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  • 重组LTB蛋白在水弧菌VSP60中的高效表达与纯化

    作者:王静;李琳琳;孔令洪;于军;郑瑾;韩俊宏;来宝长;司履生;王一理

    目的优化重组大肠杆菌热不稳定肠毒素B亚单位(rLTB)工程菌(VSP60)高效表达的条件. 方法以UVP凝胶照相系统扫描以及改良Lowry′s法检测rLTB表达量并分析各种因素对其影响.利用Sephacryl S-100凝胶层析纯化rLTB蛋白. 结果工程菌30℃振荡培养至吸光度(A600)值达0.2~0.3时加IPTG(终浓度为0.5mmol/L),诱导培养18~22h为rLTB蛋白表达的佳条件.Sephacryl S-100凝胶柱一步层析后,rLTB蛋白纯度可达98.1%. 结论本研究所用的培养和纯化工艺简单易行,可获得高产量、高纯度的rLTB蛋白.

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