首页 > 文献资料
-
乙型肝炎病毒表面抗原基因启动子Ⅰ结构及调节研究
0引言乙型肝炎病毒(HBV)持续感染导致全球性健康问题.世界人口约6%是病毒携带者,HBV也是导致肝硬化和肝癌的危险因素.HBV要持续感染人体,必须要有持续的病毒复制,HBV基因表达精确调节对病毒复制起关键作用.HBV基因组分为结构基因序列和调节基因序列两大部分.调节基因序列和结构基因序列相互重叠,即使结构基因序列本身也有部分重叠,因此,HBV具有结构紧密的特点.HBV序列是在C、S1、S2、和X启动子控制下转录的.除了表面抗原基因启动子Ⅰ (SP Ⅰ),所有其他启动子缺乏TATA盒.两个增强子和负调控元件进一步控制HBV RNA合成,所有转录调控元件插入蛋白编码的基因区.SP Ⅰ作为指导2.4kb mRNA转录的启动子序列,在HBV复制中具有十分重要的作用.
-
乙型肝炎病毒包膜大蛋白的自激活
目的:构建乙型肝炎病毒包膜大蛋白的酵母表达载体,研究其自激活作用.方法:用多聚酶链反应(PCR)法扩增HBV包膜大蛋白(LHBs),前-S1蛋白(pre-S1),前-S2蛋白(pre-S2)及主蛋白(SHBs)的编码基因,并在其5'端引入EcoRI/BamHI内切酶位点,分别连接入酵母表达载体pGBKT7中,构建酵母表达质粒,转化酵母细胞AH109并在其内表达,然后分别铺于含有X-α-半乳糖的营养缺陷型培养基SD/-Trp和SD/-Trp-His-Ade上进行自激活验证(蓝/白筛选).结果:成功克隆出编码各种HBV包膜蛋白的基因,构建表达载体并在酵母细胞中表达,转化了pGBKT7-LHBs和pGBKT7-preS1的AH109酵母细胞在两种营养缺陷型培养基上均可正常生长,并且可以产生α-半乳糖苷酶从而在铺有X-α-半乳糖的培养基上呈现蓝色,而转化了pGBKT7-preS2和pGBKT7-SHBs的细胞只能在SD/-Trp的培养基上生长,且没有变蓝.结论:LHBs可以作为反式激活子发挥作用,代替GAL4蛋白的激活域来激活GAL4上游激活序列(GAL UAS)和TATA盒,从而激活了下游报告基因(ADE2,HIS3,MEL1和LacZ)的表达,并且其自激活作用来自于前-S1结构域.
-
乙型肝炎病毒表面大蛋白(LHBs)的研究进展
目前临床上慢性乙型肝炎(CHB)的诊疗和预后判断的常规项目有血清HBV DNA、血清免疫指标、肝功能生化指标.特殊榆测项目有肝组织活检、肝组织cccDNA检测等[1].血清乙型肝炎病毒(HBV)表面大蛋白(LHBs)的检测是近年来研究较多的一个新的诊疗指标.
-
乙肝病毒外膜大蛋白临床应用价值
近几年乙肝病毒外膜大蛋白(Hepatitis B virus large surface protein,HBV-LP)作为一种新近开始重视的乙型肝炎血清学指标,越来越受到重视.本文旨在通过与其他相关指标的比较来探讨HBV-LP临床应用价值,现报道如下.
