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肾移植后患者肺孢子菌肺炎的临床特点分析
目的:探讨肾移植后肺孢子菌肺炎(PCP)的临床特点、诊断及治疗方法.方法:本组7例肾移植后患者PCP均经病原学确诊,具有完整的病例资料,并结合国内外相关报道进行文献复习.结果:7例患者中男性5例,女性2例,年龄28～57岁,平均45岁；临床主要表现为发热、干咳、呼吸困难,而肺部体征较少,其特点为“症征不符”；动脉血气表现均为低氧血症,严重者为Ⅰ型呼吸衰竭；静脉血乳酸脱氢酶(LDH)和(1,3)-β-D-葡聚糖(G试验)水平均明显升高；胸部高分辨CT(HRCT)表现为双肺弥散性磨玻璃影(GGO)伴或不伴斑片实变影；5例患者行支气管肺泡灌洗液(BALV)六胺银染色可发现肺孢子菌包囊,另外2例在痰中发现肺孢子菌包囊；痰液及BALF肺孢子菌PCR检测均为阳性.经免疫抑制剂减量、磺胺甲恶唑/甲氧苄啶(SMZ/TMP)治疗、机械通气及支持对症后,5例治愈,1例自愈,1例死亡.结论:肾移植后患者PCP具有较为明显的临床特点,血浆LDH和(1,3)-β-D-葡聚糖等检测有助于早期诊断,痰液或BALF六胺银染色是主要的确诊方法；早期免疫抑制剂减量和SMZ/TMP治疗后患者的预后相对较好.
关键词： 肾移植 肺孢子菌肺炎 (1 3)-β-D-葡聚糖 六胺银染色 磺胺甲恶唑/甲氧苄啶 -
艾滋病伴卡氏肺孢子虫肺炎一例
患者男性，41岁，1999年6月2日因乏力、呼吸困难、咳嗽、发热、食欲不振于外院就诊，行胸部X线、CT检查。CT示：两肺弥漫性渗出性病变，病灶呈絮片状，双肺范围广，以外周和后部为主。病灶密度较淡，边界不清，中肺野病灶内可见大小不等“囊泡”样透光区呈“蜂窝”状（图1），诊断为“双下肺感染”。给予多种抗生素治疗无效，实验室检查抗HIV(+)，经中国军事医学科学院再次免疫印迹法复查HIV抗体(+)，于1999年6月11日转入我院。门诊以“艾滋病合并肺炎”收入院。既往史：患者有国外冶游史。查体：双肺叩清音，呼吸音粗，未闻及干、湿音。实验室检查：6月11日血常规：白细胞9.0 ×109/L，中性细胞0.7，抗HIV(+)，CD4∶CD8=0.063。6月14日胸部X线示：两肺弥漫性病变，斑点、片状阴影增多，范围增大，透光度降低，呈磨玻璃样改变，部分病灶融合，融合区密度不均（图2）。6月15日行血气分析：动脉血氧分压42.0 mm Hg（1 mm Hg=0.133 kPa），动脉血二氧化碳分压39.8 mm Hg，pH 7.058。患者经抗感染治疗无效，死于呼吸衰竭。尸体检查（尸检）病理示：两肺实变，未见明显肺含气。肺较坚实，体积增大，呈灰褐色，外形呈不规则结节状，肺叶边缘可有大疱性肺气肿，切面可呈灰红色肝样变，质地均一，肺泡模糊不清。光镜下可见：肺泡间隔有淋巴细胞和浆细胞浸润，肺泡上皮增生，肺泡腔内渗出物呈“泡沫状”或“蜂窝状”，甲烷六胺银染色（+，图3）。尸检确诊为“艾滋病合并卡氏肺孢子虫肺炎（PCP）”［1］。
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特殊染色技术在艾滋病合并真菌病理诊断中的应用
目的 探讨特殊染色技术在艾滋病合并真菌病理诊断中的应用价值.方法 选取2010年2月至2013年11月上海市(复旦大学附属)公共卫生临床中心确诊为艾滋病合并真菌感染的患者20例,回顾性分析经苏木素-伊红(HE)染色、过碘酸希夫染色(PAS)和六胺银染色的病理资料,观察常见真菌在光镜下的形态.结果 20例艾滋病合并真菌感染的患者中,肺部隐球菌2例,皮肤、肺、腹腔肠系膜淋巴结马尔尼菲青霉菌3例,会厌、颈部淋巴结、口腔、腹腔及皮肤组织胞浆菌5例,上颌窦、肺及声带曲霉4例(合并结核3例),肝、咽、食道及胃部白色假丝酵母菌6例.HE染色组织中炎性细胞浸润,可见肉芽肿形成,凝固性坏死,真菌形态尚能辨认,但需仔细观察,否则易漏诊或误诊;PAS染色,真菌孢子和假菌丝呈亮丽的紫红色,细胞核紫蓝色;六胺银染色,真菌孢子和假菌丝呈清晰可辨的黑褐色.结论 除常规进行HE染色外,联合应用PAS染色和六胺银染色,有助于提高真菌的病理诊断率.
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急性甲氨蝶呤结晶性肾病
接受大剂量甲氨蝶呤治疗血癌的患者约有2％会发生急性肾功能衰竭。这些晶体在人体组织的状况还不清楚。近加拿大学者描述了甲氨蝶呤结晶性肾病患者肾小管内的晶体发生情况。
一名52岁男子患侵袭性 B 细胞淋巴瘤，在执行 CODOX-M方案（地塞米松、环磷酰胺、多柔比星、长春新碱、利妥昔单抗、阿糖胞苷、甲氨蝶呤和亚叶酸钙）的第10天，接受了静脉注射甲氨蝶呤（1．20 g／m2，1 h 内输完；继以0．24 g／m2，在23 h 内输完）。血清肌酐浓度在输液前低于50μmol／L （0．57 mg／dl），但在输液约20 h 后增加到116μmol／L （1．31 mg／dl），4 d 后更达到465μmol／L （5．26 mg／dl）。在患者的尿液中也观察到有少量的甲氨蝶呤样晶体，排除了诱导药物析出的危险因素或引起结晶性肾病的其他原因。输液7 d 后进行肾活检，病理显示重度急性肾小管损伤，肾小管内和间质有众多外观独特的沉积物，由致密或针形金黄色晶体排列成环状结构，六胺银染色阳性，并在偏振光下显示蓝色或金黄双折射。冯科萨和茜素红染色均为阴性。肾小球形态尚正常，疤痕很小。 -
心肌毛细血管六胺银染色法及缺血预适应对心肌毛细血管的影响
探索显示心肌毛细血管的方法及用该法观察缺血预适应（ischemic preconditioning, IP）对毛细血管的影响。制备套扎前降支动脉犬模型，缺血再灌注（ischemia-reperfusion, IR）组予缺血1h，再灌注2h；IP组在缺血与再灌注之前，予缺血和再灌注各5min，反复4次。实验终点取缺血心肌进行六胺银染色显示毛细血管，并定量比较。结果六胺银法染色显示心肌毛细血管清晰；IP组缺血心肌毛细血管数、周长和面积密度较IR组增加。认为六胺银法显示心肌毛细血管可靠实用；IP减轻缺血后毛细血管的破坏，提示具有毛细血管保护效应。
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艾滋病合并组织胞浆菌感染CT表现一例
患者男，52岁。因出现面部疱疹3周，纳差2周入院。2个月前发现人类免疫缺陷病毒感染，已应用抗病毒药物治疗，具体不详。体检：面部多发疱疹，中上腹部可触及10 cm×8 cm包块，质硬，边界清，活动性差，余无明显异常。采用德国Siemens 16层螺旋CT仪行胸、腹部CT扫描，可见双肺下叶散在小结节；腹腔内可见一10.7 cm×15.0 cm软组织密度灶，形态欠规则，增强扫描可见分隔状强化，病灶包绕门静脉、双肾静脉、腹主动脉干及其分支血管，所见血管未见充盈缺损（图1）；肝内及脾脏内可见多发结节状低密度灶（图2），增强后未见明显强化；腹腔内未见明显积液。病理表现：组织内炎细胞浸润，大量真菌孢子，其核周有空晕，大多位于胞浆内生长，可见坏死区域（图3，4）。碘酸雪夫染色、六胺银染色阳性，抗酸染色阴性。诊断为组织胞浆菌感染。
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微波技术在肾小球基底膜六胺银染色中的应用
肾穿刺活检病理诊断是目前认为确诊肾脏疾病的唯一方法,特殊染色能直观地观察到肾小球、肾小管、肾间质及血管的病理变化.六胺银染色是观察肾小球基底膜的重要方法之一,我们通过微波技术对肾小球基底膜进行六胺银染色改进,获得了比传统染色方法更好的效果,现报告如下.
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改良革兰染色法在显示石蜡切片真菌中的应用
目的 建立真菌的病理切片改良革兰染色法.方法 选取确诊真菌感染的组织蜡块,切若干空白片,通过苏木素-伊红染色(HE)、高碘酸-无色品红染色(PAS)、六胺银染色(GMS)、改良革兰染色后,比较改良革兰染色法的染色效果.结果 改良革兰染色法的染色效果好,该法具有易操作、染色效果稳定等优点.结论 改良革兰染色法能够清晰地显示出组织切片中的真菌,并且染色效果稳定,在检测组织中的真菌时可发挥重要的辅助诊断价值,具有广泛的应用前景.
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霉菌性阴道炎两种特殊染色诊断法的比较
目的 对两种不同的真菌染色法在念珠菌阴道炎真菌染色的方法和效果方面予以比较.方法 对疑似念珠菌阴道炎患者阴道脱落上皮细胞涂片50张,随机抽取25张作六胺银染色,另25张做过碘酸雪夫(pas法)染色.结果 六胺银染色方法显示:芽生孢子和假菌丝呈黑褐色,背景橙黄色,阳性率为76%;过碘酸雪夫染色法显示:芽生孢子和假菌丝红色,背景紫蓝色,阳性率为80%.结论 过碘酸雪夫染色法简便易行,着色鲜亮,试剂配制简单,成本较低,真菌染色阳性率较高,是诊断念珠菌阴道炎非常好的实验方法,值得推广.
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免疫组化和GMS染色对AIDS合并肺孢子菌肺炎的临床诊断价值
目的 探讨免疫组化及六胺银(gomori's methenamine silver nitrate stain,GMS)染色法对AIDS合并肺孢子菌肺炎(pneumocystis pneumonia,PCP)的临床诊断价值.方法 选择50例临床确诊为合并PCP的AIDS患者作为实验组(PCP组)、25例非PCP的呼吸道感染患者作为对照组,分别采用单克隆抗体免疫组化法和GMS染色法对两组患者的支纤镜肺活检标本进行肺孢子菌(pneumocystis jiroveri,Pj)检测,并比较两种方法的敏感性和特异性.结果 免疫组化法检测Pj的敏感性为66%(33/50),特异性为100%(25/25);GMS染色法检测Pj的敏感性为42%(21/50),特异性为92%(23/25).结论 免疫组化法检测Pj的敏感性和特异性均高于GMS染色法,这将有助于提高Pj的检出率及PCP的确诊率.
关键词： 获得性免疫缺陷综合征 肺孢子菌肺炎 免疫组织化学 六胺银染色 -
六胺银加马松三色双重染色在肾穿刺活检组织中的应用
肾小球病是发病率较高的疾病，肾穿刺检查是确诊肾脏疾病的重要手段，光镜观察肾组织病变在进行肾小疾球疾病诊断和分类工作中起重要作用[1]。常规HE染色不能清晰地显示肾小球基膜，在实际工作中除免疫荧光抗体检测外， PAS、PASM、Masson 特殊染色才能将基膜清晰地显示出来[2]。尤其是六胺银加马松三色双重染色在光镜下观察基膜增厚和钉突、双轨，对诊断膜性肾小球肾炎及其它各种肾小球疾病有重要价值，是观察肾小球基膜改变的重要方法之一[3]。
关键词： 肾穿刺活检组织 六胺银染色 六胺银加马松三色双重染色 -
光波变频微波辐射技术在真菌 Crocott六胺银快速染色中的应用及体会
真菌侵犯人体，由真菌感染致病的病例数不断增加，如何准确认识真菌，显示真菌，给病理技术提出更高的要求。本科室经过多年实践，利用光波微波辐射技术在Crocott六胺银快速染色中对新形隐球菌、曲霉菌菌丝、毛霉菌菌丝、细胞胞质菌、马内菲青霉菌进行显示，得到了很好的染色效果，证明光波变频微波辐射技术应用在快速Crocott六胺银染色中具有一定的实用价值，对快速疾病诊断具有重要意义。该方法较传统的六胺银染色，明显缩短了染色时间，染色效果也好于传统六胺银方法，现介绍如下。
关键词： 真菌 六胺银染色 光波变频微波辐射技术 -
改良六胺银染色在显示放线菌中的应用
放线菌(actinomyces)菌体小,结构简单,只有菌丝,直径0.5～1 μm,形态与细菌和真菌都有相似之处~[1].放线菌为丝状杆菌,分支状菌丝扭结在一起.通常在HE染色切片上,能观察到中心呈蓝色菌丝体,周围呈放射状排列的嗜伊红棒状体,呈分叶状、多角形的菌落,直径100～300 μm.当病变组织中含有少量菌体情况下,可选用六胺银染色法,经改良在胃蛋白酶消化后进行染色,从而提高了放线菌的显示效果.
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肾小球基膜六胺银染色的比较
肾小球肾炎的病变主要表现在肾小球,尤其是肾小球基膜的改变.常规 HE 染色不能清晰地显示基膜,要通过特殊染色(如 PAS 、六胺银浸银法)才能将基膜清晰地显示出来,协助诊断.我们对几种不同处理方法的六胺银染色( periodic acid methenamine silver, PAMS )进行比较和分析.
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不同染色方法对肺孢子菌的诊断作用比较
目的 比较革兰染色、苏木素一伊红染色(hematoxylin and eosin stain,HE)、吉姆萨染色(Giemsa stain)和六胺银染色(Gomoris Methenamine silver nitrate stain,GMS)在诊断肺孢子菌肺炎中的作用.方法 收集1例典型肺孢子菌感染患者的痰液,经消化处理,离心,涂片,分别进行革兰染色、HE染色、吉姆萨和六胺银染色,油镜观察.结果 革兰染色未见可疑结构;HE染色肺孢子菌包囊壁不着色,呈透明的晕圈状,囊内小体4～8个呈蓝紫色;吉姆萨染色包囊壁不着色,可见清楚的轮廓,囊内小体核蓝色,囊内容物紫红色;六胺银染色肺孢子菌包囊壁棕到黑色,结构清楚,囊内可见圆形的核状物和特征性的括弧状结构.结论 常规使用的革兰染色无法诊断肺孢子菌,其他3种方法均可选择,合理的方案是用吉姆萨染色筛选,用六胺银染色确证.
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一种评价心肌基膜厚度的方法
目的 观察不同月龄自发性糖尿病大鼠(GK大鼠)及链脲佐菌素(STZ)糖尿病大鼠的心肌细胞及微血管基膜厚度及Ⅳ型胶原蛋白表达程度的变化,探索一种操作简单、能够评价心肌基膜厚度的方法.方法 取4、5、6、7 mon GK大鼠,5 mon病程的链脲佐菌素糖尿病大鼠(STZ),正常7 mon Wister大鼠各8只,对心肌切片进行六胺银染色和Ⅳ型胶原蛋白免疫组化染色.选取左心室内膜作为检测视野,通过计算机图像分析,在相同背底倍体下计算基膜阳性染色面密度、Ⅳ型胶原阳性染色面密度在所有心肌组织中的比值,作为评价心肌基膜厚度和Ⅳ型胶原表达程度的指标.结果 两种糖尿病大鼠血糖、基膜阳性面密度比值(BMPSD)、Ⅳ型胶原阳性面密度比值(CPSD)均比正常大鼠增高,差异有显著性(P<0.01).GK大鼠基膜阳性面密度比值在7mon,Ⅳ型胶原阳性面密度比值在第5月,均比4 mon明显增强(P<0.01),其余各组之间有增高趋势(P>0.05).结论 对心肌切片进行六胺银染色,通过计算机图像分析,计算基膜阳性面密度比值,可以作为评价心肌基膜厚度的指标.
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Masson-PASM套染方法在肾穿刺活检中的应用研究
目的 探讨Masson-PASM套染方法在肾穿刺活检中的应用价值.方法 收集肾穿刺活检组织208例,分别应用Masson染色、PASM染色、Masson-PASM套染方法进行染色,并于显微镜下观察.结果 Masson染色可以显示,肾小球免疫复合物呈红色;PASM染色可以显示,肾小球基底膜、肾毛细血管基底膜及网状纤维呈黑色;Masson-PASM套染可以同时显示,肾小球免疫复合物和基底膜,分别呈红色和黑色.结论 Masson-PASM套染能够准确、清晰定位肾小球免疫复合物和基底膜,具有一定的临床应用价值.
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肾淀粉样变10例的临床病理分析
现将2006年1月至2011年12月我科10例肾淀粉样变患者临床病理进行分析.资料与方法1.临床资料:男7例、女3例,发病年龄32～79岁,平均55.4岁,病程1～31个月,3例低血压.均表现为肾病综合征,24 h尿蛋白定量3.76～10.6 g,1例镜下血尿,2例血肌酐分别为163 μmol/L、207μmol/L.7例心电图肢导联低电压,8例心肌肥厚.1例肺淀粉样变,皮肤淀粉样变、神经系统损害各3例.凝血功能障碍、合并糖尿病、继发于系统性红斑狼疮各1例,合并乙型肝炎2例.均行尿本周氏蛋白、血脂7项、血清蛋白免疫固定电泳、免疫球蛋白定量、乙肝两对半、丙肝抗体、抗核抗体、抗双链DNA抗体、胸X片、泌尿系B超,部分患者行骨髓穿刺细胞学检查,有皮肤损害的行皮肤活检并行刚果红染色,如阳性,则用高锰酸钾氧化试验.10例均行肾活检,肾组织光镜行苏木精-伊红染色、过碘酸雪夫氏染色、六胺银染色、Masson染色.冰冻切片免疫荧光检测IgG、IgA、IgM、C3、C4、C1q、纤维蛋白原.
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糖尿病合并马尔尼菲青霉菌肺炎一例
患者男,74岁,因"体检发现右上肺肿块近1个月"入住我院.既往病史:1996年"脑卒中史",2011年5月发现患有糖尿病,嗜烟饮酒史57年.辅助检查:①胸片示:右上肺感染性病变,结核可能,双下肺感染.②CT示:右上叶前段改变,考虑炎性病灶,肿瘤并梗塞性炎症,纵隔内淋巴结增多.入院后完善相关术前检查及控制血压及血糖后,在全麻下行右上肺叶切除+系统淋巴结清扫术.术中顺利,术后患者恢复良好.术后病理检查:送检"右上肺叶"于第三段见一3.5 cm ×2 cm的灰白色区域,多点取材制片,镜下见中央为大片红染坏死物,周边可见少许多核巨细胞,抗酸染色(一),肺泡腔巨噬细胞内可见多个PAS染色及六胺银染色阳性的直径2～4μm的酵母细胞,诊断:(右上肺)真菌病(马尔尼菲青霉菌).
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PAS联合六胺银染色诊断局限性马尔尼菲青霉菌感染的应用
目的 探讨建立快速诊断局限性马尔尼菲青霉菌感染的方法,以期早期诊断,降低死亡率.方法 采用高碘酸-无色品红(PAS)染色联合六胺银染色对4例非AIDS马尔尼菲青霉菌感染者活检组织进行马尔尼菲青霉菌的特殊染色,分析感染者的临床表现和病理组织学诊断特点.结果 患者均为广东本地居民,属局限性马尔尼菲青霉菌感染.除1例有发热外,临床上未见以发热、失重、贫血、白细胞增高为主的马尔尼菲青霉菌感染症状以及多器官损害症状.HE染色显示病理组织学类型为肉芽肿型和化脓型.病变组织经PAS染色与六胺银染色后,在油镜下增生的泡沫状巨噬细胞胞浆内,呈现大量红色或黑色的卵圆形及腊肠状酵母样青霉菌孢子,无荚膜,在腊肠状菌体中可见马尔尼菲青霉菌特有的裂殖时出现的横隔膜.结论 PAS联合六胺银染色清晰显示组织中马尔尼菲青霉菌的特征性结构和形态,结合病理组织学特点、中国南方地区生活或旅游史,可以快速诊断局限性马尔尼菲青霉菌感染.
