在凝血酶的作用下，从纤维蛋白原转化为纤维蛋白，同时作为血小板膜糖蛋白Ⅱb／Ⅲa的受体，参与血小板活化聚集，因此与出血性疾病及血栓性疾病密切相关。纤维蛋白原的异常通常分为高纤维蛋白原血症、低纤维蛋白原血症、无纤维蛋白原血症、异常纤维蛋白原血症和低异常纤维蛋白原血症5种类型，按病因可分为遗传性和获得性。其中遗传性异常纤维蛋白原血症（inherited dysfibrinogenemia）是因纤维蛋白原基因缺陷导致纤维蛋白原结构和功能异常的遗传性疾病。本文将结合国内临床实验室出血筛查实验项目的开展情况，分析遗传性异常纤维蛋白原血症的国内实验室诊断现状，及国内所报道家系的临床表型，以期提高临床医护人员该病的认识。
关键词： 遗传性异常纤维蛋白原血症 实验室诊断 -
1例纤维蛋白原A链Arg16His错义突变导致的遗传性异常纤维蛋白原血症家系的研究
目的 对1例遗传性异常纤维蛋白原血症家系进行表型和基因型分析.方法 用凝血仪检测先证者家系成员的凝血指标:凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)、纤维蛋白原(Fg).提取先证者及其家属外周血DNA,通过聚合酶链反应(PCR)扩增纤维蛋白原3个基因FGA、FGB和FGG的外显子和侧翼序列,将扩增产物纯化后直接测序并进行序列比对.结果 先证者PT、APTT正常,TT延长,Fg活性明显降低;先证者母亲及哥哥的各项凝血指标与之相似,其姐姐各项凝血指标均正常.测序结果比对发现,先证者FGA基因2号外显子发生g.1233 G＞A杂合突变(密码子CGT→CAT),引起Arg16His错义突变;先证者母亲和哥哥发生同样的杂合突变.结论 FGA基因错义突变引起的A链Arg16His杂合突变是导致该家系遗传性异常纤维蛋白原血症发生的原因.
关键词： 遗传性异常纤维蛋白原血症 家系 纤维蛋白原 错义突变 -
一个遗传性异常纤维蛋白原血症家系的FGG基因突变分析
目的 对1个遗传性异常纤维蛋白原血症家系进行临床表型和基因突变分析,探讨其分子发病机制.方法 应用STA-R全自动血凝分析仪检测先证者及其家系成员共3代5人的血浆凝血酶原时间(prothrombin time,PT)、活化部分凝血活酶时间(activated partial thromboplastin time,APTT)、凝血酶时间(thrombin time,TT)、D-二聚体(D-Dimer,D-D)、纤维蛋白(原)降解产物(fibrin degradation products,FDPs)、纤溶酶原活性(plasminogen activity,PLG:A);分别采用Clauss法与免疫比浊法测定血浆纤维蛋白原活性(fibrinogen activity,Fg:C)和抗原(fibrinogen antigen,Fg:Ag)水平.提取DNA,PCR法扩增纤维蛋白原的FGA、FGB和FGG基因所有外显子和侧翼序列,对PCR产物纯化后直接测序进行基因分析.采用Swiss软件对突变进行模型分析.结果 先证者及其母亲和姐姐PT、APTT轻度延长,TT明显延长,Fg:C显著降低,Fg:Ag、PLG:A、D-D和FDPs都在正常范围内;先证者的弟弟和女儿各项指标均正常.基因分析发现先证者FGG基因第8外显子7476位G>A杂合错义突变,导致纤维蛋白原 γD结构域的275位精氨酸突变为组氨酸(Arg275 His);其母亲和姐姐均存在同样的Arg275 His杂合突变,弟弟和女儿为正常野生型.结论 该遗传性异常纤维蛋白原血症患者FGG基因Arg275 His杂合错义突变可能与其血浆纤维蛋白原活性降低有关.
关键词： 遗传性异常纤维蛋白原血症 聚合酶链反应 FGG基因 突变 -
纤维蛋白原γ链Arg275His突变所致的遗传性异常纤维蛋白原血症家系分析
目的 对1个遗传性异常纤维蛋白原血症家系进行临床表型和基因型研究,了解其分子遗传学发病机制.方法 抽取家系18名成员外周血,进行凝血指标检测;提取血浆纤维蛋白原,进行SDS-PAGE电泳;PCR扩增纤维蛋白原FGA、FGB、FGG基因所有外显子以及侧翼序列.PCR扩增产物进行测序,确定突变位点.结果 先证者肝肾功能、凝血酶原时间与活化部分凝血活酶时间均正常,但凝血酶时间显著延长.纤维蛋白原活性明显降低,而抗原浓度在正常范围,先证者母亲、弟弟及侄子的表型检测结果与其相似.基因测序结果显示,先证者及其母亲、弟弟及侄子FGG基因第8外显子发生了g.5877G＞A杂合突变,导致275位的精氨酸(Arg)被组氨酸(His)取代.FGG基因第8外显子g.5877G＞A突变为已报道的致病突变.结论 纤维蛋白原γ链Arg275His错义突变为该遗传性异常纤维蛋白原血症家系的致病原因.
关键词： 纤维蛋白原 突变 遗传性异常纤维蛋白原血症 -
八个遗传性异常纤维蛋白原血症家系的临床和基因突变分析
目的 分析8个遗传性异常纤维蛋白原血症家系的临床及基因突变特征.方法 用全自动血液凝固分析仪检测先证者及部分家系成员的凝血酶原时间(prothrombin time,PT),活化部分凝血活酶时间(activated partial thromboplastin time,APTT),凝血酶时间(thrombin time,TT),纤维蛋白原(fibrinogen,Fg)活性,硫酸鱼精蛋白对TT的校正试验及凝血因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅷ、Ⅸ、Ⅹ、Ⅺ、Ⅻ的活性,D二聚体以及纤维蛋白(原)降解产物用免疫比浊法分析血浆中Fg抗原含量;用PCR法扩增先证者及家系成员纤维蛋白原基因FGA、FGB和FGG的所有外显子及其侧翼序列并测序,寻找基因突变.结果 8例遗传性异常纤维蛋白原血症先证者肝、肾功能、凝血因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅷ、Ⅸ、Ⅹ、Ⅺ、Ⅻ的活性均正常;PT及APTT正常或轻度延长;纤维蛋白(原)降解产物、D二聚体均正常;凝血酶时间明显延长,且硫酸鱼精蛋白不能使其明显缩短;Fg抗原含量均正常,但活性明显下降,Fg抗原含量/活性比值＞2.8个家系中,1例为FGA基因g.1233G＞A(p.AαArg35His)杂合突变,4例为FGB基因g.9692A＞G(p.BβAsn190Ser)杂合突变,3例为FGG基因g.10819 G＞A(p.γArg301His)杂合突变,此外还有2个多态性位点:FGA基因g.9308A/G(p.AαThr331Ala)多态性;FGB基因g.12628 G/A(p.BβArg478Lys)多态性.结论 8例遗传性异常纤维蛋白原血症先证者分别由p.AαArg35His、p.BβAsn190Ser和p.γArg301 His突变所致,其中p.BβAsn190 Ser国内未见报道,且p.BβAsn190Ser和p.γArg301 His可能为中国人的热点突变.
关键词： 遗传性异常纤维蛋白原血症 纤维蛋白原 凝血酶时间 -
一个纤维蛋白原γ链Arg275His突变导致的遗传性异常纤维蛋白原血症家系
目的对一个遗传性异常纤维蛋白原血症家系进行表型和基因型分析.方法采集家系3代5人外周血,吸取上层血浆用血凝仪检测活化部分凝血酶原时间、凝血酶原时间、凝血酶时间、蛋白C活性、蛋白S活性和抗凝血酶活性,纤维蛋白原活性和抗原分别用Clauss法和免疫比浊法进行检测.以常规酚-氯仿法抽提家系所有成员外周血基因组DNA,PCR扩增纤维蛋白原基因FGA、FGB和FGG所有外显子及其侧翼序列,PCR产物纯化后直接测序以检测基因突变.结果先证者活化部分凝血酶原时间、凝血酶原时间正常,凝血酶时间超出正常上限值2倍以上,纤维蛋白原活性明显下降,抗原也低于正常范围,且活性显著低于抗原;其母表型检测结果与之相似.基因分析显示先证者呈纤维蛋白原FGG基因第8外显子g.5678 G>A杂合碱基置换,导致Arg275His错义突变,该突变来源于母系.结论纤维蛋白原γ链Arg275His杂合错义突变是引起该家系异常纤维蛋白原血症的原因.
关键词： 遗传性异常纤维蛋白原血症 纤维蛋白原 基因突变 -
一个遗传性异常纤维蛋白原血症家系表型分析
目的 对一个遗传性异常纤维蛋白原血症家系进行表型分析.方法 先后采集该家系3代共5人静脉血,用全自动血凝仪检测凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血酶原时间(APTT )、凝血酶时间(TT)、纤维蛋白(原)降解产物(FDP)、D-二聚体(D-Dimer)和抗凝血酶Ⅲ活性(AT-Ⅲ),分别使用Clauss法和免疫比浊法对纤维蛋白原的活性和抗原性进行检测.结果 先证者PT和APTT 正常,TT明显延长,纤维蛋白原活性明显下降,抗原性在正常范围,其母亲的表型检测结果 与之相同.家系其余成员检测结果 均在正常范围.结论 该遗传性异常纤维蛋白原血症家系表现为低纤维蛋白原血症,无出血或血栓.
关键词： 遗传性异常纤维蛋白原血症 家系 表型分析
