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MAPK信号转导通路与生存素反义寡核苷酸诱导人胃癌细胞凋亡的关系
目的:探讨分裂原激活的蛋白激酶家族(MAPK)信号转导通路与脂质体生存素(survivin)反义寡核苷酸转染诱导人胃癌细胞系HS-746T凋亡的关系.方法:设计合成survivin反义寡核苷酸(ASODN)转染胃癌HS-746T细胞,分空白对照组,脂质体和正义链转染组,100,200,400 nmoL/L反义链转染组及P38MAPK、ERK1/2抑制剂组.用流质细胞仪检测转染后2,4,8,12,24 and 48 h各组细胞增生和凋亡指数.逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、免疫细胞化学染色法、Western blot蛋白免疫印迹法、免疫沉淀法及激酶活陛测定法检测各对照组及ASODN组转染后survivin mRNA和P38MAPK,ERK1/2,survivin蛋白表达和活性的变化.结果:不同时间空白组、脂质体和正义链转染组ERK1/2,P38MAPK表达均无明显差异,各浓度survivin ASODN转染组凋亡细胞增多,凋亡指数高于其他对照组.P38MAPK抑制剂组凋亡细胞减少,ERK1/2抑制剂组增多.SurvivinnRNA和蛋白表达随着转染浓度的增加而降低.磷酸化和非磷酸化细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulatedkinase1/2,ERK1/2)的表达随药物浓度增加而减弱.P38MAPK的表达在各组均相同,但ASODN转染组活性增高.结论:Survivin基因反义寡核苷酸在体外可能通过MAPK信号转导通路激活凋亡相关的信号途径P38MAPK,阻断与细胞增生相关的信号途径ERK1/2来诱导胃癌细胞凋亡,抑制人胃癌细胞的增生
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心肌缺血再灌注损伤信号分子p38MAPK的研究进展
冠心病是当今世界常见的死亡原因之一.在急性心肌梗塞后,及时的再灌注治疗(包括溶栓和PCI),恢复冠状动脉血流是减少心肌梗死面积,提高患者成活率有效的措施.但是,人们又观察到在恢复血流的的过程中,又造成了新的损伤,即缺血再灌注损伤.
关键词： 冠心病 心肌缺血 再灌注 分裂原激活的蛋白激酶 -
Fgf4信号通路在早期胚胎发育过程中的作用
囊胚的形成,内细胞团?(inner cell mass,ICM )及滋养外胚层(Trophectoderm,TE)的形成是胚胎的第一次分化事件,而第一次的细胞命运决定则是大约在32-细胞阶段才确定的.在囊胚形成的过程中参与细胞命运决定的可能转录因子有Fgf4(成纤维细胞生长因子4,Fibroblast GrowthFactor 4)、Fgfr2( Fibroblast Growth Factor receptor2, 成纤维细胞生长因子受体2)、Cdx2(caudal homeobox Transcription Factor 2 ,尾型同源盒转录因子2)、Tead4(TEA域家族成员4,TEA domain family member4)、Sox2 (SRY--sex-determining region Y box 2)、Oct4(Octamer-4,OCT3 /Pou5f1)等.本文主要综述FGF4信号通路有关的一系列因子在这一过程中的作用的研究进展.Murohashi M 等人提出在早期胚胎F G F4信号通路中各因子相继产生作用,它们之间的可能的关系为FGF4-FGFR2-FRS2a(FGFR2的底物)-E R K(促分裂原激活的蛋白激酶)-Cdx2,而Fgf4的表达受到Sox2/Oct4的协调调控表达,因此可以改为Sox2/Oct4-FGF4-FGFR2-FRS2a-ERK-Cdx2.
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从P38-MAPK信号通路研究黄芩苷对Ac-LDL+LPS诱导的与动脉粥样硬化相关巨噬细胞凋亡的影响
目的:从P38-MAPK信号通路研究黄芩苷对Ac-LDL+LPS诱导的与AS相关巨噬细胞凋亡的影响.方法:收集鼠腹腔巨噬细胞进行体外培养,使用100 μg/mL乙酰低密度脂蛋白及1μg/mL脂多糖诱导巨噬细胞凋亡,以120、240、480μg/mL黄芩苷作为低、中、高3种剂量进行干预,Annexin-V和PI双染后用流式细胞仪检测细胞凋亡,Western-bolt技术检测磷酸化P38蛋白表达量.结果:正常组、对照组与模型组的细胞凋亡率差异有统计学意义(P＜0.01),模型组细胞凋亡率明显高于正常组和对照组,可知实验造模成功.低剂量黄芩苷观察组与模型组细胞凋亡率差异无统计学意义(P＞0.01).中、高剂量黄芩苷观察组与模型组相比细胞凋亡率差异有统计学意义(P＜0.01),细胞凋亡率明显高于模型组.Ac-LDL+LPS联合干预较Ac-LDL或LPS单独干预引起的磷酸化P38含量高.随着黄芩苷干预剂量增高,磷酸化P38表达有升高趋势,高剂量黄芩苷干预组中磷酸化P38表达升高明显.结论:脂多糖和乙酰低密度脂蛋白双重打击是诱导巨噬细胞凋亡的重要原因,P38-MAPK信号通路参与这一过程.高剂量的黄芩苷可能通过增强磷酸化P38表达来促进脂多糖和乙酰低密度脂蛋白诱导的巨噬细胞早期凋亡,从而拮抗早期动脉粥样硬化的病理进程.
关键词： 脂多糖 乙酰低密度脂蛋白 分裂原激活的蛋白激酶 巨噬细胞 凋亡 -
p38 MAPK信号通路及其在心肌缺血再灌注损伤中的作用
心肌缺血再灌注时氧自由基和细胞因子的大量释放激活p38 MAPK,然后p38MAPK把信息传到核内,引起一些早期基因的表达,如c-fos、c-jun、NF-kB,但它们的激活是保护作用还是恶化作用尚无定论.p38 MAPK是否参与缺血预处理(IPC)的保护作用也无一致意见.造成这些分歧的原因主要在于实验模型和动物种类差别.
关键词： 分裂原激活的蛋白激酶 缺血再灌注 缺血预处理 心肌 -
转录因子NF-κB与胰岛素抵抗关系
胰岛B细胞分泌的胰岛素与靶细胞表面胰岛素受体(In-sulin receptor,IR)结合后,激活IR内在的酪氨酸蛋白激酶活性,IR进而联结并激活含有酪氨酸残基(Tyr)的下游信号分子-Shc蛋白和胰岛素受体底物(Insulin receptor substrate,IRS-1、2),Shc与IRS蛋白通过自身的酪氨酸蛋白激酶活性激活下游分子来启动胞内有丝分裂原激活的蛋白激酶(Mito-gen-activated protein kinase,MAPK)及磷脂酰肌醇-3激酶(Phosphatidylinositol 3-kinase,P13-K)两条信号通路.
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长春新碱对MGC803细胞多药耐药的短期诱导及PD098059、myr-ψPKC对其耐药的逆转
本实验采用长春新碱(VCR)在短期内对胃癌细胞株MGC803的作用,观察其多药耐药(MDR)相关基因表达的变化.并通过特异性促分裂原激活的蛋白激酶(MAPK)/ERK蛋白激酶(MEK1/2)抑制剂PD098059及特异性蛋白激酶C(PKC)抑制剂myr-ψPKC,观察其对MDR的影响.
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Cyclophilin A是一种氧化应激诱导分泌的生长因子
活性氧介质(ROS)在动脉粥样硬化、高血压和再狭窄发病机制中扮演着各种重要角色，其中部分机制可能是促进血管平滑肌细胞生长。平滑肌细胞分泌许多细胞因子，如EGF、TGF、PDGF，并以旁分泌机制发挥作用。本文实验证明CyPA(Cyclophilin A)是免疫亲和素家族成员之一，具有肽脯氨酰异构酶(Peptidyl-prolyl isomerase, PPIase)活性，在氧化应激条件下，由血管平滑肌细胞分泌到细胞外，介导活性氧介质对细胞外信号调节激酶(ERK1/2)的激活和血管平滑肌细胞增殖。人类重组的CyPA能模仿细胞分泌的CyPA功能，激活ERK1/2并刺激平滑肌细胞增殖。CyPA激活ERK1/2需要PPIase参与。PPIade酶抑制剂环孢霉素可抑制CyPA对ERK1/2的激活；同时我们还观察到CyPA能抑制硝普钠诱导的血管平滑肌细胞凋亡。在体外，氧化应激和血管损伤能促进CyPA的表达和分泌。在大鼠颈总动脉球囊损伤模型，CyPA免疫组织化学检测发现球囊损伤24 h后，整个血管壁都有CyPA表达，其中内膜CyPA表达强；到第4天，CyPA开始在中膜层和新生内膜细胞表达，一周后，当完整的新生内膜已形成时，CyPA主要在中膜层和新生内膜表达。呈现逐渐从外膜向内膜“迁移”现象。这些发现第一次证明CyPA为氧化应激诱导分泌的生长因子，表明CyPA在血管疾病发病机制中发挥着重要作用。
关键词： 氧化应激 肽脯氨酰顺-反异构酶 分裂原激活的蛋白激酶 平滑肌细胞
