缬沙坦对豚鼠心室肌细胞动作电位的作用

目的:观察缬沙坦对豚鼠心室肌细胞动作电位的直接作用,以探讨其可能的抗心律失常作用.方法:采用Langendorff主动脉逆行灌流酶解分离法分离单个心室肌细胞.采用全细胞膜片钳记录,电流钳模式记录单个心室肌细胞的动作电位.实验分3组:对照组(n=5),普通细胞外液灌流,不含缬沙坦;缬沙坦5 μM组(n=5);缬沙坦100 μM组(n=5).结果:缬沙坦5 μM对豚鼠心室肌细胞静息膜电位、动作电位幅度、动作电位时程均无明显影响.缬沙坦100μM可延长心室肌细胞动作电位时程,尤其是APD50从(334.2±14.4)ms延长至(375.2±12.0)ms(P＜0.01)及APD90从(395.4±13.3)ms延长至(451.4±9.5)ms(P＜0.01),对细胞静息膜电位、动作电位幅度无显著影响.结论:高浓度缬沙坦延长心室肌细胞动作电位时程APD50及APD90,而不影响动作电位的静息膜电位及动作电位幅度.适度延长动作电位时程,从而延长心室有效不应期,有助于折返引起的快速室性心律失常的防治,类似Ⅲ类抗心律失常药物的作用.提示缬沙坦可能通过此机制起抗心律失常的作用.

环维黄扬星D对糖尿病大鼠心肌细胞内游离钙的影响

目的：研究环维黄扬星D（CVB-D）对糖尿病大鼠心室肌细胞内游离钙的影响。
　　方法：以四氧嘧啶复制SD大鼠，体重（220±20）g糖尿病模型，随机分为8组，每组6只大鼠。在糖尿病大鼠的第6周，用酶解分离方法分离糖尿病大鼠的单个心室肌细胞，采用细胞内双波长荧光钙检测系统测定心室肌细胞内游离钙的浓度，记录给药前后糖尿病大鼠心室肌细胞内游离钙及钙瞬变，并与对照组比较。

东亚钳蝎毒素多肽对家兔单个心室肌细胞钠电流作用的实验研究

甘松提取物对家兔心室肌细胞钠、钙通道的影响

目的研究甘松提取物对家兔单个心室肌细胞钠通道和L-型钙通道的电生理作用.方法采用全细胞膜片钳技术(Whole cell patch clamp),观察不同浓度的甘松提取物对钠通道电流和L-型钙通道电流的影响.结果5g/L和10g/L的甘松提取物使兔心室肌细胞ⅠNa峰值(Ⅰ Namax)从(66.48±6.44)pA/pF分别降至(50.95±4.78)pA/pF和(39.64±3.87)pA/F(n=8,P＜0.05和P＜0.01);使LCa-L峰值(ⅠCa-Lmax)由(6.485±0.78)pA/pF分别减至(3.644±0.39)pA/pF和(2.455±0.21)pA/pF(n=8,P＜0.01).甘松提取物使ⅠNa和LCa-L的电流-电压曲线上移,但均不改变其激活电位、电位峰值和反转电位.甘松提取物还减慢钠通道灭活后的恢复过程以及抑制钙通道的激活过程.结论甘松提取物对ⅠNa和LCa-L具有浓度依赖性阻滞作用.这可能是其抗心律失常的重要机制.

芬太尼对豚鼠心室肌细胞KATP离子流的影响

为了确定μ受体激动药芬太尼对KATP通道的作用,本文采用膜片钳全细胞记录方法研究了芬太尼对豚鼠单个心室肌细胞KATP通道离子流(IKATP)的影响.

苄基四氢巴马汀对豚鼠心肌动作电位的影响

苄基四氢巴马汀(Benzyltetrahydropalmatine,BTHP)是从罂粟科植物延胡索(Corydalis ambigua(Pall)cham.et Schlecht)中提取的异喹啉类生物碱的衍生物.整体实验表明其具有抗多种心律失常的作用,降低自律性、减慢频率[1,2].为明确BTHP的抗心律失常机制,本实验利用标准微电极技术[3]观察了BTHP对豚鼠乳头状肌动作电位(AP)的影响,并进一步采用全细胞膜片钳技术[4]研究了BTHP对豚鼠单个心室肌细胞AP的作用.

东亚钳蝎毒素多肽对家兔单个心室肌细胞钠电流作用的实验研究

目的为了研究基因表达得到的与钠通道位点3或4结合而分别起激活或抑制作用的东亚钳蝎毒素(BmK)α和β多肽对钠通道作用的生物学特性.

甘松提取物对单个兔心室肌细胞钠、钙通道的影响

目的研究甘松提取物对兔单个心室肌细胞钠离子电流(INa)和L-型钙电流(LCa-L)的影响.

洛士辛对豚鼠心室肌细胞L型钙通道的作用

采用膜片钳技术,研究Lot对单个豚鼠心室细胞L型钙通道电流(ICa-L)的影响.Lot1～200μmol/L浓度依赖性地增加ICa-L幅值,EC 50为38μmol/L,Lot30μmol/L使大峰值电流增加60%.其促钙作用无明显使用依赖性,略促进钙通道电流激活,显著地减少钙电流的稳态失活.表明Lot 增加L型钙电流作用主要与减少钙电流的稳态失活有关.

豚鼠心肌细胞分离方法及电生理特性的观察

目的:建立膜片钳实验室单个心肌细胞的分离方法和膜片钳技术平台.方法:采用酶解法分离豚鼠心室肌细胞;在膜片钳全细胞模式下记录不同基础刺激周长时的动作电位以及L-型钙电流、延迟性整流钾电流.结果:酶解法分离豚鼠心室肌可以得到90%的存活细胞;豚鼠的单个心室肌细胞静息电位为(-74.0±2.2)mV,基础刺激周长1 000 ms时复极90%的动作电位时程(APD90)为(313.2±20.72) ms;APD90和复极50%的动作电位时程(APD50)均随着基础刺激周长的延长而延长.L-型钙电流峰值电流密度为(-7.36±1.10)pA/pF,0.1 mmol/L verapamil灌流后为(-1.22±0.49 )pA/pF,100 μmol/L CdCl2灌流后内向电流消失;延迟性整流钾电流密度为(4.88±0.96)pA/pF,2 μmol/L Dofetilide灌流后降低为(3.48±0.37)pA/pF.结论:酶解法分离的豚鼠心室肌细胞可以满足膜片钳实验的要求,此膜片钳技术可作为更深入电生理研究的平台.