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原卟啉Ⅸ在体外和野生型P53蛋白的相互作用及其诱导人结肠癌细胞以P53相关和非相关的方式死亡
背景与目的光动力学疗法(PDT)是对化疗和放疗已产生耐药的肿瘤的一种替代疗法.该方法主要通过激光照射光敏剂产生活性氧,继而杀死肿瘤细胞.有研究表明抑癌蛋白P53能使人类某些肿瘤细胞对PDT治疗更加敏感.但是,目前仍然没有直接的证据来证明这一观点.本研究旨在探讨肿瘤细胞中原卟啉Ⅸ(protoporphyrin Ⅸ,PpⅨ)和野生型P53蛋白的相互作用,及PpⅨ和PpⅨ-PDT诱导人结肠癌细胞发生死亡与P53蛋白的相关性.
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热消融治疗肝细胞性肝癌的抗肿瘤免疫效应问题
1971年,Goldenberg等[1]对人结肠癌小鼠皮下种植模型进行局部热消融,发现肿瘤被破坏后远处的转移灶缩小甚至消失,热消融这种除了直接杀瘤效果之外伴发的所谓"异位效应"启发人们关注到热消融治疗和宿主免疫反应之间的关系.近年来随着影像引导热消融治疗肝细胞性肝癌(HCC)的广泛开展,越来越多的研究在探讨热消融能否诱导抗肿瘤免疫反应.这一课题研究极具科学意义和临床价值,因为众所周知,迄今为止对HCC不论采用什么治疗方法都无法避免不断复发的倾向,对这一治疗上大的难题,有希望突破困境的很可能就是免疫治疗.
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血管抑素基因联合氟尿嘧啶腹腔化疗预防大肠癌术后肝转移的实验
目的:观察血管抑素基因联合氟尿嘧啶腹腔化疗对预防大肠癌术后肝转移的作用.方法:RT-PCR克隆血管抑素基因,建立重组腺病毒载体.建立人结肠癌LoVo肝转移种植的模型,给予血管抑素基因联合氟尿嘧啶腹腔化疗.观察其对大肠癌细胞肝转移的影响.结果:血管抑素基因联合氟尿嘧啶腹腔化疗治疗组肝转移发生率明显低于其他各组(P<0.05),肝转移瘤数少于其他各组(P<0.05),荷瘤生存时间长,治疗组肿瘤组织中血管抑素基因表达为阳性,MVD明显低于其他各组.结论:血管抑素的基因治疗与传统的腹腔化疗联合应用,对预防裸鼠人LoVo结肠癌细胞肝转移有一定的作用.
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黄连素对HT-29人结肠癌细胞系Ca2+的抑制作用
目的:探讨黄连素对人结肠癌细胞系HT-29的作用及与Ca2+有关的机制,为黄连素作为一种新的结肠癌化学治疗药物进行理论上的准备和提供相关实验结果.方法:0.1 μmol/L,0.3μmol/L,3.0 μmol/L,30.0 μmol/L的黄连素加入到HT-29结肠癌细胞系培养液中.分别在第1 d,第2 d,第3 d测量各有关值.以bapta-AM(33 μmol/L)为细胞内Ca2+螯合剂,verapamil(50 mmol/L)为细胞膜Ca2+通道拮抗剂,分别抑制细胞内Ca2+和细胞膜Ca2+通道,对比观察黄连素对细胞内Ca2+的影响及结肠癌细胞在不同Ca2+浓度条件下各有关值.细胞记数检测细胞的生长和增生,用免疫荧光分光光度法检测细胞内Ca2+浓度.结果:黄连素在浓度大于0.3 μmol/L时则有明显的量效关系抑制结肠癌细胞的生长.黄连素在浓度大于0.3 μmol/L时对细胞内Ca2+的释放有抑制作用.结论:黄连素能够抑制Ca2+的释放可能为黄连素抑制HT-29细胞生长和增生的一个机制.
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结肠癌LS174细胞培养上清对树突状细胞诱导CTL杀伤效应的影响
目的:观察结肠癌细胞对人单个核细胞源树突状细胞(DC)诱导的CTL杀伤效应的影响,探讨其在人体的免疫逃避机制.方法:人外周血分离单个核细胞以GM-CSF和IL-4培养DC,用结肠癌LS174细胞的提取物诱导DC,并激活T淋巴细胞抗肿瘤效应,在此不同过程中,体系中加入人结肠癌细胞系LS174的培养上清液.以正常培养体系为对照,通过计算细胞毒杀伤率检测不同条件下DC激活同种异体T淋巴细胞杀伤肿瘤细胞的能力.结果:LS174细胞培养上清液作为条件培养的DC,在DC培养的早期阶段对DC激活过程有明显的影响(在DC培养的第1 d加入肿瘤培养上清组,第3 d加入肿瘤培养上清组vs正常培养的DC组,DC培养第5 d加入肿瘤培养上清组,DC激活T淋巴细胞过程加入肿瘤培养上清组,P<0.05).结论:肿瘤细胞分泌的某些物质可在DC培养的早期阶段影响肿瘤的免疫,这可能是肿瘤细胞逃避机体免疫监视的机制之一.
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MDM2、P53与P14ARF在结肠肿瘤中的表达及意义
目的:探讨MDM2、P53和P14ARF在人结肠癌组织中的表达及其意义.方法:用免疫组织化学方法检测36例癌旁正常结肠组织,8例结肠腺瘤及42例结肠癌中三者的表达及其相互关系.结果:MDM2、P53、P14ARF在癌旁正常结肠组织,结肠腺瘤,结肠癌中的阳性表达率分别为0,,21.4%;0,5%,7%和100%,2.1%,0.9%.P53和MDM2在结肠癌中的表达率均明显高于癌旁正常结肠组织(P<0.05),14ARF在结肠腺瘤和结肠癌中的表达率均明显低于癌旁正常结肠组织(P<O.05).P53、MDM2和P14ARF在不同分化程度结肠癌中的表达率分别为44.4%,8.0%,7.5%;11.1%,4.0%,5.0%和88.9%、92%、37.5%.P53和MDM2在不同分化程度结肠癌中的表达无明显差异(P>0.05),而P14ARF在低分化结肠癌中的表达明显低于高分化和中等分化的结肠癌(P<0.05).三者的相关分析提示P53和MDM2之间存在正相关(r=0.8805),53和P14 ARF之间为负相关(r=-0.8l69),DM2和P14ARF之间亦存在负相关,但相关不显著(r=-0.5475).结论:P53、MDM2和P14ARF在人结肠癌中的表达异常可能与结肠癌的发生发展有关,联合检测三者的表达可作为早期诊断结肠癌的重要指标.
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TNP-470对结肠癌裸鼠腹水瘤生长的抑制作用
目的:研究血管生成抑制剂TNP-470对裸鼠荷人结肠癌腹水瘤生长的抑制作用.方法:采用MTT法检测TNP-470对结肠癌LOVO细胞的生长抑制作用.将LOVO细胞注入Balb/c裸鼠腹腔,建立结肠癌腹水瘤模型.30只裸鼠随机分成TNP-470组(30mg/kg,sc,qod)和对照组(给相同体积生理盐水).结果:TNP-470可抑制LOVO细胞的体外生长,IC50为2.14×102μg@L-1.两组裸鼠体质量分别为24.5±3.2g,29.5±2.1g;腹围分别为7.0±1.1cm,10.3±1.5cm;腹腔肿瘤结节数分别为40.3±12.3个,92.1±20.6个;腹腔大结节直径分别为3.3±0.7mm,7.3±2.3mm.统计分析表明:在鼠重、腹围、腹腔转移结节数、腹腔大结节直径等方面,TNP-470组与对照组比较均有显著性差异(P=0.005,p=0.001,P<0.001,P=0.004).在累积生存率方面:治疗组和对照组的中位生存期分别为92d和40 d,两组裸鼠生存时间也有显著差异(P<0.001).结论:TNP-470能有效地抑制结肠癌腹水形成和腹腔播散结节生长,提高荷瘤裸鼠的生存率.
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老年人结肠癌并急性结肠梗阻58例诊治体会
一、资料和方法1.对象:1990年1月至2000年12月我院共收治58例老年癌性结肠梗阻患者,男性24例,女性34例,年龄60~76岁,平均63.7岁.住院10~31 d,平均19 d.58例中,腹痛58例,呕吐49例,呕吐物为肠内容物47例、血性2例,肛门停止排便排气50例,体重减轻29例,既往有黑便或血便史21例,贫血15例(血红蛋白68~103 g/L).并存慢性支气管炎及心、肺、肾功能不全12例,糖尿病6例(血糖8.3~17.1 mmol/L).体检:腹膜刺激征16例,压痛16例,反跳痛13例,腹部包块7例,其中右侧结肠包块6例,左侧结肠包块1例.腹部穿刺16例,抽出淡黄色液体10例,粪性液2例.2例出现膈下游离气体.白细胞升高36例,白细胞(10.0~21.5)×109/L,粒细胞0.61~0.93,淋巴细胞0.21~0.43.
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CEA启动子特异性启动双自杀基因CD与TK在CEA+恶性肿瘤中表达
目的 探讨CEA启动子(CEA promoter, Cp)在肿瘤细胞特异性启动双自杀基因胞嘧啶脱氨酶(cytosine deaminase,CD)与胸苷激酶(thymidine kinase, TK)的作用.方法 培养Lovo与Hela细胞,传代冻存.10 μl带有Cp.CD.TK重组腺病毒(recombinantadenovirus with Cp.CD.TK, RA-Cp.CD.TK)病毒液转染Lovo与Hela,荧光显微镜观察,收集细胞提取总RNA, PCR扩增Cp、CD与TK,电泳鉴定.病毒转染Lovo与Hela传代接种96孔培养板,每株细胞分两组,每组24孔:第一组给予5-氟胞嘧啶(5-fluorocytosine,5-Fc)10 mg/L培养液,第二组给予更昔洛韦(ganciclovir,GCV) 5 mg/L培养液,光镜观察细胞形态,台盼蓝染色检测细胞活力.结果 转染病毒的Lovo细胞及Hela细胞均可见绿色荧光,PCR均可扩增出Cp、CD和TK.5-Fc和GCV对Lovo细胞具有很强的杀伤作用,对Hela细胞则微弱,5-Fc实验组Lovo细胞活力平均为8.54%±1.34%,Hela细胞平均为95.05%±2.18%( P<0.01).GCV实验组Lovo细胞活力平均为8.38%±1.22%,Hela细胞平均为95.39%±1.64%(P<0.01).结论 RA-Cp.C.T靶向性杀伤CEA+的Lovo结肠癌细胞,而对CEA-的Hela子宫颈癌细胞生长无影响.
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老年人结肠癌误诊为急性阑尾炎24例
老年人结肠癌有时因漏、误诊,或仅单纯行阑尾切除术而贻误结肠癌的手术时机.为减少漏、误诊,将我院1990~2000年收治的老年人结肠癌误诊为急性阑尾炎24例的原因分析如下.
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昆布多糖硫酸酯LAMS-2诱导人结肠癌LOVO细胞凋亡的线粒体途径研究
目的 考察昆布多糖硫酸酯LAMS-2对人结肠癌细胞LOVO凋亡的影响及作用途径研究.方法 采用四甲基偶氮唑蓝 (MTT) 法检测LOVO细胞的增殖,Hoechst 33258荧光染色观察细胞形态,流式细胞仪检测细胞内活性氧水平、线粒体通透性转换孔活性和线粒体膜电位,激光共聚焦显微镜观察细胞内钙离子水平,Western blot法检测凋亡蛋白Cyt-C、caspase-9和caspase-3的表达,比色法检测caspase-9和caspase-3的活性.结果 昆布多糖硫酸酯LAMS-2作用于LOVO细胞后,能显著抑制细胞的增殖,诱导细胞凋亡,细胞出现明显的凋亡特征形态,引起细胞内活性氧增多,钙离子含量增加,细胞线粒体通透性转变孔开放,线粒体膜电位降低,胞质内Cyt-C蛋白表达量增加,caspase-9和caspase-3的蛋白表达和活性都显著升高,较阴性对照组和昆布多糖组都显著增加.结论 昆布多糖硫酸酯LAMS-2可显著抑制人结肠癌LOVO细胞的增殖,并可通过线粒体途径诱导LOVO细胞发生凋亡.
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血清CA19-9水平升高与良性疾病
糖类抗原CA19-9是能为人结肠癌细胞系SW16作为免疫原制备的单抗19-9所识别的抗原,是一种类粘蛋白,其结构为唾液酸化的Ι型乳糖系岩藻五糖,即唾液酸化的Lewis a血型抗原,在由内胚层细胞分化而来的多种上皮类恶性肿瘤中可见增高.
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老年人结肠癌11例临床分析
结肠癌发病率较高,起病隐匿,无典型临床表现.尤其是老年人,因生理因素,多有胃肠功能紊乱,结肠癌早期表现很容易被忽视,至临床确诊时多为癌症的中晚期,延误了疾病治疗时机,严重影响患者的生存质量.本研究就接诊的11例老年结肠癌患者的病例特点进行分析.
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老年人结肠癌11临床分析
结肠癌是发病率较高的一种疾病,起病隐匿,无结肠癌典型临床表现.尤其是老年人,因生理因素,多有胃肠功能紊乱,结肠癌早期表现很容易被忽视,及至确市临床诊断时多为癌症的中晚期,延误了疾病治疗,严重影响患者的生存质量及生存时间.本文就近期接诊的11例老年结肠癌患者的病例特点进行分析.
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结肠癌误诊误治防范与中西医治疗原则
综合国内近10年的6组文献,结肠癌的平均误诊率为41.5%,其中青年人结肠癌的误诊率达72.8%.值得指出的是,结肠癌的延误诊断是影响预后的重要原因.临床上统计各期病人手术切除后的5年生存率I期为98.1%,Ⅱ期68.4%,Ⅲ期39.7%.如已有淋巴结广泛转移,术后5年生存率仅为10.2%.由此可见减少延误诊断的重要性.
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应进一步加强我国结肠癌的基础研究
结肠癌是临床常见的恶性肿瘤之一.2003年美国结肠癌新发病例数和死亡病例数均居美国癌症发病数和死亡数的第3位,居40~79岁男性死亡率的第2位,结肠癌的5年生存率为62%[1].结肠癌是加拿大第2位癌症死亡原因,结肠癌治疗的费用高达520亿加元[2].在我国,结肠癌是第4位常见的癌症和致死因素,且其发生率呈上升趋势.国内结直肠癌较为多见,青年人结肠癌较多见.另外,由于结肠癌早期没有特异性症状,临床诊断时已多属进展期,造成的损失可能更严重.为进一步提高结肠癌的诊治水平,对结肠癌的基础研究不容忽视.
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结肠癌致老年人肠梗阻23例外科处理
我院2000-2007年治疗老年人结肠癌致肠梗阻23例,现报道如下.1 资料与方法1.1 一般资料:本组共23例,男性14例,女性9例,年龄60~84岁,平均66.2岁.均因急性肠梗阻收住院,有典型的肠梗阻症状,肿瘤位置降结肠9例,横结肠4例,升结肠4例,结肠脾曲3例,直肠上段2例,乙状结肠1例.从发病到手术间隔时间43~145 h,平均91 h.入院时有20例患者有伴发疾病,包括高血压病11例,糖尿病9例,冠状动脉粥样硬化性心脏病7例,脑血管病5例,慢性支气管炎3例.
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雷替曲塞二线治疗晚期结直肠癌临床护理体会
雷替曲塞(raltitrexed )是新一代具有高特异选择性的胸苷酸合成酶(TS)抑制药,可导致DNA断裂和细胞死亡;进入肿瘤细胞后迅速代谢为多谷氨酸类化合物,长时间发挥抑制胸苷酸合成酶的活性作用。与氟尿嘧啶相比,不良反应更轻,雷替曲塞具有更强的抗人结肠癌肿瘤细胞的活性。我科自2009年5月至2012年3月,共有30例结直肠癌患者接受单药雷替曲塞方案二线化疗,通过精心护理收到了较好效果,现将护理体会报告如下。
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姜黄素致人结肠癌HT-29细胞DNA损伤作用
目的 探讨姜黄素致人结肠癌HT-29细胞线粒体DNA(mtDNA)和核DNA(nDNA)损伤作用.方法 人结肠癌HT-29细胞暴露于不同质量浓度的姜黄素(0.0,2.5,5.0,10.0 20.0 μg/ml)2 h后,采用长链PCR方法分别扩增mtDNA和nDNA片段,琼脂糖凝胶电泳检测扩增产物量.结果 mtDNA扩增产物在5.0 μg/ml姜黄素作用下明显下降,在5.0,10.0 20.0 μg/ml作用下mtDNA损伤频率分别为(1.23±0.10),(1.97±0.24)和(5.78±0.62)/10 kb,与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.01);nDNA扩增产物在20.0 μg/ml姜黄素作用下才明显下降,在5.0,10.0,20.0 μg/ml作用下nDNA损伤频率分别为(0.27±0.04),(0.61±0.11)和(1.61±0.12)/10 kb,与对照组比较,除5.0 μg/ml作用组外差异均有统计学意义(P<0.01).结论 姜黄素对HT-29细胞的mtDNA和nDNA损伤均呈剂量依赖关系,并且对mtDNA的损伤作用明显大于nDNA.
关键词: 姜黄素 线粒体DNA(mtDNA) DNA损伤 人结肠癌 -
VEGF-A和C在人结肠癌淋巴管生成和淋巴道转移中的作用
目的 分析血管内皮生长因子(VEGF)-A和VEGF-C在人结肠癌组织的表达及与结肠癌淋巴管生成和淋巴道转移的关系.方法 取人结肠癌组织91例,应用免疫组化方法检测VEGF-A和VEGF-C在结肠癌组织中的表达.应用D2-40标记结肠癌组织的淋巴管,观察结肠癌组织的淋巴管生成情况.结果 结肠癌组织中VEGF-A和VEGF-C的表达水平明显高于正常组织,VEGF-A和VEGF-C表达阳性的结肠癌组织的淋巴管密度(LVD)明显高于阴性组织,VEGF-A和VEGF-C的表达及LVD均与淋巴结转移及Duke's分期相关.结论 结肠癌组织VEGF-A和VEGF-C过表达与结肠癌的淋巴管生成和淋巴道转移相关.