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耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌耐药机制及1型整合酶基因的研究
铜绿假单胞菌(PAE)是医院感染的重要病原菌之一,探讨本地区临床分离的耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌耐药性及金属β内酰胺酶、外膜蛋白通道OprD2基因和1型整合酶基因存在状况有实用意义.用PCR法对金属β内酰胺酶IMP、VIM、SPM、GIM基因和外膜蛋白通道OprD2基因及1型整合酶基因等6种耐药基因进行检测与研究,并用K-B纸片扩散法和微量稀释法测定对庆大霉素等18种抗菌药物的敏感性.
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肺炎克雷伯菌多重耐药机制的研究
肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoni-ae,Kpn)是引起医院内感染的常见病原菌之一.用PCR法检测9种氨基糖苷类修饰酶基因、9种β-内酰胺酶编码基因及Ⅰ类整合酶基因并对整合子进行分析,采用纸片扩散法选出58株多重耐药的Kpn,测定对亚胺培南等17种抗菌药物的敏感性.
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耐药铜绿假单胞菌携带的整合子及其耐药基因盒检测分析
整合子系统是铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)产生耐药的重要因素,其包括5'保守序列(CS,包括整合酶基因int、重组位点att Ⅰ和1个启动子)和3'CS(由qacE△1和sul1组成);整合子携带的耐药基因盒包括1个单独的基因和1个下游的重组位点attC;整合子通过att Ⅰ和attC位点之间或2个attC位点之间的重组而捕获耐药基因.本研究对临床分离的13株耐药PA菌行药物敏感试验后,对整合子和基因盒的携带情况进行检测,并对序列、定位及质粒接合试验进行分析.
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细菌整合子与移动性基因盒的研究进展
整合子是由整合酶基因、基因盒和基因盒附着位点三者组成的遗传元件.在整合酶介导下,整合子通过位点特异的重组系统获取并交换外源DNA(基因盒),即将基因盒整合到整合子上或将之从整合子上剪切下来,但是整合子本身不能够移动.本文综述了国外近年来关于整合子与基因盒的结构特征及其分类的研究近况,对了解整合子及与之密切相关的移动性基因盒在细菌的多重耐药和毒力研究中,尤其是在适应选择性压力下细菌基因组进化中的作用具有重要的意义.
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治疗白内障,眼药水有望代替手术刀
《自然》杂志报道用一种叫羊毛甾醇的物质可能逆转晶体蛋白的异常聚集,仅经滴眼液和玻璃体注射羊毛甾醇,就能有效改善白内障犬的症状。在一项基因调查中,研究人员们对3位患有严重先天白内障的儿童进行了基因测序和分析,并对其中2个的家庭成员进行了测序和系谱分析,发现患儿的羊毛甾醇合酶基因在关键位点上出现了突变,且来自父母的2份等位基因都有这样的突变。而患儿的父母晶体蛋白并未发生聚集,是因为患儿的父母各自仍带有1份正常的LSS基因。LSS指导着羊毛甾醇的合成,而后者常在眼球中富集。这种兼具亲水和疏水部分的分子,可能与规律排列的晶状体蛋白之间有着微妙的联系。有研究显示,羊毛甾醇不仅能在细胞培养皿中预防主要几类异常晶体蛋白的聚集,还能一定程度上让已经聚集的晶体蛋白重新分散开。有研究人员对7只不同品种的、患有白内障的狗进行了为期6周的治疗:每日3次滴羊毛甾醇眼药水,每3天向玻璃体腔内注射一定量载有羊毛甾醇的纳米颗粒。经过治疗后的狗,晶状体浑浊的情况都有了不同程度的改善。这暗示着有朝一日,白内障也许能够被眼药水治愈,而省去手术的繁杂和风险。
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土壤杆菌重组合成透明质酸
透明质酸(hyaluronan,HA)是β1-3 D-N-乙酰氨基葡糖(GlcNAc)和β1-4 D-葡糖醛酸(GlcA)二糖重复单位组成的糖聚合物.HA在生物医学领域中具有广泛应用,如应用于眼科手术和骨关节炎治疗等.到目前为止,商品化HA仅来源于鸡冠提取或病原性链球菌发酵.本研究证实采用代谢工程技术可通过安全微生物重组合成HA.土壤杆菌(Agrobacterium sp.)ATCC 31749是一种食品聚合物凝胶多糖(curdlan)的商业化生产菌株.已成功开发出一种广谱宿主性表达载体,这种载体可表达多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida)的3 kb HA合酶基因和大肠杆菌(Escherichia coli)K5菌株的编码UDP-葡糖脱氢酶的kfiD基因.这两种异源酶的共表达使土壤杆菌合成HA成为可能.