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肝星状细胞基质金属蛋白酶-2表达及其调控机制分析
基质金属蛋白酶(MMPs) 是细胞外基质降解的重要蛋白水解系统,探讨MMPs与肝星状细胞细胞外基质(ECM)关系已成为国际研究肝脏纤维化的热点.我们使用不同条件培养肝星状细胞,观察星状细胞分泌MMP-2 酶活性及mRNA表达,研究细胞外基质重塑的分子生物学机制,探讨细胞外基质与MMP s表达之间的相互作用.
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结肠癌LS174细胞培养上清对树突状细胞诱导CTL杀伤效应的影响
目的:观察结肠癌细胞对人单个核细胞源树突状细胞(DC)诱导的CTL杀伤效应的影响,探讨其在人体的免疫逃避机制.方法:人外周血分离单个核细胞以GM-CSF和IL-4培养DC,用结肠癌LS174细胞的提取物诱导DC,并激活T淋巴细胞抗肿瘤效应,在此不同过程中,体系中加入人结肠癌细胞系LS174的培养上清液.以正常培养体系为对照,通过计算细胞毒杀伤率检测不同条件下DC激活同种异体T淋巴细胞杀伤肿瘤细胞的能力.结果:LS174细胞培养上清液作为条件培养的DC,在DC培养的早期阶段对DC激活过程有明显的影响(在DC培养的第1 d加入肿瘤培养上清组,第3 d加入肿瘤培养上清组vs正常培养的DC组,DC培养第5 d加入肿瘤培养上清组,DC激活T淋巴细胞过程加入肿瘤培养上清组,P＜0.05).结论:肿瘤细胞分泌的某些物质可在DC培养的早期阶段影响肿瘤的免疫,这可能是肿瘤细胞逃避机体免疫监视的机制之一.
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粒细胞集落刺激因子促进血管新生及损伤修复的研究进展
粒细胞集落刺激因子(granulocyte colony-stimulating factor,G-CSF)首先发现于1980年,Mtcalf等在研究中发现内毒素处理过的小鼠血清或者条件培养其中的一种成分具有诱导小鼠骨髓单核细胞白血病细胞集落分化的功能[1].他们进一步纯化得到这种物质,将其命名为粒细胞一巨噬细胞分化
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间充质干细胞条件培养液促进肺癌细胞上皮间质转化
背景：骨髓间充质干细胞与肿瘤关系的复杂性严重限制了间充质干细胞的应用，因此明确间充质干细胞在肿瘤生长与转移中的作用已成为迫切需要解决的问题。
目的：探讨人骨髓来源间充质干细胞对人非小细胞肺癌A549、PAa细胞上皮间质转化的影响。
方法：收集间充质干细胞上清液作为间充质干细胞条件培养液培养肺癌细胞 A549和 PAa，观察肺癌细胞形态、上皮间质转化标志物E-钙黏素、N-钙黏素、波形蛋白以及其转录因子Slug、Snail、Twist等的表达以及肺癌细胞运动迁移能力的变化。
结果与结论：①与对照组对比：加入条件培养液的肺癌细胞形态发生了间质样变化，且E-钙黏素表达降低，N-钙黏素、波形蛋白mRNA与蛋白表达水平上升，转录因子Slug、Snail、Twist mRNA表达水平也明显增加，同时细胞运动迁移能力增强。②结果表明人骨髓来源间充质干细胞可以促进非小细胞肺癌A549、PAa细胞上皮间质转化过程，增强肺癌细胞运动迁移能力。 -
脐带间充质干细胞条件培养液联合透明质酸修复小鼠皮肤损伤
背景:已有文献报道,间充质干细胞可通过分泌大量生物活性因子有效促进组织的损伤修复过程.目的:观察脐带间充质干细胞条件培养液联合透明质酸修复小鼠皮肤损伤的效果.方法:将40只BALB/c小鼠随机分成4组:生理盐水对照组、干细胞条件培养液组、透明质酸组、干细胞条件培养液+透明质酸凝胶组.全层皮肤切除当天即进行治疗,用无菌棉签分别蘸取生理盐水、脐带间充质干细胞条件培养液、透明质酸、脐带间充质干细胞条件培养液+透明质酸凝胶液各0.5 mL,均匀涂抹于皮肤创面上,每天早、中、晚各涂抹治疗1次,连续涂抹治疗7 d,测量创面的大小,计算创面愈合率.取干细胞条件培养液+透明质酸凝胶组和生理盐水对照组造模后第5天的创面组织,通过免疫组化和qRT-PCR实验检测损伤修复相关因子的表达.结果与结论:①与生理盐水对照组相比,各治疗组创面面积均有不同程度缩小.脐带间充质干细胞条件培养液+透明质酸凝胶组创面愈合率明显高于其他治疗组(P < 0.01);②与生理盐水对照组相比,干细胞条件培养液+透明质酸凝胶组血管内皮生长因子、基质金属蛋白酶9蛋白呈强阳性表达;③脐带间充质干细胞条件培养液+透明质酸凝胶组血管内皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子、转化生长因子 β、基质金属蛋白酶9的mRNA表达明显高于生理盐水对照组(P < 0.01);④结果表明,脐带间充质干细胞条件培养液联合透明质酸凝胶液能加速小鼠皮肤创面修复,治疗效果明显优于单纯使用干细胞条件培养液或透明质酸凝胶液.
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参麦注射液对急性缺氧-复氧心肌细胞凋亡的影响
目的:观察参麦注射液对急性缺氧-复氧后心肌细胞凋亡的影响,并探讨其可能机制.方法:采用出生3天的Wastar大鼠,原代培养心肌细胞.实验分为3组:(1)正常组:心肌细胞不做任何处理,按正常条件培养(含10%胎牛血清的低糖DMEN培养液,青霉素100U/L,链霉素100 mg/L,37℃、5%CO2、91%湿度环境培养).(2)缺氧-复氧组:将心肌细胞进行缺氧-复氧处理.(3)参麦注射液组:心肌细胞复氧同时加入5 mL/L(1g/L)参麦注射液15 min.模型使用化学缺氧法,将Na2S2O4加入无糖、无氧的D-Hank's液中,制成缺氧溶液(pH 7.0-7.4),替换正常培养液使心肌细胞缺氧5min,再将缺氧液换成正常含血清培养液孵育15 min模拟再给氧,复制心肌细胞急性缺氧-复氧(anoxia-reoxygenation,A/R)模型.然后以Annexin V-FITC/PI双染色法,用流式细胞仪检测细胞早期凋亡百分率;激光扫描共聚焦显微镜观察Fluo-3负载的心肌细胞内钙离子水平的变化.
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白念珠菌菌丝的诱导培养
目的探讨培养条件对白念珠菌菌丝形成的影响.方法改变培养基成分、pH值及培养温度,诱导白念珠菌芽管(早期菌丝相)的形成.结果M199、1640培养在pH7.0、37℃振荡培养时可诱导白念珠菌生长为纯的菌丝.结论优化培养条件可获得纯的白念珠菌菌丝相细胞.
