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清肝利湿汤干预慢性乙肝肝胆湿热证的蛋白质组学分析
目的:分析清肝利湿汤治疗慢性乙肝(CHB)肝胆湿热证外周血单个核细胞的蛋白质表达谱的差异,为探讨清肝利湿汤的作用机制奠定基础.方法:利用双向凝胶电泳技术(2-DE)分离来源20例CHB肝胆湿热证患者用清肝利湿汤治疗前后的外周静脉血单个核细胞(peripheralblood mononuclear cells,PBMC).用基质辅助激光解吸飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)对用清肝利湿汤治疗前后的差异蛋白质进行测定肽质量指纹谱.检索MSDB和Swiss-Prot蛋白质数据库鉴定差异蛋白.结果:经过对比分析及质谱鉴定,找到质和/或量有明显改变的38个点.本研究鉴定了9个清肝利湿汤治疗前后的CHB患者的差异表达蛋白:Rho鸟苷酸解离抑制因子,热休克蛋白70,纤维蛋白gamma链前体,F肌动蛋白alpha链亚单位,纤维蛋白beta链前体,XTP3TPA反式激活蛋白,假想蛋白,丙酮酸激酶同工酶M1/M2,假想蛋白片段.结论:这些差异蛋白有助于了解CHB肝胆湿热证患者病理机制过程及清肝利湿汤的作用机制.
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咳嗽变异性哮喘的差异蛋白膜联蛋白-1的表达及分析
目的:研究咳嗽变异性哮喘患者与健康对照者肺泡灌洗液(broncho alveolar lavage fluid,BALF)中有意义的差异蛋白点.方法:选取2016年3月至2016年9月佳木斯大学附属第一医院收治的32例咳嗽变异性哮喘患者为研究对象,作为观察组;选取同期32例健康志愿者为对照组.去除2组研究对象的BALF中的高丰度蛋白,给2组BALF标本分别建立双向凝胶电泳图谱,运用质谱技术得到BALF的蛋白质指纹图谱,筛选出差异表达的蛋白质,再应用生物信息学方法选定其中的一种候选蛋白.结果:凝胶电泳图谱显示,观察组BALF与对照组相比,共有23个蛋白斑点显著异常,经过与质谱分析的指纹图谱进行匹配分析,并结合数据库,初步鉴定出12个蛋白质,其中上调的蛋白质点有:巨噬细胞移动抑制因子(MIF)、程序性细胞死亡基因4(PDCD4)、克拉拉细胞蛋白16(Clara cell protein 16,CC-16)、甲状腺素运载蛋白(transthyretin)、免疫球蛋白结合因子(immunoglobulin binding factor,IgBF)、半胱氨酸蛋白酶抑制剂S(cystatin S);下调的蛋白质点有:溶菌酶(lysozyme)、蛋白激酶PakZ、GTP ase Cdc42、膜联蛋白-1(annexin-1)、热休克蛋白Mot-2、乳铁蛋白(lactoferrin).对下调蛋白膜联蛋白-1进行浓度测定,观察组的膜联蛋白-1浓度显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).结论:用质谱分析鉴定了23个超过3倍差异的蛋白质,其中,共有12个蛋白质被鉴定,生物信息学进一步分析显示膜联蛋白-1能被当成候选蛋白进行更深层次的研究.膜联蛋白-1在哮喘BALF中的表达显著下降,其与哮喘的发病机制密不可分,故能将膜联蛋白-1作为哮喘发病的潜在蛋白标记物.
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蛋白质组学技术在神经系统疾病中的应用进展
随着科学技术的蓬勃发展,蛋白质组学技术已广泛运用于生物医学研究领域,其主要技术包括双向凝胶电泳、计算机图像分析与大规模数据处理及质谱等.本文通过查阅近几年国内外文献,归纳了蛋白质组学技术发展的新动态,阐述蛋白质组学技术应用于神经系统疾病的研究,如精神分裂症、阿尔茨海默症、帕金森氏疾病及神经系统其他疾病的新研究进展.
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重型脑损伤大鼠脑组织蛋白质组差异表达
目的 寻找重型脑损伤(severe traumatic brain injury,sTBI)大鼠伤后不同时间的蛋白质组变化规律.方法 提取创伤后3,7和14 d的鼠脑组织总蛋白进行双向凝胶电泳,筛选和鉴定差异蛋白质点.结果 共筛选出17个差异蛋白质点,它们参与细胞代谢、应激与炎症反应等过程.结论 利用双向凝胶电泳技术可寻找到多种参与重型脑损伤病程演进的蛋白质.