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毛细管电泳定量分析在大鼠腹腔巨噬细胞中5-脂氧合酶信使核糖核酸表达中的应用
目的探讨毛细管电泳定量分析在体外培养的大鼠腹腔巨噬细胞中5-脂氧合酶(5-LO)信使核糖核酸(mRNA)表达.方法分离大鼠腹腔巨噬细胞进行培养一定时间,用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)观察5-LO mRNA表达的变化,并用毛细管电泳进行定量.结果 100 bp DNA marker和RT-PCR产物在筛分介质为1.8% 羟丙基甲基纤维素-100溶液的毛细管电泳中能获很好的分离.毛细管电泳定量分析表明,体外培养72 h对5-LO mRNA表达量没有明显的影响,进一步培养到第120 h,5-LO mRNA的表达量下降了约80%.结论 RT-PCR产物可以用毛细管电泳直接分离定量.5-LO mRNA可以在体外培养的大鼠腹腔巨噬细胞中稳定表达72 h.
关键词： 花生四烯酸盐5-脂氧合酶 巨噬细胞 电泳 毛细管 -
花生四烯酸5-脂氧合酶激活蛋白基因多态性与急性冠状动脉综合征的易感性
目的 探讨花生四烯酸5-脂氧合酶激活蛋白(ALOX5AP)基因SG13S114T/A多态性与急性冠状动脉综合征(ACS)的易感性.方法 选择住院的胸痛患者714例,将确诊为ACS的患者377例作为ACS组,非ACS患者337例作为对照组,采用聚合酶链反应限制性片段长度多态性方法检测ALOX5AP基因SG13S114T/A多态性,并进行logistic回归分析.结果 ACS组患者AA、AT和TT基因型频率分别为13.79%、50.93%和35.28%,对照组患者分别为12.76%、38.58%和48.66%,2组AT和TT基因型频率差异有统计学意义(P=0.041,0.020);ACS组男性AT基因型频率高于对照组(P=0.040),女性TT基因型频率低于对照组(P=0.013).SG13S114T/A位点AT和TT基因型以及T等位基因是所有ACS(P=0.004、0.001和0.013)和男性ACS(P=0.014、0.005和0.020)发病的危险因素.结论 ALOXSAP基因SG13S114T/A多态性AT和TT基因型以及T等位基因可能与老年人,特别是老年男性ACS的易感性相关.
关键词： 急性冠状动脉综合征 花生四烯酸盐5-脂氧合酶 聚合酶链反应 基因型 基因频率 -
5-脂氧合酶激活蛋白基因多态性增加阿司匹林抵抗易感性
目的 探讨5-脂氧合酶激活蛋白(ALOX5AP)基因单核苷酸多态性与中国汉族人群阿司匹林抵抗(AR)的相关性.方法 纳入450例持续服用阿司匹林(100 mg,≥7 d)的缺血性心脑血管病中的高危患者,血栓弹力图检测花生四烯酸途径的血小板聚集率,依据诊断标准分为AR组110例,阿司匹林敏感(AS)组340例.聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术分析SG13S32、SG13S89和SG13S114单核苷酸多态性.应用Haploview软件构建单倍型,并进行分析.结果 AR组与AS组SG13S114 T/A突变A等位基因频率分布(40.5％ vs 31.3％,P=0.01)和AA/TA基因型及TT基因型比较,差异有统计学意义(35.5％ vs 46.2％,P=0.03).而2组SG13S89、SG13S32基因型和等位基因分布频率比较,差异无统计学意义(P＞0.05).logistic回归分析显示,携带SG13S114AA/TA基因型的人群发生AR的风险是携带TT基因型的3.241倍(95％CI:1.552～6.767,P=0.002).单倍型分析显示,TG是1种危险单倍型,携带TG单倍型的人群AR发生风险是不携带TG单倍型人群的1.490倍(95％CI:1.088～2.040,P=0.014),AG是1种保护单倍型,可以减少AR发生的风险(OR=0.691,95％CI:0.502～0.952,P=0.029).结论 ALOX5AP rs10507391与汉族人群AR相关;危险单倍型TG可增加AR发生风险.
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黄芩苷对球囊拉伤后颈动脉粥样硬化的影响及其作用机制
目的 探讨黄芩苷对新西兰大白兔颈动脉粥样硬化(AS)的影响及潜在的分子机制.方法 健康雄性新西兰大白兔30只,随机分为5组:空白对照组(NC组)、安慰剂对照组(PC组)、阿托伐他汀治疗组(AT组)、黄芩苷预防组(BP组)和黄芩苷治疗组(BT组),每组6只.后4组均在高脂饮食后,进行右侧颈动脉球囊拉伤,构建AS模型.在第2周末和第10周末测定各组血脂水平.第10周末处死大白兔,采用实时荧光定量PCR及Western blot检测各组5-脂氧合酶(5-LO)、5-脂氧合酶活化蛋白(FLAP)和白三烯B4受体(BLTR)基因及蛋白水平表达变化,HE染色测量颈动脉内膜变化情况.结果 与NC组比较,PC组TC、TG、LDL-C、5-LO、FLAP和BLTR mRNA及蛋白表达明显增高(P＜0.05).AT组、BP组和BT组较PC组TC、TG、LDL-C水平、内膜与中膜厚度比值(1.76±0.97,1.04±0.11,1.83±0.17 vs2.54±0.18)及5-LO、FLAP和BLTR mRNA及蛋白水平明显降低(P＜0.05).结论 黄芩苷可以通过调脂、抑制5-LO炎症途径,发挥抗AS的作用.
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5-脂氧合酶激活蛋白在介导细胞因子诱导血管内皮细胞黏附分子表达中的作用
目的 研究5-脂氧合酶激活蛋白(FLAP)在细胞因子诱导血管内皮细胞表达黏附分子中的介导作用,以及MK886对血管内皮细胞表达黏附分子的抑制作用.方法 分离并原代培养人脐静脉血管内皮细胞,用FLAP微小强有力RNA(small interfering RNA,siRNA)抑制FLAP的表达,或用MK886抑制FLAP的活性,采用肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素1β(IL-1β)刺激血管内皮细胞,通过Western杂交和酶联免疫吸附检测血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)和E选择素的表达.结果 人脐静脉血管内皮细胞能表达低水平的黏附分子,在细胞因子的刺激下黏附分子的表达水平提高.FLAP表达抑制后,细胞因子诱导黏附分子表达的作用降低.细胞因子刺激12 h后,同未处理细胞表达的黏附分子比较,不同黏附分子表达分别增加了6～51倍;用不同浓度MK886处理后,细胞表达的黏附分子水平明显下降,并呈MK886剂量依赖性.结论 FLAP介导了细胞因子诱导血管内皮细胞表达黏附分子的作用,MK886具有抑制血管内皮细胞表达黏附分子的作用.
关键词： 花生四烯酸盐5-脂氧合酶 内皮细胞 细胞黏附分子 脂氧合酶抑制剂 -
脂氧素A4、白三烯C4和5-脂氧合酶在重度子痫前期孕妇外周血中的表达及意义
目的 探讨脂氧素A4、白三烯C4和5-脂氧合酶在不同类型重度子痫前期孕妇外周血中的表达及其意义. 方法 收集2010年12月至2011年6月在本院产前检查并分娩的单胎妊娠孕妇共45例,其中正常妊娠组20例,早发型重度子痫前期组10例,晚发型重度子痫前期组15例.酶联免疫吸附试验测定血浆中脂氧素A4和白三烯C4的水平,实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应技术检测外周血白细胞中5-脂氧合酶mRNA的表达水平,采用方差分析及LSD-t检验比较组间脂氧素A4、白三烯C4和5-脂氧合酶mRNA的差异,脂氧素A4、白三烯C4和5-脂氧合酶mRNA表达水平间的相关性采用直线相关分析. 结果 早发型和晚发型重度子痫前期组孕妇血浆脂氧素A4水平分别为(355.3±116.0)pg/ml和(389.7±117.5)pg/ml,均较正常妊娠组[(555.0±139.8) pg/ml]明显降低(t=-4.03和-3.77,P均＜0.05).白三烯C4水平在早发型、晚发型重度子痫前期组和正常妊娠组分别为(591.3±185.5) pg/ml、(510.3±197.1) pg/ml和(496.9±158.8) pg/ml,3组间差异无统计学意义(F=0.889,P＞0.05).白细胞中5-脂氧合酶mRNA表达水平在早发型、晚发型重度子痫前期组和正常妊娠组分别为4.8±2.0、4.4±1.2和4.2±1.9,3组间差异无统计学意义(F=0.311,P＞0.05).各组脂氧素A4、白三烯C4水平及5-脂氧合酶mRNA表达水平间均无相关性(P均＞0.05).结论 脂氧素A4早且明显降低可能参与早发型重度子痫前期的发生.
关键词： 先兆子痫 脂氧素类 白三烯C4 花生四烯酸盐5-脂氧合酶 -
胰腺癌组织中5-LOX的表达及临床意义
目的:探讨胰腺癌组织中5-脂质加氧酶(5-lipoxygenase,5-LOX)的表达及临床意义.方法:应用免疫组化技术检测了46例胰腺癌组织、9例胰腺良性肿瘤、10例慢性胰腺炎、8例正常胰腺组织中5-LOX的表达情况.结果:5-LOX在胰腺癌、胰腺良性肿瘤、慢性胰腺炎和正常胰腺组织中的阳性率分别是73.9%、2/9、3/10和0,其在胰腺癌中的表达显著高于其他组织.5-LOX与肿瘤的发生部位、分化程度、组织学类型之间差异无统计学意义;与TNM分期有关,Ⅲ～Ⅳ期表达明显高于Ⅰ～Ⅱ期,χ2=4.57,P<0.05.结论:5-LOX与胰腺癌的发展、转移有关系,5-LOX抑制剂在胰腺癌的化学预防和治疗方面有广泛的前景.
关键词： 胰腺肿瘤/遗传学 花生四烯酸盐5-脂氧合酶 免疫组织化学 -
花生四烯酸代谢通路基因多态性与脑梗死及易损斑块的交互作用研究
目的：探讨花生四烯酸（ AA）代谢酶基因单核苷酸多态性（ SNPs）之间是否存在交互作用从而增加脑梗死的易患性。方法对2010年9月至2012年12月首次发病入住温州医科大学附属第三医院神经内科、符合纳入标准的294例动脉粥样硬化性脑梗死患者（易损斑块组69例，稳定斑块组225例）和282名健康体检者，分别检测脂氧合酶与细胞色素 P450酶两条代谢通路，包括ALOX5AP 4个SNPs、CYP3A5、CYP2C9*2、CYP2C9*3和EPHX2共8个基因位点，采用SPSS16.0统计软件和广义多因子降维法（ GMDR） Beta V0.7软件包进行分析。结果 EPHX2 G860A基因GG型可能对脑梗死起保护作用（OR＝0.520，95％CI 0.288～0.940，P＝0.030）。 CYP3A5基因型在易损斑块（ AA型5例，AG型36例，GG型28例）和稳定斑块组（ AA型26例，AG型77例，GG型122例）之间分布差异有统计学意义（χ2＝7.284，P＝0.026）。 Logistic回归分析显示，CYP3A5基因GG基因型可使脑梗死患者合并颈动脉易损斑块的风险降低59.5％（ OR＝0.405，95％CI 0.178～0.920， P ＝0.031）。 GMDR分析显示，SG13S114和A6986G之间存在显著的基因-基因交互作用（交叉检验一致性为10／10，样本检验准确度为56.32％，符号检验值P＝0.011）；经调整年龄、高血压和糖尿病后Logistic回归分析结果表明，ALOX5AP SG13S114和CYP3A5 G6986A 2个基因位点交互作用可增高脑梗死发病风险（OR＝1.804，95％CI 1.180～2.759，P＝0.006）。结论 EPHX2 G860A基因可能与脑梗死的发生有关；CYP3A5 SNPs可能与脑卒中患者颈动脉斑块的稳定性相关。 GMDR联合传统的Logistic回归分析交互效应，可推测SG13S114和A6986G 2个基因位点相互作用增高脑梗死风险1.804倍。
关键词： 细胞色素P450酶系统 花生四烯酸盐5-脂氧合酶 多态性 单核苷酸 脑梗死 基因 -
齐留通对大鼠心肌缺血再灌注炎症损伤的抑制作用观察
目的 探讨5-脂氧合酶(5-LO)选择性抑制剂齐留通(zileuton)对缺血再灌注心肌的保护作用及其可能机制.方法 健康成年雌性SD大鼠30只,随机分为假手术组(S组,n=10)、缺血再灌注组(I/R组,n=10)、齐留通组(Z组,n=10),采用结扎前降支造成缺血45min、松开结扎线灌注120min的方法建立缺血再灌注模型.Z组于手术前15min给予3mg/kg齐留通.再灌注结束后处死动物,HE染色观察心肌的病理损伤情况,TUNEL法检测心肌缅胞凋亡率,ELISA法检测血浆中白三烯B4(LTB4)、IL-1p、TNF-α的含量,Western blotting和免疫荧光法检测中性粒细胞中的5-LO分布变化.结果 与I/R组比较,齐留通处理可以明显减轻缺血再灌注所致的心肌病理损伤,降低心肌细胞凋亡率,降低血浆中炎症因子LTB4、IL-1β和TNF-α的水平,抑制5-LO的激活转位,差异有统计学意义(P＜0.05),但各组5-LO表达总量无明显差异(P＞0.05).结论 齐留通对缺血再灌注心肌具有一定的保护作用,其机制可能与抑制5-LO转位激活,进而减轻炎症损伤、抑制心肌凋亡有关.
关键词： 齐留通 花生四烯酸盐5-脂氧合酶 心肌再灌注损伤 -
共转染沉默5-LOX/COX-2基因对胃癌细胞SGC-7901生长的影响
目的 观察沉默环氧合酶2(COX-2)基因和5-脂氧合酶(5-LOX)基因对胃癌细胞SGC-7901生长的影响.方法 分别构建5-LOX/COX-2基因的靶向短发夹RNA(shRNA)真核表达质粒,共同转染胃癌细胞SGC-7901.将细胞分为空白对照组、空质粒组、单独转染组(P-sh5-LOX或P-shCOX-2)及共同转染组(P-sh5-LOX+P-shCOX-2).分别采用RT-PCR及Western blotting检测COX-2/5-LOX的mRNA及蛋白表达情况,MTT法检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞凋亡率.结果 与空白对照组及空质粒组比较,5-LOX和COX-2基因单独转染组及共同转染组的mRNA和蛋白表达量均受到显著抑制(P＜0.05).P-sh5-LOX组(27.38％±0.64％)、P-shCOX-2组(29.05％±0.61％)及共同转染组(50.23％±1.73％)细胞增殖抑制率均显著高于空质粒组(3.78％±0.39％,P＜0.05),共同转染组细胞增殖抑制率显著高于单独转染组(p＜0.05).P-sh5-LOX组、P-shCOX-2组及共同转染组的细胞凋亡率(分别为15.31％±1.53％、16.69％±1.28％、27.27％±1.18％)均显著高于空质粒组(0.99％±0.46％,P＜0.05),且共同转染组显著高于单独转染组(P＜0.05).结论 同时沉默胃癌细胞SGC-7901的5-LOX及COX-2基因,可显著抑制胃癌细胞增殖,促进其凋亡,其效果优于单独沉默其中一个基因.
关键词： 基因沉默 胃肿瘤 花生四烯酸盐5-脂氧合酶 前列腺素内过氧化物合酶类 -
人支气管上皮细胞5-脂氧合酶介导4-氨基联苯的活化及DNA损伤
目的:探讨人支气管上皮(HBE)细胞内5-脂氧合酶(5-LOX)对4-氨基联苯(4-ABP)的氧化活化及所致DNA损伤,为LOX作为前致癌物氧化活化的代谢途径提供依据.方法:①体外酶系统实验:4-ABP在含有大豆脂氧合酶(SLO)的体外酶体系中反应,用分光光度法检测体系中反应产物生成.②细胞实验:4-ABP 100-800μmol·L-1染毒HBE细胞,MTT法检测HBE细胞存活率;Western印迹法检刚5-LOX蛋白表达;单细胞凝胶电泳检测DNA损伤.同时,检测特异性5-LOX抑制剂AA861时5-LOX蛋白表达和多种酶抑制剂对细胞存活率和DNA损伤的影响.结果:在过氧化氢参与下,SLO可以协同氧化4-ABP,LOX抑制剂去甲二氢愈创木酸可抑制该协同氧化作用.4-ABP可以使HBE细胞内5-LOX蛋白表达增加,AA861对5-LOX蛋白表达没有影响;4-ABP 400μmol·L-1可以使HBE细胞产生明显的DNA损伤,彗星细胞的阳性率达47.7%(P<0.01),AA861和萘普生可以抑制该浓度4-ABP所致的DNA损伤,大保护率分别为58.1%和21.7%.结论:4-ABP上调HBE的5-LOX蛋白表达.5-LOX可能通过介导4-ABP协同氧化,导致DNA损伤,这可能是4-ABP致癌的机制之一.
关键词： 花生四烯酸盐5-脂氧合酶 氨基联苯化合物 药物协同作用 DNA损伤 -
5-脂氧合酶与细胞增殖及凋亡
5-脂氧合酶是5-脂氧合酶代谢通路中催化花生四烯酸转化为白三烯和氢氧化物的关键酶,在恶性肿瘤和多种病变细胞中高表达.它可以通过分裂原活化蛋白激酶激酶/细胞外信号调节激酶以及磷酯酰肌醇3激酶/蛋白激酶B等信号转导途径促进肿瘤细胞增殖,抑制肿瘤细胞凋亡.除此之外,5-脂氧合酶还可通过多种方式调控呼吸系统、消化系统以及循环系统等病变细胞的增殖与凋亡.
关键词： 肿瘤 花生四烯酸盐5-脂氧合酶 细胞增殖 细胞凋亡 -
异氟醚预处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注时5脂氧合酶表达的影响
目的 探讨异氟醚预处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注时5脂氧合酶(5-LOX)表达的影响.方法 雄性成年SD大鼠39只,体重250 ～ 300 g,采用随机数字表法,将大鼠随机分为3组(n=13):假手术组(S组)、局灶性脑缺血再灌注组(I/R组)和异氟醚预处理组(I组).采用大脑中动脉阻断法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型.I组吸入2％异氟醚2h,24 h后制备模型.再灌注24 h时进行神经功能缺陷评分,随后处死,取脑组织测量脑梗死体积,分别采用Western blot法和RT-PCR法测定5-LOX、髓样分化因子88 (MyD88)和NF-κB蛋白及其mRNA的表达水平.结果 与S组比较,I/R组和l组神经功能缺陷评分升高,脑梗死体积增大,I/R组5-LOX、MyD88和NF-κB蛋白及其mRNA表达上调,I组5-LOX mRNA 、MyD88蛋白及其mRNA表达上调(P＜0.05)；与I/R组比较,I组神经功能缺陷评分降低,脑梗死体积减小,5-LOX、MyD88和NF-κB蛋白及其mRNA表达下调(P＜0.05).结论 异氟醚预处理可能通过下调5-LOX表达,抑制MyD88/NF-κB信号通路,从而减轻大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤.
关键词： 花生四烯酸盐5-脂氧合酶 异氟醚 缺血预处理 再灌注损伤 脑 -
齐留通对急性坏死性胰腺炎大鼠中性粒细胞活化的影响
5-脂氧合酶(5-LOX)是将花生四烯酸、亚油酸和其他多不饱和脂肪酸转变为具有生物活性的代谢产物如白三烯类的限速酶,从而影响细胞信号转导、结构和代谢.然而关于其在重症急性胰腺炎(SAP)中作用的研究尚少.目的:研究选择性5-LOX抑制剂齐留通对急性坏死性胰腺炎(ANP)大鼠中性粒细胞活化的作用.方法:将54只Sprague-Dawley大鼠随机分为假手术组、ANP组和齐留通组.以5%牛磺胆酸钠胰胆管逆行注射诱导ANP模型.各组大鼠分别于6 h、12 h和24 h处死.行胰腺组织病理学评分,以酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血清可溶性细胞间黏附分子-1(sICAM-1)、可溶性E-选择素(sE-选择素)和可溶性P-选择素(sP-选择素)水平,以免疫组化染色检测胰腺组织ICAM-1、E-选择素和P-选择素的表达,常规方法检测胰腺组织髓过氧化物酶(MPO)活性和血清淀粉酶水平.结果:与假手术组相比,ANP 组同时间点胰腺组织病理学评分、血清sICAM-1、sE-选择素和sP-选择素水平、胰腺组织ICAM-1、E-选择素和P-选择素表达以及胰腺组织MPO活性和血清淀粉酶水平均显著增高(P<0.05).经齐留通预处理后,除外6 h组的组织病理学评分,上述各项指标均较同时间点ANP组显著降低(P＜0.05).结论:选择性5-LOX抑制剂齐留通能通过抑制中性粒细胞活化而有助于减轻ANP大鼠胰腺组织学损伤.
关键词： 胰腺炎 急性坏死性 花生四烯酸盐5-脂氧合酶 齐留通 中性白细胞 -
环氧合酶-2与5-脂氧合酶在溃疡性结肠炎黏膜中的表达及相互关系
目的 研究环氧合酶-2(COX-2)和5-脂氧合酶(5-LOX)在溃疡性结肠炎(UC)患者结肠黏膜中的表达及其相互关系.方法 取32例UC患者结肠黏膜标本根据内镜及组织学进行分级,同时收集健康对照者结肠黏膜标本26例.采用实时荧光定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组化法检测UC患者结肠黏膜COX-2、5-LOX的mRNA和蛋白表达及其相互关系.结果 32例UC患者内镜分级1级10例、2级19例、3级3例;组织学分级Ⅰ级11例、Ⅱ级17例、Ⅲ级4例.活动期UC组织中COX-2和5-LOX蛋白表达率分别为81.25%和53.13%,正常结肠黏膜COX-2和5-LOX蛋白表达率为11.54%和19.23%,二组比较差异均有统计学意义(P值均＜0.01).COX-2、5-LOX的阳性表达率与随内镜分级、组织学分级增加而增加;UC患者结肠黏膜炎症组织COX-2和5-LOX mRNA相对含量分别为20.08±1.17和37.83±1.48,结肠黏膜正常组织为48.42±1.69和11.28±1.62,两组差异均有统计学意义(P值均＜0.05).COX-2与5-LOX的mRNA和蛋白表达呈正相关.结论 COX-2、5-LOX蛋白的表达密切相关,两者均可能在UC发生发展中发挥重要作用.
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咪唑斯汀对花生四烯酸诱导的鼠爪水肿的影响
目的探讨咪唑斯汀抗炎活性的产生机制.方法大鼠鼠爪皮下注射0.1 mL的花生四烯酸(体积分数为0.003)诱导鼠爪水肿炎性动物模型.注射前灌胃分别给予咪唑斯汀、氯雷他定、西替利嗪(0.3 mg/kg),用千分尺测量肿胀足爪厚度,比较不同抗组胺药对鼠爪肿胀抑制程度的高低.分别给予大鼠5-脂氧合酶的直接抑制剂齐留通(3 mg/kg)和咪唑斯汀(0.3 mg/kg),比较2种药物对鼠爪肿胀抑制程度的高低.结果咪唑斯汀显著抑制花生四烯酸诱导的鼠爪水肿,氯雷他定、西替利嗪对鼠爪水肿无抑制作用(P＜0.01);齐留通显著抑制鼠爪水肿(P＜0.01),对鼠爪水肿的抑制率与咪唑斯汀比较差异无显著性(P＞0.05).结论咪唑斯汀可能通过抑制5-脂氧合酶活性的途径发挥其抗炎活性.
关键词： 花生四烯酸盐5-脂氧合酶 咪唑斯汀 模型 动物 -
5-脂氧酶/半胱氨酰白三烯途径不参与大鼠C6胶质瘤细胞缺氧缺糖损伤
目的:观察缺氧缺糖(OGD)是否损伤大鼠C6胶质瘤细 胞,以及5-脂氧酶(5-LOX)/半胱氨酰白三烯(CysLT)途经是否参与OGD损伤. 方法:在OGD处理并恢复不同时间后,观察C6细胞活性变化,以及5-LOX抑制剂和Cy sLT受体拮抗剂的影响;以免疫细胞化学法观察5-LOX蛋白的细胞内分布;以RT-PCR法检测 CysLT1和CysLT2受体mRNA表达;并观察白三烯D4(LTD4)对C6细胞的作用.结果:OGD 4～8 h并恢复24～72 h后,可诱导C6细胞损伤;5-LOX 抑制剂和CysLT受体拮抗剂对OGD损伤无明显作用.OGD未诱导5-LOX的核膜移位.C6细胞高 表达CysLT2受体,但CysLT1受体表达很微弱,OGD不影响它们的表达.此外,L TD4对C6细胞没有明显作用.结论:OGD可诱导C6细胞损伤,但5-LOX /CysLT途径不参与OGD诱导的损伤.
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结肠癌组织中5-LOX和COX-2的表达
目的探讨5-脂氧合酶(5-LOX)、环氧合酶-2(COX-2)在结肠癌组织中的表达及意义. 方法应用免疫组化技术检测99例结肠癌组织、14例结肠腺瘤和35例正常结肠黏膜中5-LOX、COX-2的表达情况.结果 5-LOX在结肠癌及结肠腺瘤中的表达均显著高于正常结肠黏膜组织(P<0.05);COX-2在结肠癌中的表达分别显著高于结肠腺瘤及正常结肠黏膜组织(P<0.05);5-LOX和COX-2表达与结肠癌的Duke′s分期、浸润深度和转移显著相关(P<0.05),与患者的性别、年龄、肿瘤的部位、肿瘤的大小和分化程度无关.结论 5-LOX和COX-2在结肠癌组织中均高度表达,且二者表达与结肠癌的分期、浸润深度和转移显著相关.
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局灶性脑缺血再灌注损伤后杏仁核和海马环氧酶、脂氧酶及核因子-κB的表达
目的 观察大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤(CIRI)后杏仁核和海马环氧酶-2(COX-2)、5-脂氧酶(5-LO)和核因子-κB(NF-κB)的表达情况,探讨其损伤机制. 方法 线栓法制备大鼠大脑中动脉栓塞2 h/再灌注24 h模型.免疫组织化学法检测杏仁核和海马COX-2、5-LO和NF-κB蛋白表达,计数COX-2、5-LO和NF-κB阳性细胞数,Motic Images Advanced 3.0图像分析系统作半定量分析. 结果 CIRI后大鼠杏仁核和海马COX-2、5-LO和NF-κB阳性细胞计数明显增高(P＜0.001),平均灰度值显著下降,表达增强(P＜0.001). 结论 CIRI后大鼠杏仁核和海马区域的COX-2、5-LO和NF-κB表达增强,继而引发后续反应,介导神经损伤.
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脂质代谢相关基因在乳腺浸润性导管癌中的表达及其意义
目的 观察乳腺浸润性导管癌组织和癌旁正常乳腺组织中脂质代谢调控基因的表达,并探讨其与乳腺浸润性导管癌发生的关系. 方法 收集30例乳腺浸润性导管癌患者手术切除的乳腺癌组织和癌旁乳腺组织,RT-PCR检测各组织中脂肪酸合成酶(fatty acid synthase, FAS)、环氧合酶(cyclooxygenase-2, Cox-2)、5-脂氧合酶(5-lipoxygenase, 5-LOX)及过氧化物酶增殖活化受体γ (peroxisome proliferator-activated receptor γ, PPAR-γ)的基因表达. 结果 乳腺浸润性导管癌组织中FAS mRNA的表达显著高于癌旁组织(3.265±0.913 vs 1.300±0.712, P<0.01),同时乳腺癌组织中Cox-2、5-LOX mRNA的表达显著高于癌旁组织(2.449±1.333 vs 1.027±0.596,P<0.05;2.766±1.193 vs 1.159±0.520,P<0.05),PPAR-γ mRNA的表达在乳腺癌组织和癌旁乳腺组织间差异无统计学意义(2.771±1.313 vs 2.235±1.383, P>0.05). 结论 FAS、Cox-2及5-LOX基因的高表达与乳腺浸润性导管癌的发生有关,提示脂质代谢途径调控对乳腺癌的预防具有重要的意义.
关键词： 癌 导管 乳腺 脂肪酸合成酶复合物 环氧化酶 2 花生四烯酸盐5-脂氧合酶 过氧化物酶增殖活化受体γ
