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刺五加注射液的临床应用
刺五加注射液为五加科植物刺五加的茎叶经水醇法提取制成的棕红色灭菌溶液,含有榛皮酊、丁香苷和金丝桃苷等多种皂苷、多糖和黄酮类物质的混合物.随着刺五加注射液药理研究的深入,刺五加注射液已广泛应用于临床多种疾病的治疗,疗效确定,随着临床应用与研究领域的逐步进展,其显示出良好的应用前景,本文结合近年的文献,就其在临床多种疾病中的应用与研究综述如下.
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金丝桃苷的心脑血管药理作用研究进展
动物实验表明,金丝桃苷对心肌缺血再灌注,脑缺血再灌注,脑梗塞都显示良好的保护作用.该文综合国内外相关文献,综述了金丝桃苷的药理学研究进展.
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孕子保胎胶囊的提取工艺优化
目的 优化孕子保胎胶囊的提取工艺.方法 该方为甘肃静宁名医世家张兆南组方,对2013年1月—2016年1月门诊的312例患者进行临床研究发现,孕子保胎方在治疗不孕症和保胎方面效果显著.现研制为成方制剂胶囊,根据处方中药物的组方及主要活性成分,分为水提和醇提两部分,水提部分以金丝桃苷含量、干膏得率为考察指标,考察浸泡时间、加水量、提取时间、提取次数对提取工艺的影响;醇提部分以橙皮苷含量、干膏得率为考察指标,考察乙醇浓度、溶剂量、提取时间、提取次数对提取工艺的影响;两者均采用L9(34)正交实验设计,分别综合评价提取效率,采用SPSS 17.0统计学软件进行数据分析,确定佳提取条件.结果 水提正交数据显示各因素对提取效率的影响为A(浸泡时间)>D(煎煮次数)>C(煎煮时间)>B(加水量),其中各因素对比分析优选结果判定为A2B2C3D3.方差分析结果(见表3)显示,因素A(浸泡时间),D(煎煮次数),C(煎煮时间)对提取结果均显著性影响(P<0.05).综合分析,确定佳工艺为A2B2C3D3,即水提佳工艺参数采用加8倍量药材的水,浸泡1.5 h,提取1.5 h,提取3次;醇提正交试验数据显示各因素对提取效率的影响为A(乙醇浓度)>D(提取次数)>C(提取时间)>B(溶剂用量),其中各因素对比分析判定为A2B2C2D3.方差分析结果(见表6)显示,因素A(乙醇浓度),C(提取时间),D(提取次数)对提取结果均显著性影响(P<0.05).综合分析,醇提佳工艺参数采用60％乙醇,8倍量60％乙醇,提取1.0 h,提取3次.结论 优化的提取工艺科学、合理,为新药大生产应用,提供重要的参考价值.
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不同产地不同季节的千里光药材中指标成分的含量测定
目的 比较不同产地及不同采收季节的千里光药材中金丝桃苷和绿原酸的含量.方法 反相高效液相色谱法.结果 8个产地的千里光药材金丝桃苷和绿原酸的含量差异较大,金丝桃苷含量以浙江衢州所产高;绿原酸含量以广东连州所产高;不同采收季节的千里光药材金丝桃苷和绿原酸含量均以10月份所产高.结论 市场上全年采收的千里光药材给药品质量控制带来了困难,本实验数据显示千里光药材的佳采收期为9～10月.
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中药材鬼针草的定性和定量研究
目的 初步建立中药材鬼针草的质量标准.方法 以芦丁和金丝桃苷为对照品,对鬼针草药材分别采用薄层色谱法和高效液相色谱法进行定性和定量研究.结果 建立了以薄层色谱法鉴别鬼针草药材中芦丁和金丝桃苷的方法.芦丁的线性范围为3.11～99.55 μg· mL-,回归方程为:Y=16.783X-7.895(r=0.9999,n=6),平均加样回收率为96.75％,RSD为2.77％(n＝6);金丝桃苷的线性范围为3.14～100.6 μg·mL-1,回归方程为Y=22.425X-10.389(r=0.9998,n=6),平均加样回收率为94.89％,RSD为1.98％(n=6).结论 本实验方法简单,准确,重复性好,可用于鬼针草的定性鉴别和定量测定,有效控制鬼针草药材的质量.
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连蒲胶囊的质量标准研究
目的 建立连蒲胶囊质量控制方法.方法 采用薄层色谱法(TLC)对制剂中的苦参碱、冰片、石菖蒲和贯叶连翘进行定性鉴别；采用高效液相色谱法(HPLC)测定制剂中金丝桃苷、苦参碱的含量；采用气相色谱法(GC)测定制剂中冰片的含量；采用原子吸收分光光度法(AAS)、原子荧光法(AFS)和气相色谱法(GC)分别测定连蒲胶囊制剂中重金属及有害元素和有机氯农药残留量.结果 薄层色谱显色清晰且阴性对照无干扰.金丝桃苷在0.026～1.037μg范围内线性关系良好(r=1.0000),平均回收率为102.2％,RSD =0.4％ (n =6)；苦参碱在0.412～6.592μg/ml范围内呈良好的线性关系,回收率103.4％,RSD =1.0％ (n =9)；冰片在0.01977mg/ml ～0.3954mg/ml范围内呈良好的线性关系,回收率97.8％,RSD=1.9％ (n =9).重金属和农药残留检测显示制剂中含有微量铅(Pb)、镉(Cd)、砷(As)、汞(Hg)、铜(Cu)以及有机氯农药六六六(δ-BHC).结论 本方法定性专属性强,定量准确度高、重复性好,可用于连蒲胶囊的质量控制方法.
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高效液相色谱法测定治带片中金丝桃苷的含量
目的 建立测定治带片中金丝桃苷含量的高效液相色谱方法.方法 采用PhenomenexLUNA-C 18柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),以乙腈:0.1％磷酸溶液(10∶90)为流动相,流速1.0 ml/min,柱温30℃,检测波长360 nm.结果 金丝桃苷在1.2～24.0 μg/ml浓度范围内与峰面积呈良好线性关系(r=0.9998),平均加样回收率为98.4％,RSD 0.93％.结论 本方法简便,快速,准确,重复性好,可用于治带片中金丝桃苷的含量测定.
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离子对色谱法测定补肾益精丸中金丝桃苷的含量
目的：建立测定补肾益精丸中金丝桃苷含量的高效液相色谱方法。方法采用 Agilent HC-C18柱（4.6 mm×250 mm，5μm），以乙腈∶磷酸氢二钾溶液（10∶90）（0.85 g/L离子对试剂庚烷磺酸钠，用磷酸调节pH值4.8）为流动相，流速1.0 ml/min，柱温30℃，检测波长360 nm。结果金丝桃苷在3.0～60.0μg/ml浓度范围内有良好线性关系（r＝0.9999），平均加样回收率为98.2%，RSD为1.53%。结论本方法简便，快速，准确，重复性好，可用于补肾益精丸中金丝桃苷的含量测定。
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黄蜀葵花中金丝桃苷的提取分离及纯度检测
目的 研究黄蜀葵花中金丝桃苷的提取、分离、纯化方法.方法 采用聚酰胺柱层析、梯度洗脱方法提取分离黄蜀葵花中的金丝桃苷,以氢谱和碳谱鉴定其结构,以薄层色谱法、HPLC法进行纯度检查.结果 制得的金丝桃苷经薄层色谱法检查无杂质斑点,经HPLC法检测其纯度98.5%以上.结论 所建立的分离、纯化方法简便,成本低.
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金丝桃苷、淫羊藿苷在大鼠附睾精子冷冻保存中的作用
目的:本研究旨在观察金丝桃苷、淫羊藿苷在大鼠精液冷冻保存过程中的应用效果,并对大鼠精液冷冻保存体系进行优化.方法:将金丝桃苷、淫羊藿苷加入大鼠精液冷冻保护剂中,冷冻保存大鼠附睾尾部的精子,并评估冷冻前后精子活率指数,采用伊红染色评估精子畸形率.结果:添加金丝桃苷、淫羊藿苷的冷冻保护剂可以提高解冻后的精子活率指数.结论:金丝桃苷、淫羊藿苷在大鼠精液冷冻保存过程中有一定的保护作用.
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复合酶法辅助提取刺五加叶中金丝桃苷工艺研究＊
目的：文章通过复合酶法辅助提取刺五加叶中的金丝桃苷，并利用正交试验优化其提取工艺。方法：利用高效液相色谱法，以金丝桃苷为检测指标，对加酶量、温度、时间和pH值等因素，采用正交试验及方差分析法，以确定金丝桃苷复合酶法佳提取工艺。结果：单因素试验的结果表明，各种酶对金丝桃苷提取率均有一定程度的提高，各因素的影响水平从高到低分别为pH、中性蛋白酶、温度、时间、果胶酶、木聚糖酶和纤维素酶。通过正交试验分析可得：在复合酶为2%果胶酶、2%木聚糖酶、0.5%中性蛋白酶和0.5%纤维素酶，提取温度为30℃，提取为时间为10 min，pH=4.5时，提取效果佳，提取率为1.84%，与传统工艺相比，金丝桃苷产率提高了107%。结论：使用复合酶法辅助提取金丝桃苷可较大的提高产率，具有一定经济价值。
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照山白浸膏片TLC鉴别和HPLC特征图谱研究
目的 建立照山白浸膏片的TLC鉴别方法和HPLC特征图谱,为科学评价和有效控制其质量提供可靠方法.方法 采用2种展开系统建立照山白浸膏片中金丝桃苷、槲皮素和山柰素的薄层色谱鉴别方法.采用HPLC法建立液相特征图谱:以金丝桃苷为参照峰,采用C18色谱柱(250×4.6 mm,5μm);以乙腈(A)-0.1％磷酸溶液(B)为流动相,进行梯度洗脱(0-13 min,8％ A;13-28 min,8％A→21％A;28-46 min,21％ A;46-60 min,21％ A→40％ A;60-77 min,40％ A;77-80 min,8％A);流速:1ml·min-1;检测波长为366 nm;进样量:10μl;柱温:30℃.结果 鉴别分离良好.特征图谱有12个共有峰,在HPLC条件下均分离良好.结论 所建方法可实现全面和整体的评价,为有效提高照山白浸膏片质量控制水平提供依据.
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藏药杜鹃花的质量标准研究
目的：建立藏药杜鹃花的质量标准。方法：按《中国药典》2010年版（一部）附录相关方法测定不同批次藏药杜鹃花药材的水分、总灰分、醇溶性浸出物；采用显微、薄层色谱法建立其鉴别方法；采用HPLC法测定金丝桃苷、槲皮苷的含量。结果：确定了该药材显微鉴别特征，建立了薄层鉴别方法和金丝桃苷、槲皮苷含量测定方法。结论：该方法操作简单、稳定性和重复性良好，可用于控制杜鹃花药材的质量。
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消咳喘片中金丝桃苷的含量测定
目的 建立消咳喘片中金丝桃苷的含量测定方法.方法 采用Hypersil C18(4.6 mm×250 mm,5 μm)色谱柱,甲醇∶ 0.5%的磷酸水溶液(45∶ 55,三乙胺调pH至3)为流动相,流速为0.8 mL/min,柱温为30℃,检测波长为355 nm.结果 金丝桃苷在0.12～1.92 μg范围内线性关系良好,平均回收率为100.56%,RSD=2.10%.结论 所建立的方法准确、灵敏、重现性好,可用于消咳喘片的质量控制.
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金丝桃苷对免疫性肝损伤小鼠的保护作用
目的:观察金丝桃苷(Hyp)对刀豆蛋白A(Con A)诱导免疫性肝损伤小鼠的保护作用,并探讨其作用机制.方法:昆明种小鼠随机分为6组,分别为正常组,模型组,金丝桃苷低、中、高剂量(12.5,25,50 mg· kg-1)组和联苯双酯(200mg·kg-1)组.给药组连续ig给药10 d,末次给药后1h,除正常组外,其余各组均尾静脉注射Con A(20 mg·kg-1)造模,造模12h后,检测血清天门冬氨酸氨基转移酶(AST)和丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性;肝脏组织中丙二醛(MDA)的含量和超氧化物歧化酶(SOD)的活性;血清白细胞介素-2(IL-2),白细胞介素-4(IL-4),干扰素-γ(1FN-γ)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平,血中CD3+,CD4+和CD8+含量;并通过HE染色观察肝脏组织的病理学变化.结果:与正常组比较,模型组小鼠血清ALT,AST活性及肝脏组织MDA含量明显升高,肝脏组织SOD活性明显降低,IL-2,IL-4,IFN-γ和TNF-α水平明显升高,CD3+,CD4+和CD8+含量明显降低(P＜0.01);与模型组比较,Hyp明显降低免疫性肝损伤小鼠血清ALT和AST活性,降低肝脏组织MDA含量,升高SOD活性,同时明显降低IL-2,IL-4,IFN-γ和TNF-α水平,明显升高CD3+,CD4+和CD8+含量(P ＜0.05,P＜0.01);肝脏病理学检测显示,模型组肝脏组织病理损伤明显,Hyp能明显减轻Con A对肝脏组织的病理损伤.结论:Hyp对小鼠免疫性肝损伤具有一定的保护作用,其机制可能与清除自由基、减少炎性因子释放、调节T细胞亚群平衡有关.
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金丝桃苷对Aβ1-42介导的血脑屏障体外模型损伤的影响
目的:探讨金丝桃苷(hyperoside,Hyp)对淀粉样蛋白(Aβ1-42)介导的血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)体外模型损伤的影响.方法:本研究以Hyp干预纤维状Aβ1-42介导的bEnd.3细胞与原代星形胶质细胞(astrocytes,As) BBB体外共培养模型的损伤,通过检测各培养组荧光素钠的通透性,比较各组BBB渗透性的变化,评价Hyp对Aβ1-42介导的BBB的通透性的影响;采用噻唑蓝(MTT)比色法检测Hyp对Aβ1-42介导的bEnd.3细胞损伤的细胞活力影响;再以蛋白免疫印迹法(Westernblot)检测相关凋亡蛋白,初步探索其保护机制.结果:与模型组比较,Hyp低、中、高浓度组均能降低BBB的通透性(P ＜0.05,P＜0.01);Hyp中、高浓度组能显著提高bEnd.3细胞活性(P＜0.05);Western blot结果显示,经Hyp预处理的组别中,Bax/Bcl-2,cleaved半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)/Caspase-3的及细胞色素-C(Cyt-C)的表达量均明显下降,且差异均具有统计学意义(P＜0.05).结论:Hyp通过保护脑微血管内皮细胞抑制纤维状Aβ1-42诱导的BBB通透性增加.
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金丝桃苷对过氧化氢诱导的A549细胞氧化损伤的保护作用
目的:研究金丝桃苷对过氧化氢(H2O2)诱导的A549细胞氧化损伤的保护作用,并探讨其相关的作用机制.方法:体外培养A549细胞,采用H2O2(400 μmol.L-1)作用24 h,建立A549细胞氧化损伤模型,分为空白组,模型组(400μmol·L-1H2O2),阳性药(100μmol·L-1 N-乙酰半胱氨酸)组和不同浓度金丝桃苷(1,10,100 μmol·L-1)组.采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞活力,通过酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测活性氧(ROS),丙二醛(MDA)含量,乳酸脱氢酶(LDH),过氧化氢酶(CAT),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和超氧化物歧化酶(SOD)活性.通过罗丹明123染色法检测细胞线粒体膜电位改变.采用蛋白质免疫印迹(Western blot)检测沉默信息调节因子3(Sirt3),异柠檬酸脱氢酶2(IDH2)和锰超氧化物岐化酶(MnSOD)蛋白表达.结果:与模型组比较,金丝桃苷显著提高细胞存活率(P＜0.01),降低LDH的外漏,ROS和MDA含量(P ＜0.05,P＜0.01),明显增加CAT,SOD,GSH-Px活性(P＜0.05,P＜0.01).金丝桃苷能够显著提高线粒体膜电位,上调Sirt3,IDH2和MnSOD蛋白表达(P ＜0.05,P＜0.01).结论:金丝桃苷能够保护H2O2诱导的A549细胞氧化损伤,其作用可能与提高清除ROS能力,调控Sirt3线粒体途径相关.
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梅花配方颗粒中4种黄酮类成分含量测定
目的:建立HPLC测定梅花配方颗粒中芦丁、金丝桃苷、异槲皮苷和槲皮素含量的方法.方法:PhenomenexSynergi C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈(A)-0.1％磷酸(B)梯度洗脱,柱温30℃,体积流量1.0 mL·min-1,检测波长360 nm.结果:芦丁、金丝桃苷、异槲皮苷和槲皮素线性范围分别为0.230 2 ～2.877 5μg(r =0.999 2),0.1348～1.6850μg(r=0.999 5),0.195 4 ～2.442 5μg(r =0.999 1),0.033 8 ～0.422 5 μg(r =0.999 9)线性关系良好,平均加样回收率分别为98.39％,98.71％,100.00％,100.57％;RSD分别为1.7％,1.4％,1.8％,2.0％.结论:该测定方法简便快捷、准确、重复性好,为梅花配方颗粒的质量控制和评价提供了依据.
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辽宁省5种老鹳草中5种活性成分的含量测定
目的:建立HPLC同时测定老鹳草属5种老鹳草中原儿茶酸、没食子酸、柯里拉京、鞣花酸和金丝桃苷含量的方法.方法:采用AgilentTC-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相0.1％磷酸-乙腈梯度洗脱,流速1.0 mL· min-1,检测波长280nm,柱温30℃.结果:原儿茶酸、没食子酸、柯里拉京、鞣花酸和金丝桃苷5种成分的线性范围分别为0.500 ～5.000 μg(r=0.999 5),0.075 ～0.750μg(r=0.999 7),1.790～17.900 μg(r=0.999 9),0.580 ～5.800μg(r=0.999 6),0.065～0.650μg(r=0.999 6),平均回收率在94.05％ ～ 102.58％,RSD在1.6％ ～2.9％.结论:该方法简单、准确,具有良好的重复性和稳定性,可为老鹳草药材的质量评价提供一定的参考依据.
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趁赶山鞭中金丝桃苷的HPLC测定
目的:建立赶山鞭中金丝桃苷的含量测定方法.方法:采用VP-ODS C18(4.6 mm×150 mm,5±μm)色谱柱,以乙腈-0.1%磷酸溶液(14:86)为流动相,流速1.0 mL·min-1,检测波长为360 nm为HPLC检测条件测量7批赶山鞭含量.结果:赶山鞭中的金丝桃苷含量侧定方法在0.099 8～0.998 0时进样量与峰面积的线性关系良好(r=0.999 8),平均回收率为100.11%,RSD 1.20%a.结论:所建立的方法准确、灵敏、重复性好,可用于赶山鞭的质量控制.
