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肾小球足细胞裂孔膜蛋白在肾移植大鼠慢性移植肾肾病中的作用
进展性蛋白尿和肾小球硬化是慢性移植肾肾病(chronic allograft nephropathy, CAN)的特征性表现.足细胞是蛋白尿主要的物理和电荷屏障,它的损伤可导致蛋白尿和肾小球硬化.尽管足细胞在局灶节段性肾小球硬化、膜性肾病、微小病变和糖尿病肾病中的地位已经得到证实,但是其在CAN中的作用机制目前仍知之甚少.美国研究者利用大鼠肾移植模型试图解释足细胞损伤在CAN中的作用.
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肾缺血-再灌注对大鼠足细胞podocin的影响及乌司他丁干预研究
肾缺血-再灌注损伤是一种常见的临床现象,肾缺血后如使肾血流再通时,可见细胞的损伤继续加重.Seda-Neto等[1]研究发现大鼠肾移植再灌注60 min后,用电镜观察到足细胞肿胀且细胞质密度降低,有部分足细胞与基底膜分离.
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大鼠肾移植模型技术的改进
目的为开展器官移植的实验研究,建立了大鼠异体肾移植模型.方法使用Wistar大鼠分别作为供者和受者,采用原位低温灌洗,肾动脉带一小段主动脉,肾静脉带一小段下腔静脉,输尿管末端带-直径约为0.5cm的膀胱瓣的供者手术方式;受者主动脉与供者主动脉、受者下腔静脉与供者下腔静脉进行端侧吻合,在受者膀胱上剪去-膀胱瓣与供者相同大小的圆瓣,然后进行一层膀胱吻合.结果第一阶段为实验探索阶段,经过半年近150次的实验摸索,克服了移植物灌洗、血管吻合、膀胱吻合等技术难关,终于建立了比较稳定的大鼠同种异体肾移植模型.第二阶段为模型成熟阶段,冷热缺血时间、血管吻合的速度以及手术时间都比第一阶段有所缩短.手术成功率为85%左右,动物死亡的原因主要为血管吻合口出血、灌洗不良、休克、血栓形成以及膀胱漏尿致弥漫性腹膜炎等.结论此模型容易掌握,可以在条件比较简单的实验室开展,除常规显微外科器械外不需要特殊的器械或设备.
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大鼠原位肾移植模型肾静脉吻合方法的改良
大鼠肾移植动物模型是免疫和移植相关研究的重要实验工具,模型建立需要熟练的显微外科技术.建立模型的难点就是要在短的时间内重建供肾的血液循环.在此过程中,肾动脉的吻合相对容易,而由于肾静脉壁菲薄,吻合时术者难以分清其前后壁,易造成血管扭曲、皱褶、吻合口瓶颈样狭窄,且耗时较长,故肾静脉的吻合又是供肾循环建立的难点.我们应用橡胶手套自制内支撑物,协助肾静脉的吻合,效果良好,报告如下.
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改良双肾移植法建立大鼠肾移植急性排斥反应模型
应用双肾移植法建立大鼠肾移植模型,操作难度小,成功率高,术后经病理切片证实为急性排斥反应,环孢素A可明显抑制该反应.
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Cyclomunine对同种异体移植反应性的抑制
Cyclomunine(CyM)可预防注射同种异体脾淋巴细胞引起的移物抗宿主反应.在大鼠肾移植中可延长移植物存活时间.16只Wister(Ag)大鼠从移植前一天开始,每天腹腔注射12.5毫克/公斤,另15只同种大鼠作对照.全部由同一人作肾移植.供体为Lewis大鼠(AgB).
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缺血时间对肾脏影响的实验研究
目的:研究不同热缺血时间大鼠肾脏的变化及移植肾的存活情况.方法:选择不同热缺血时间点(零时、15min、30min、60min),观察缺血后光镜下和透射电镜下肾脏组织的病理改变以及肾组织谷胱肽过氧化物酶(GSH-PH)、Na+-K+ATP酶和Ca2+-ATP酶活性、丙二醛(MDA)水平的变化,也测定缺血后肾静脉血和肾组织乳酸脱氢酶(LDH)的水平.并在不同热缺血时间,分别进行大鼠肾移植,观察手术后的存活率和肾功能的变化.结果:随缺血时间的增加,肾脏病理改变逐渐加重.在缺血30min肾组织内GSH-PX、Na+-K+ATP酶、Ca2+-ATP酶的活力明显下降,而LDH在缺血15min后就已经明显升高.缺血30min开始肾组织内MDA水平就已明显增高.不同热缺血时间的肾脏进行大鼠肾移植,随着缺血时间的延长,所需要的灌注液使用量增加,术后24h血肌酐的水平升高,而灌洗的效果、以及术后的存活率均下降.结论:单纯低温保存在鼠肾移植热缺血时间以不超过30min为宜.
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大鼠腹部血管铸形标本的制作
大鼠的肾脏、肝脏、胰腺移植模型是器官移植领域常用的实验动物模型,这些模型的制作,多选择腹主动脉、后腔静脉、肾静脉等血管重建移植器官血流.为了了解大鼠腹部血管的立体构筑,改良或重新设计大鼠肾移植手术方式,我们设计和制作了大鼠腹部血管铸型标本,取得了良好效果,现将方法介绍如下.
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大鼠同种异体肾移植实验模型的研究现状
动物肾移植模型被广泛用于器官保存及免疫等相关研究.目前已有多种动物模型用于实验研究,如猪、狗、兔、大鼠及小鼠等[1-5].其中以大鼠模型为常用.其优点有:1.动物来源多,经济;2.饲养简单;3.移植手术的无菌要求较大动物要小;4.应用近交系大鼠可在术后不用免疫抑制剂,自体移植器官能够长期存活;5.血管和输尿管的直径满足吻合的要求.缺点是手术难度大,成功率不高,要求实验者具有一定的显微外科技术基础.为提高大鼠肾移植成功率,在回顾近年此方面文献的基础上,本文就建立大鼠肾移植模型过程中有关问题进行简要回顾.
