首页 > 文献资料
-
Cyclin G1参与肝炎病毒复制及肝癌发生发展的分子机制
细胞周期蛋白G1(Cyclin G1)是近年来发现的周期蛋白G家族成员之一,在功能上并不是参与细胞周期调控的主要分子,新研究发现Cyclin G1在肝炎病毒复制与肝癌发生发展中发挥重要作用.本研究将对Cyclin G1蛋白序列特征、其与microRNA的相互作用、以及在HBV、HCV复制及肝癌发生发展中的作用和相关机制进行综述,这将有利于为相关疾病的研究提供一定的理论依据和新的研究思路.
-
肝硬化患者血清 MicroRNA-122含量与分级关系
目的：研究肝硬化患者血清中 MicroRNA-122含量与肝硬化分级的相关关系，为MicroRNA-122用于肝硬化分级提供实验依据。方法实时荧光定量 PCR 法测定78例肝硬化患者血清中 MicroRNA-122的含量。肝硬化患者根据 Child-Pugh 进行分级。比较各组间 MicroRNA-122和肝硬化分级的关系。结果肝硬化失代偿期与代偿期的血清 miR-122的 Ct 值差异具有统计学意义（37±3 vs.26±4，P=0.002）；腹水与无腹水肝硬化患者血清 miR-122的 Ct 值差异具有统计学意义（36±3 vs.27±2，P=0.002）；上消化道出血与无上消化道出血患者血清 miR-122的 Ct 值差异具有统计学意义（38±3 vs.23±3，P=0.002）；有自发性细菌性腹膜炎和没有的患者血清 miR-122的Ct 值差异具有统计学意义（36±4 vs.25±2，P=0.002），没有这些并发症的肝硬化患者 miR-122水平显著降低。Child-Pugh A 级与 Child-Pugh B 级肝硬化患者血清 miR-122的 Ct 值没有统计学差异（22±3 vs.27±5，P=0.200），Child-Pugh A 级患者血清 miR-122的 Ct 值显著低于 Child-Pugh C 级患者（22±3 vs.41±3，P=0.001），同时 Child-Pugh B 级患者血清 miR-122的 Ct 值显著低于Child-Pugh C 级患者（27±5 vs.41±3，P=0.001）。结论血清中 MicroRNA-122含量可作为肝硬化患者分级的生物标记物。
关键词： 肝硬化 MicroRNA-122 生物学标记 -
microRNA-122的单核苷酸多态性与肝癌易感性和术后复发的关系
目的 探讨micro RNA-122(miRNA-122)的SNP位点与肝细胞癌(HCC)遗传易感性以及术后早期复发的关系.方法 采用病例-对照研究设计,提取173例HCC患者石蜡切片组织DNA,PCR扩增,查找miRNA-122包括编码基因在内共357个碱基序列内的SNP位点,分析其与HCC易感性及术后早期复发的关系.结果 上述miRNA-122序列中只找到rs17669T＞C位点,基因库中标注的其他7个SNP位点均未发现.rs17669各基因型分布频率:C/C型7例(4.0％)、T/T型110例(63.6％)、C/T型56例(32.4％).C/C基因型相对于T/T基因型为肝癌的保护因素(OR=0.213,95％ CI:0.062-0.732);rs17669各基因型与术后复发无关.结论 rs17669可能与有乙肝背景的江西汉族人群肝癌遗传易感性相关,与术后复发无关.
关键词： 肝细胞癌 MicroRNA-122 单核苷酸多态性 遗传易感性 复发 -
microRNA-122在乙型肝炎病毒感染及相关疾病中的研究进展
乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)与宿主肝细胞存在复杂的相互作用并与病毒复制及相关慢性肝病、肝硬化、肝癌的发生\发展有关.microRNA(miRNA)-122是肝脏含量多的特异性miRNA,大量研究揭示了其在肝细胞脂质代谢、增殖、生物钟调节及丙型肝炎病毒感染过程中的重要性.近几年的研究发现肝细胞miRNA-122与HBV复制及HBV的致病机制存在密切关联,并与乙肝肝硬化及肝癌的发生及预后相关,基于miRNA-122的诊断及治疗方法的探索也取得了一定的进展.本文综述了miRNA-122与乙型肝炎病毒复制及相关疾病进展的研究现状.
关键词： 乙型肝炎病毒 MicroRNA-122 肝硬化 肝癌 -
microRNA-122和microRNA-146a联合检测有望用于布病诊断
目的:研究布病患者血浆microRNA-122(miR-122)和microRNA-146a(miR-146a)作为布病新型诊断标记的可行性.方法:采用实时定量PCR方法,测定验证样本(56例未经治疗的布病患者、32例经过治疗的布病患者和40例健康志愿者)血浆中microRNAs的表达水平.结果:miR-122和miR-146a在布病患者和健康志愿者之间的表达水平差异有统计学意义(P<0.001),并且表达水平与布病患者血清抗体有关,但与患者是否经过抗生素治疗以及患者是否具有明显临床表现均无相关性.miR-122和miR-146a组合诊断的AUC值为0.935,高于两者任何一个单独检测.结论:miR-122和miR-146a组合在布病诊断中具有潜在应用价值.
-
MicroRNA-122表达与大鼠慢性肝损伤的相关性
目的 观察microRNA-122(miR-122)在大鼠慢性肝损伤早期和晚期的表达及其与大鼠肝损伤的关系.方法 用40%CCl4 经皮下注射2周和6周后分别建立大鼠早期慢性肝损伤模型(早期病变组,n=10)和晚期慢性肝损伤模型(晚期病变组,n=10),另设正常组(n=10)作为对照.提取肝组织总RNA,将总RNA逆转录为cDNA,采用TaqMan探针法进行Real-time PCR检测,观察miR-122的表达变化.结果 成功建立大鼠慢性肝损伤早期和晚期病变模型;早期病变组和晚期病变组miR-122表达分别下降至正常组的27.0%和5.6%. 结论 miR-122在慢性肝损伤早、晚期呈进行性下降,与肝损伤存在密切关系.
关键词： MicroRNA-122 肝损伤 TaqMan探针法 脂质过氧化 -
microRNA-122在脂肪肝患者血清中的变化
目的 探讨血清中microRNA-122成为脂肪肝肝脏损伤标志物的可能性和意义.方法 收集60例中度至重度脂肪肝患者,分别在用药后0周、1周、2周、4周和8周5个时间点采集血液,运用实时荧光定量PCR法和酶速率法对microRNA-122、谷丙酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)和γ-谷氨酰转移酶(GGT)进行测定,对结果进行比较和线性相关分析.结果 血清中microRNA-122在脂肪肝患者用药后5个时间点(0周、1周、2周、4周和8周)的表达量显著高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);脂肪肝用药后各时间点microRNA-122与ALT、AST、ALP和GGT均为正相关,相关系数(r)分别为0.63、0.67、0.54和0.58.结论 microRNA-122表达升高可以反映脂肪肝患者肝脏损伤,可能成为脂肪肝肝脏损伤早期诊断和治疗评估的一种新的检测标志物.
-
microRNA-122抑制肝肿瘤细胞HepG2的增殖研究
目的 探究microRNA-122(miR-122)对肝肿瘤细胞HepG2增殖的抑制效应.方法 培养肝肿瘤细胞HepG2并随机分为miR-122组、阴性对照组(NC组)、空白对照组,miR-122组使用LipofectamineTM2000试剂转染肝癌细胞株HepG2细胞,NC组将阴性对照siRNA转染HepG2细胞,空白对照组只加胎牛血清RPMI-1640培养基.转染24 h后,采用MTS试剂盒测定细胞活力,计算细胞增殖抑制率,采用荧光定量PCR测定细胞中凋亡抑制蛋白(XIAP)、细胞周期素D1(CyclinD1)、细胞周期蛋白依赖激酶2(CDK2)、细胞周期蛋白依赖激酶4(CDK4)、血管内皮生长因子(VEGF)、VEGFR1、VEGFR2、肝细胞生长因子(HGF)的mRNA含量.结果 干预后24 h,miR-122组细胞的吸光值(0D)明显低于空白对照组、NC组,细胞增殖抑制率明显高于NC组(t=9.43、19.475、P＜0.05),miR-122组细胞中XIAP、CyclinD1、CDK2、CDK4 mRNA含量明显低于空白对照组、NC组(t=8.135、7.542、11.740、5.937,P＜0.05),VEGF、VEGFR1、VEGFR2、HGF mRNA含量明显低于空白对照组、NC组(t=7.741、13.002、6.347、6.662,P＜0.05).结论 miR-122能够抑制肝肿瘤细胞HepG2的增殖,靶向抑制细胞周期相关分子、血管新生相关分子的表达是miR-122发挥增殖抑制效应的可能机制.
关键词： 肝癌 MicroRNA-122 细胞周期 增殖 血管新生 -
一种ROC曲线数据提取方法并用于miRNA-122诊断慢性病毒性肝炎的Meta分析
目的 提供一种数据提取方法并用于mieroRNA-122对慢性病毒性肝炎的诊断性Meta分析.方法 计算机检索CBM、CNKI、VIP、EMBASE、PubMed数据库,对检索文献进行筛查,纳入符合标准的文献,并汇总文献中有关microRNA-122对丙型肝炎病毒/乙型肝炎病毒的受试者工作特征曲线诊断的结果;对于未正式报道敏感性数值和特异性数值的文献,采用数据提取软件GetData Graph Digitizer 2.24获取文献中相关敏感性和特异性数值,用于microRNA-122鉴别健康人和慢性肝炎病毒(乙型/丙型)感染患者,通过Stata 12软件等进行分析,结果以敏感性、特异性以及对受试者工作特征曲线进行汇总.结果 终纳入6篇文献,其中3篇是关于丙型肝炎病毒感染患者的诊断,另外3篇为乙型肝炎病毒感染患者的诊断;共有321名慢性病毒性肝炎感染者(包括112名丙型肝炎患者、209名乙型肝炎患者)以及191名健康对照者被纳入研究;应用我们提取数据的方法表明,通过软件提取的敏感性和特异性数据与原文数据保持一致.数据提取汇总后的敏感性、特异性分别为0.91(95％可信区间0.83～0.96)、0.87(95％可信区间0.80～0.92),受试者工作特征曲线下面积为0.94(95％可信区间0.92～0.96).结论 以GetData Graph Digitizer软件创建的提取受试者工作特征曲线中数据的方法具有很好的真实性和可重复性,以提取的数据汇总分析表明,血清microRNA-122可很好地用于鉴别健康人与慢性肝炎感染患者,并且对慢性乙型肝炎病毒感染的诊断具有更高的灵敏性.
-
小鼠miR-122重组慢病毒载体的构建和鉴定
目的 构建携带miR-122的重组慢病毒表达载体,为研究miR-122的功能和作用机制奠定基础.方法 从小鼠基因组DNA采用PCR法扩增出pre-miR-122基因,测序后克隆至pCDH-CMV-MCS-EF1-copGFP逆转录病毒载体上,测序鉴定,病毒包装后,转染NIH3T3细胞,并通过绿色荧光蛋白进行病毒滴度测定.将重组慢病毒感染肝前体细胞(HPCs),利用实时定量PCR检测miR-122的表达.结果 重组慢病毒载体pCDH-CMV-miR-122-EF1-copGFP经PCR扩增及测序鉴定正确,并得到了滴度为(1-5)×106 IU/mL的病毒液.pCDH-CMV-miR-122-EF1-copGFP感染的肝前体细胞中miR-122表达显著增强.结论 成功构建了小鼠miR-122重组慢病毒,并在肝前体细胞中高效表达出miR-122,为进行miR-122的功能和机理奠定了良好的基础.
关键词： MicroRNA-122 载体构建 慢病毒 -
MicroRNA-122过表达转基因小鼠的建立
目的:建立microRNA-122 (mir-122)过表达转基因小鼠模型,为今后研究肝脏发育,分化及肝癌预防、诊断及治疗等提供实验模型.方法:构建mir-122过表达载体,利用受精卵前核显微注射法将mir-122过表达载体导入小鼠受精卵中,获得mir-122过表达转基因小鼠.PCR法检测转基因小鼠的整合情况,实时定量PCR法检测mir-122过表达转基因小鼠肝脏及其主要器官mir-122及其确定靶基因高亲和性阳离子氨基酸转运体-1(CAT-1),切割同源物1(CUTL-1),血清反应因子(SRF)的表达情况.结果:mir-122过表达转基因小鼠,与同窝阴性鼠相比,mir-122在过表达转基因小鼠肝脏及主要器官中的表达升高,mir-122靶基因表达水平下降.结论:成功构建mir-122过表达转基因小鼠.
关键词： MicroRNA-122 过表达 转基因小鼠 -
超声组学定量评估miR-122抑制裸鼠肝细胞癌的疗效
[目的]探究超声组学评估microRNA-122(miR-122)抑制裸鼠皮下肝细胞癌(HCC)移植瘤疗效的可行性.[方法]建立裸鼠皮下HCC移植瘤模型,治疗组(n=6)和对照组(n=6)分别接受瘤内注射miR-122 mimics和miR-negative control,每隔2天注射1次,共5次.每次给药前采集肿瘤二维灰阶超声图像;末次给药24 h后,分别采集瘤块的二维灰阶超声图像和超声造影动态图,并采用实时荧光定量PCR法检测两组瘤组织miR-122含量.超声造影动态图像分析获取瘤块灌注指标:峰值强度、上升时间、达峰时间、平均渡越时间及拟合质量;同时,截取超声造影不同时间点(10、30、60、90 s)的单幅图像超声组学特征:提取图像特征、筛选组间显著差异参数、建立组学评估模型,并以超声组学定量值对疗效进行评估分析.[结果]治疗组miR-122的表达水平为对照组的(763±60)倍(P<0.05).第3次给药后治疗组与对照组的肿瘤体积均有统计学差异(P<0.05).超声造影肿瘤灌注评估中,两组间各灌注量化参数均无统计学差异(P>0.05).超声组学分析中,超声造影10 s静态图无组间显著差异参数,无法构建评估模型;而其余三个增强期均可构建评估模型,且超声组学定量值在两组间均有统计学差异(P<0.05).不同增强期的定量值间两两比较,30 s分别与60、90 s比较均有统计学差异,而60 s与90 s对比无统计学差异.[结论]基于超声造影静态图像的超声组学分析可用于评估miR-122抑制HCC的疗效,且优于常规灌注定量评估.
关键词： 肝细胞癌 超声组学 疗效评估 MicroRNA-122 -
microRNA-122在HBV相关性肝癌中的表达及意义
目的 研究microRNA-122(miR-122)在HBV相关性肝癌中的表达及其意义.方法 分别提取47例肝癌组织(其中HBsAg阳性36例,HBsAg阴性11例)及癌旁正常组织的总miRNA,应用实时荧光定量RT-PCR技术检测miR-122的表达,分析其表达情况及其与临床病理特征的关系.结果 HBsAg阳性肝癌组织中miR-122的表达比癌旁组织及HBsAg阴性肝癌组织明显下调,差异有统计学意义(P＜0.05),在肝癌组织中miR-122的表达量与患者性别、年龄、肿瘤大小无相关性(P＞0.05),但与肿瘤TNM分期及是否有脉管侵犯关系密切(P＜0.05).结论 miR-122在HBV相关性肝癌组织中的表达明显降低,提示miR-122的低表达与HBV相关性肝癌发生、发展存在密切关系,且miR-122表达水平可能成为诊断及判断肝癌预后的新方法.
关键词： 肝癌 MicroRNA-122 实时荧光定量RT-PCR HBV -
血浆中microRNA-122与肝癌手术肝损伤的相关性研究
目的:探讨血浆中microRNA-122(miR-122)表达量与肝癌手术前后肝损伤的相关性.方法:首先利用实时荧光定量RT-PCR分别检测20例健康人与30例肝癌患者术前miR-122的表达量并进行比较,然后对30例患者术前、术后第1天和术后第7天血浆中miR-122进行检测,并与患者的临床病理参数进行比较.结果:(1) miR-122在术前患者血浆中的表达量显著高于健康人群(P ＜ 0.05).(2)患者术前、术后第1天、术后第7天血浆中的miR-122与丙氨酸氨基转移酶(ALT)、胆红素呈正相关R ＞ 0.7(P ＜ 0.05).(3)术后第1天血浆miR-122表达水平与是否阻断第一肝门、切除肿瘤大小呈正相关(P ＜ 0.05),但与其他临床病理特征(年龄、性别、术中出血量)无相关性.结论:血浆miR-122可能作为反应肝切除术肝功能损伤的一种新的潜在生物学指标.
关键词： 肝肿瘤 肝损伤 肝切除术 MicroRNA-122
