首页 > 文献资料
-
一种壳聚糖神经组织工程支架的制备及表征
目的:用自行研制的模具制备一种具有轴向排列多通道壳聚糖神经修复导管.方法:实验于2004-05/09在清华大学生物系生物材料与组织工程实验室完成.首先制备多孔或致密的壳聚糖空管,管内径为2～5 mm,壁厚0.2～1.0 mm.将一组不锈钢针平行贯穿于壳聚糖空管,用钢针固定片固定不锈钢针,然后在此壳聚糖空管中注入壳聚糖溶液,后用冷冻干燥法成型.然后,对所得到的支架进行理化性能表征,评价多通道壳聚糖导管的溶胀性、体外降解情况,并用瑞氏染色与扫描电镜用来观察N2a细胞(Neuroblastoma cells, mouse)在导管内生长情况.结果:①在0.1 mol/L磷酸盐缓冲液中溶胀后,多通道壳聚糖导管的内径无显著性变化(P > 0.01),管壁厚度增大明显(P < 0.01).②导管在溶菌酶溶液中降解8周后,形态结构无明显变化,而且保持了足够的机械强度和韧性.③瑞氏染色显示N2a细胞核染成深蓝色,铺展在通道表面及成团分布在导管内基质之中.扫描电镜观察可清晰地显示出细胞的形态及在导管中的分布情况.结论:实验制备的多通道壳聚糖导管具有合适的溶胀性、机械强度以及神经细胞亲和性,有潜在的研究与应用价值.
-
应用酶组织细胞化学技术对真空冷冻干燥保存兔角膜内皮细胞的研究
目的:探讨真空冷冻干燥保存法对于兔角膜内皮细胞活性的影响.方法:将冷冻及冻干保存兔角膜片分别复水及复温后,与新鲜角膜同时行内皮细胞三磷酸腺苷酶(ATPase)、琥珀酸脱氢酶(SDH)的酶组织细胞化学染色,观察3组酶活性的差异.结果:3组样本ATPase及SDH酶组化染色均呈阳性反应.实验组与对照组间ATPase和SDH酶的平均积分光密度值(IOD)差异具有统计学意义(P＜0.01).结论:真空冷冻干燥保存法可使离体角膜组织保持一定的活性.与新鲜及冷冻角膜相比,冻于法有望成为一种新的角膜长期保存方法.
-
载EPO腺病毒的PLGA纳米纤维支架在体内促进骨缺损修复作用
目的:将促红细胞生成素(EPO)腺病毒局限在应用部位,观察其在体内的促进骨形成作用.方法:采用冷冻干燥法,将增强型绿色荧光蛋白(EGFP)腺病毒与聚乳酸羟基乙酸共聚物(PLGA)纳米纤维支架复合作为实验组(PLGA/Ad-EGFP组),以等剂量的EGFP腺病毒为对照组,分别感染骨髓基质细胞(BMSCs),以BMSCs感染EGFP的荧光细胞面积比例检测病毒活力.采用Picogreen dsDNA定量检测试剂盒检测病毒释放动力学.将EPO腺病毒与PLGA纳米纤维支架冻干复合作为实验组(PLGA/Ad-EPO组),以单纯骨缺损为对照组,植入大鼠颅骨缺损处,在第4和8周采用Micro CT及组织学HE染色检测EPO腺病毒的新生骨面积百分比.结果:PLGA/Ad-EGFP组荧光细胞面积比例明显高于对照组(P＜0.05);腺病毒在PLGA上呈突释曲线,第1小时存留53.0％±5.6％,第16小时存留20.0％±3.3％.与对照组比较,PLGA/Ad-EPO组在第4周促进红细胞生成,并在第4及8周大鼠颅骨缺损修复,新生骨面积百分比达到25.0％±5.7％及35.0％±6.3％(P＜0.05).结论:应用冻干法将腺病毒与PLGA复合能够有效保存病毒活性,PLGA/Ad-EPO纳米纤维支架能够在一定程度上促进骨缺损修复.
-
冷冻干燥法制备1型糖尿病噬菌体展示疫苗
目的 采用冷冻干燥法制备1型糖尿病噬菌体展示疫苗.方法 将正交试验筛选的不同冻干保护剂与1型糖尿病噬菌体展示疫苗混合,优化冻干曲线进行冻干.检测冻干前后噬菌体疫苗的滴度,并通过各项指标对冻干后的疫苗进行评价.结果 经筛选,佳保护剂配方为:10.85%海藻糖+17.37%甘氨酸(w/v);佳冻干曲线为:SI:-40℃ 4 h,1.5℃/min;S2:-15℃ 5 h,1.5℃/min;S3:25℃ 4 h,1.5℃/min;真空度:0.02 mbar.冻干后疫苗滴度下降不超过0.5 pfu/ml,外观及电镜观察疫苗样品形态均较好,玻璃态转化温度能达到220℃以上,含水量小于3%.结论 以海藻糖、甘氨酸为保护剂,采用冷冻干燥法制备的1型糖尿病噬菌体展示疫苗具有保护剂组成成分少、热稳定性强、含水量低、冻干曲线简化、保存时间长等特点.
关键词： 冷冻干燥法 1型糖尿病噬菌体展示疫苗 保护剂 -
蜂王浆口腔崩解片的制备工艺研究
目的 优选冷冻干燥法制备蜂王浆口腔崩解片的佳工艺.方法 以吸湿曲线、崩解时间和硬度为考察指标,优选制备工艺和聚乙二醇4000用量,并考察其高温高湿下的稳定性.结果 优选工艺为蜂王浆90％、5％聚乙二醇4000溶液6.5％、5％阿斯巴甜溶液3.5％,预冻温度不高于-35℃.按优选处方和工艺制得的口腔崩解片,临界相对湿度由28％提高到52％,具有一定硬度,崩解时间在10 s内.结论 蜂王浆冻干口腔崩解片达到了设计要求,制备工艺合理可行,质量稳定.
-
配制麻疹-腮腺炎-风疹-水痘联合减毒活疫苗的各病毒原液适滴度研究
目的 研究配制麻疹-腮腺炎-风疹-水痘联合减毒活疫苗(measles-mumps-rubella-varicellacombined attenuated live vaccine,MMRV)的各病毒原液适滴度.方法 将麻疹、腮腺炎、风疹和水痘病毒原液分别冻干,检测各冻干单价疫苗的滴度和热稳定性,观察病毒滴度的下降幅度.将4种病毒原液按不同配比配制MMRV,检测配制前后的各病毒滴度,摸索配制MMRV的佳配比.按确认的佳配比配制MMRV并冻干,检测冻干MMRV的各病毒滴度和热稳定性,确定配制MMRV的各病毒原液适滴度.结果 各病毒原液冻干后,麻疹、腮腺炎、风疹和水痘病毒滴度分别下降约0.6、0.6、0.4 lgCCID50/ml和0.5 lgPFU/ml;各冻干单价疫苗37℃放置1周后,麻疹、腮腺炎、风疹和水痘病毒的滴度分别下降约0.6、0.5、0.5 lgCCID50/ml和0.5 lgPFU/ml.在配制MMRV过程中,仅腮腺炎病毒可能在一定程度上受到其他病毒的干扰.按确认的佳配比配制的MMRV冻干后,麻疹、腮腺炎、风疹和水痘病毒滴度分别下降约0.5、0.6、0.5 lgCCID50/ml和0.6 lgPFU/ml;冻干MMRV于37℃放置1周后,麻疹、腮腺炎、风疹和水痘病毒滴度分别下降约0.6、0.6、0.5 lgCCID50/ml和0.5 lgPFU/ml.结论 在按确认的佳配比配制MMRV时,麻疹、腮腺炎、风疹和水痘病毒原液的滴度需分别≥6.0、≥6.5、≥6.0 lgCCID50/ml和≥5.3 lgPFU/ml.
-
冻干b型流感嗜血杆菌结合疫苗稳定性研究
目的 对以乳糖作为稳定剂的b型流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae type b,Hib)结合疫苗冻干剂型进行稳定性研究.方法 选取3批冻干Hib结合疫苗,分别于2～8℃保存42个月,20～25℃保存7个月,37℃保存5周.并于考察期内对疫苗进行外观检查、检测回收率(KD ＜0.2)、游离多糖含量、水分和小鼠效力试验,观察其是否发生降解.结果 在考察期内,冻干疫苗小鼠效力试验阳转率均为100％,外观检查均符合规定,回收率(KD＜0.2)均≥68％,游离多糖均≤18％,水分均≤3.0％.各项指标均达到中国药典要求.结论 冻干疫苗于2～8℃保存42个月,20～25℃保存7个月,37℃保存5周质量稳定.
-
冷冻干燥同种异体肌腱移植修复手部肌腱缺损的疗效观察
目的探讨用冻干肌腱修复手部肌腱缺损的疗效。方法 1997年10月至2000年6月间，应用冷冻干燥处理的同种异体肌腱修复手部肌腱缺损25例32指，屈肌腱缺损15例19指，伸肌腱缺损10例13指。移植腱缝合方法均采用改良Kessler法。指屈肌腱缺损者，移植腱的缝合口选择在Ⅱ区外，A2滑车缺损者在移植肌腱的同时重建滑车。术后进行早期功能训练。18例因肌腱粘连作二期粘连松解术。疗效评定采用TAM评定标准。结果术后随访6 ～ 21个月，平均13个月。结果达优者24指，良5指，可3指，优良率为90 %。结论经冷冻干燥处理的同种异体肌腱用于临床可取得满意的疗效。
-
西罗莫司纳米脂质载体固化制剂的制备
采用冷冻干燥法以微晶纤维素AvicelPH-101与聚乙烯吡咯烷酮(PVP)K30的混合物(4∶1,w/w)为吸附性粉末固化西罗莫司纳米脂质载体分散液,并以再分散时间、平均粒径及分布、流动性和泄漏率等为指标,采用单因素试验优化固化处方.结果表明,3批按优化方法制备的西罗莫司纳米脂质载体周化制剂的休止角为(42.65±0.80)°,振实密度为(0.79±0.03)g/ml,且含量均匀度良好,再分散时间为(10.0±0.4)min,再分散液粒径(132.7±2.6)nm,分布系数0.297±0.01,ζ电位(-12.8±1.05)mV,冻干前后的泄漏率为(10.80±0.41)％.
关键词： 纳米脂质载体固化制剂 西罗莫司 固化 吸附性粉末 冷冻干燥法 -
冷冻干燥法在乳剂固体化中的应用研究
乳剂在贮存过程中存在诸多稳定性问题,如降解(水解)、奥斯瓦尔德熟化效应、粒径增大等.近年来,冷冻干燥技术在提高制剂稳定性方面得到广泛应用.但该法用于提高乳剂稳定性的研究尚不多见.本文综述了用冷冻干燥法制备冻干乳剂的处方因素(如乳化剂、冻干保护剂、辅料组成和配比)和冻干过程工艺条件的影响,以及冻干乳剂的几个重要考察指标.
-
外科植入引导牙周组织再生载药PLGA/CS/nHA复合膜的制备及表征
目的 制备聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)/壳聚糖(CS)/纳米羟基磷灰石(nHA)多孔性载药膜,用于外科植入牙周引导组织再生,并评价其体外性能.方法 按照PLGA/CS的质量比将实验设为4组:分别为100/0、90/10、80/20、70/30,采用冷冻干燥法制备PLGA/CS/nHA复合膜,并用聚乙烯吡咯烷酮(PVP)作为致孔剂.依据孔隙率、吸水率、力学性能、体外降解率筛选出优质量比的PLGA/CS/nHA复合膜作为药物载体,制备克林霉素缓释膜.采用扫描电子显微镜观察PLGA/CS/nHA复合膜的表面形貌,无水乙醇液体置换法检测复合膜的孔隙率,质量干湿率比考察复合膜的吸水率,电子万能材料实验机测试复合膜的湿态力学性能,质量损失考察膜的降解率,紫外分光光度法考察载药膜的体外药物释放特性.体外实验:在载药膜上接种牙周膜成纤维细胞(PLFs),培养1～7 d,采用CCK-8法测定细胞活性和增殖情况.结果 PLGA/CS质量比为90∶10时制备的PLGA/CS/nHA复合膜为理想,孔隙率为(28.66±1.35)％,吸水率为(108.65±2.27)％,拉伸强度为(2.36±0.04) MPa,断裂伸长率为(203.64±3.89)％,断裂力为(45.98±2.46)N,30 d时降解率为(17.60±0.86)％,大每日释放量为150 μg/mL,平稳释放药物并维持有效药物浓度时间＞15 d,载药膜能促进牙周膜成纤维细胞的增殖.结论 本研究制备的载药PLGA/CS/nHA复合膜孔隙率适中,体外降解与组织生长相适应,力学测试结果能够创造和维持牙周引导组织生长特定的空间,在一定时间内能持续稳定释放药物.
-
维生素A前体脂质体的研制及其特性考察
目的:研制维生素A前体脂质体,提高维生素A的稳定性.方法:采用冷冻干燥法,选择甘露醇做冻干剂制备维生素A前体脂质体,并考察维生素A脂质体的形态、粒径分布、包封率和稳定性.结果:维生素A前体脂质体经水合后呈单脂质体,脂质体粒径分布均匀,平均粒径0.615 μm,药物包封率为98.5%.在40℃贮存3个月,脂质体形成、粒径及包封率无明显变化.结论:前体脂质体能明显提高维生素A稳定性.
-
海参皂苷nobilisideA注射用脂质体冻干制剂的制备及其性质考察
目的:制备海参皂苷nobilisideA冻干脂质体并对其性质进行考察.方法:采用薄膜分散法制备了nobilisideA脂质体并将其冻干制成nobilisideA冻干粉,测定冻干脂质体的药物含量和包封率、粒径、ζ电位等指标,考察其与葡萄糖配伍的稳定性和溶血性,了解nobilisideA冻干脂质体的性质.结果:通过工艺优化,制备了以蔗糖为冻干保护剂的nobilisideA冻干脂质体,具有较好的成型性和复溶能力.测得冻干前后nobilisideA脂质体的百分含量分别为108.3%和108.6%,包封率分别为98.4%和97.8%,粒径分别为89.9 nm和115.8 nm,ζ电位分别为-19.9 mV和-15.9 mV.脂质体在葡萄糖输液中8 h内含量、包封率、粒径以及溶血率均无明显变化.结论:所制得的nobilisideA冻干脂质体粒径分布范围窄,包封率高,性质稳定,是一种很有应用前景的nobilisideA脂质体制剂.
关键词： 脂质体 nobilisideA 冷冻干燥法 包封率 稳定性 -
灯盏花素口腔速崩片的研制
目的 以灯盏花素为模型药物制备口腔速崩片.方法 以沉降容积比及崩解时间为指标,单因素法筛选片剂的处方组成及工艺,并优化制备工艺.结果 灯盏花素口腔速崩片以甘露醇、明胶、阿司帕坦与薄荷香精为辅料,经冷冻干燥法制备,口感良好,崩解时间为4 s,体外溶出度4min达98.72%.结论 灯盏花素口腔速崩片可迅速崩解于口腔内,制备工艺可行.
-
氯氮平口腔崩解片的研制
目的 以氯氮平为模型药物制备口腔崩解片.方法 以沉降容积比及崩解时间为指标,单因素法筛选片剂的处方组成及工艺,并优化制备工艺.结果 氯氮平口腔崩解片以甘露醇、明胶、阿司帕坦与薄荷香精为辅料,经冷冻干燥法制备,口感良好,崩解时间为5s,体外溶出度3 min达94%.结论 氯氮平口腔崩解片可迅速崩解于口腔内,制备工艺可行.
-
载尿激酶脂质微泡制剂的制备及其理化性质检测
随着超声造影剂的不断发展,超声造影剂在疾病的诊断方面发挥了巨大作用并且在疾病治疗方面也已成为国内外的研究热点.以脂质微泡为载体,将特定的药物、基因与脂质微泡相连接,与超声联用可达到药物在目标组织的富集,从而更好的发挥药物的治疗作用,并减少药物在全身的不良反应.国内外研究已有报道超声可增强溶栓药物的作用[1-3],若能将溶栓药物与微泡相结合将更有助于局部溶栓效果,并且可减少并发症.因此,溶栓治疗已成为载药微泡在疾病的治疗领域一个有前景的研究方向.本课题组制备了载尿激酶脂质微泡制剂及普通脂质微泡制剂,并初步评价了自制微泡的理化性质及载药微泡的药物包封率和经超声处理后药物的释放率.
-
蒸汽预复水在冻干红细胞复水中的影响及机制
目的 了解蒸汽预复水对冻干红细胞的保护机制,分析由于渗透压变化造成细胞体积变化而溶血的损伤机制,优化复水程序、降低溶血率.方法 将冻干后的红细胞置于37℃培养箱中预复水3 h后进行复水,并以未进行预复水的红细胞作为对照,对两组红细胞的形态学、溶血率、ATP含量、2,3-DPG含量及回收率进行评价.结果 红细胞溶血率实验组为22.2%±2.1%,对照组为35.4%±2.4%(P<0.05);红细胞2,3.DPG含量实验组为(7.01±1.17)μmol/gHb,对照组为(6.82±2.10)μmol/gHb(P>0.05);红细胞ATP含量实验组为(5.13±0.52)μmoL/gHb,对照组为(5.22±0.10)μmol/gHb(P>0.05);与对照组比较,实验组的压积回收率和细胞平均体积明显增高(P<0.05),体积分布宽度明显下降(P<0.05).结论 蒸汽预复水能够保护红细胞膜的完整性,大大提高冻干红细胞的回收率.
-
一种实用菌种的保存方法
菌种保存是细菌学检验、教学与科研的基础之一.菌种保存方法有多种,理想的为真空冷冻干燥法[1],但操作技术难度大,花费高,需特殊设备,一般单位不宜做到.而常规琼脂斜面保存法[2],常因传代次数多,易污染,易变异,给保存带来诸多不便.近几年来我们采用卵黄液普通安瓿熔封法超低温保存菌种,效果很好.现介绍如下:
-
超低温冷冻同种异体骨与骨制备的骨组织库建立及临床应用
目的 建立现代骨组织库,观察系列冷冻干燥同种骨移植的临床效果.方法 采用深低温冷冻法、真空冷冻干燥和辐照灭菌法进行保存,临床应用异体骨时,根据患者的需要和骨组织库的记录资料合理选择,运用于骨缺损填充、脊柱和关节融合手术89例.结果 术后随访6～24月,89例未见明显排斥反应,疗效满意.结论 冷冻干燥同种异体骨制备的松皮质填充骨、颈腰椎融合器等系列使用安全,保存和运输方便,用于修复骨缺损及脊柱融合等,是一种有效的方法.
-
冷冻干燥法制备α-细辛脑前体脂质体
目的:研制α-细辛脑前体脂质体.方法:采用冷冻干燥法,选择甘露醇/蔗糖做冻干剂,制备α-细辛脑前体脂质体,并考察水化后脂质体的形态、粒径分布、黏度和包封率.结果:α-细辛脑前体脂质体经水化后,脂质体粒径分布均匀,平均粒径为0.655μm,粘度为1.6 mPaS,药物包封率约96%.结论:冷冻干燥法可用于α-细辛脑前体脂质体的制备.
